Effects of ultrasound on cell growth and the production of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) were investigated using transgenic Nicotiana tabacum cell suspension cultures. The culture suffered a slight growth depression immediately after the sonication, but gradually recovered to normal growth within 2 days. When the cells were exposed to ultrasound, the level of secreted hGM-CSF was 2.14 times higher than that in normal condition. From the beginning to 6 days of culture, production of secreted hGM-CSF was higher than that of control and then decreased. At the end of culture, however, hGM-CSF was considerably increased up to 36.7%. In the case of intracellular hGM-CSF, the level was slightly higher than that obtained in normal condition. Total hGM-CSF production was 31.5% higher than that of control culture after 6 days. The highest amount of hGM-CSF was $34.9\;{\mu}g/L$.
Effects of immobilization on the production of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) by Nicotiana tabacum cells were investigated using alginate and polyurethane foam as immobilization matrices. Encapsulation of the cells in alginate decreased protein production by 50% compared with that of suspension culture. Maximum hGM-CSF concentration was obtained by the cells immobilizaed in polyurethane foam. High hGM-CSF production could be possible when polyurethane foam was used because of high specific production and easy immobilization for cell recycling process with high cell density.
Park Jong Ha;Choi Hyun Joo;Kwon Young Mi;Shin Byung Cheul;Kwon Young Dal;Song Yung Sun
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.6
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pp.1896-1903
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2004
Anglicae dahuricae Radix (ADR), the dried roots of Angelica Dahurica Benth et Hook (Umbelliferae), is a traditional herbal medicine used to treat colds, headache, skin diseases such as acne and possess analgesic, antipyretic and drainage effects. In the present study, the author evaluated the effect of ADR on regulation of inflammatory reaction. ADR reduced the ear-swelling responses derived from compound 48/80 in dose-dependent manner significantly. ADR inhibited the PMA plus A23187-induced productions of IL (Interleukin)-8, IL-1β, granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) and tumor necrosis factor (TNF)-α from human mast cells (HMC)-1. In addition, ADR blocked PMA plus A23187-induced ERK1/2 phosphorylation. Ⅰ suggest that ADR regulates inflammatory reaction through inhibition of inflammatory cytokines such as IL-8, IL-1β and GM-CSF.
The present study was designed to evaluate the effects of a recombinant human granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) on leukopenia and tumor growth in mice treated with DA-125, an adri-amycin (ADM) derivative. In normal mice, single intravenous injection of DA-125 produced transient leukopenia accompanied with weight loss and splenic atrophy in a dose-related manner. However, subcutane-ous administration of G-CSF (5$\mu$g/head) for 5 consecutive days after DA-125 resulted in a significantly elevated nadir of leukocyte counts and facilitation of recovery from the leukopenia. To investigate the effect of G-CSF on antitumor effects of DA-125, ADM (12 mg/kg) or DA-125 (40 mg/kg) was administered to Colon-26 murine adenocarcinoma-bearing Balb/c mice with G-CSF. Regardless of treatment with G-CSF, DA-125 and ADM markedly retarded the growth of implanted tumor, though they failed to increase mean survival time of tumor-bearing mice. These results suggest that G-CSF is able to not only ameliorate, but reconstitute DA-125-induced myelosuppression without affecting its antitumor potential.
It is well known that the cysteine proteases in excretory-secretory product (ESP) of Paragonimus westermani newly excysted metacercariae (PwNEM) are capable of degrading IgG in vitro. Recent evidence suggests that the IgG-coated surface, such as found on parasites, is one of the most effective physiologic stimuli for granulocyte activation. Therefore, this study was designed to investigate the effect of excretory-secretory product (ESP) of PwNEM on superoxide production of granulocytes stimulated with IgG The 96-well plates were coated with human IgG (0, 10, 30, $100{\;}\mu\textrm{g}/ml$) in the absence or presence of ESP. When granulocytes were incubated in the wells coated with human IgG in the presence of ESP, the level of superoxide production of granulocytes was reduced to about 90% when compared to the cells incubated in the wells coated with IgG alone. This inhibitory effect of the ESP on IgG-induced superoxide production of granulocytes was concentration-dependent. These results suggest that ESP secreted by PwNEM may be important in the control of effector functions of granulocytes stimulated with IgG in human paragonimiasis.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.330-330
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1994
항암화학요법후 가장 심각한 부작용의 하나는 중성구 감소에 의한 감염이다. 본원에서는 rhGM-CSF을 이용한 제 I상 임상연구에서 150-500$\mu$g/M$^2$/day가 biologically active dose임을 보고한 바 있다. 연자들은 연세암센터에 내원하여 진행성 악성종양으로 병리조직학적 진단을 받고 항암화학요법 시행후 골수억제가 예상되는 환자를 대상으로 GM-CSF 용량에 따른 안전성 및 독성을 검토하고 백혈구 감소증 및 감염의 예방, 치료효과를 분석하여 임상사용권장량을 결정하기위한 2상 연구덜 대상환자의 동의를 얻은후 시행하였다. 대상환자는 37명 (여 26, 남 11)이었고, 항암제는 Adriamycin, Cisplatin, VP-l6 이 주로 사용되었다. 최적임상사용권장량을 결정하기 위하여 1500$\mu\textrm{g}$/M$^2$/day을 12명, 250$\mu\textrm{g}$/M$^2$/day을 12명, 350$\mu\textrm{g}$/M$^2$/day을 13명의 환자에게 투여하였다. 첫번째 항암요법에는 rhGM-CSF을 투여하지않고 (비투여기) 두번째 항암요법에서는 항암요법후 익일부터 10일간 연속, 매일 1회 피하주사하여 (투여기), rhGM-CSF 투여기와 비투여기의 백혈구 감소중 정도의 차이를 비교하였다.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.306-306
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1994
항암화학요법후 가장 심각한 부작용의 하나는 중성구 감소에 의한 감염이다. 본원에서는 rhGM-CSF을 이용한 제 I상 임상연구에서 150-500$\mu$g/M$^2$/day가 biologically active dose임을 보고한 바 있다. 연자들은 연세암센터에 내원하여 진행성 악성종양으로 병리조직학적 진단을 받고 항암화학요법시행후 골수억제가 예상되는 환자를 대상으로 GM-CSF 용량에 따른 안전성 및 독성을 검토하고 백혈구 감소증 및 감염의 예방, 치료효과를 분석하여 임상사용권장량을 결정하기위한 2상 연구를 대상환자의 동의를 얻은후 시행하였다. 대상환자는 37명 (여 26, 남 11)이었고, 항암제는 Adriamycin, Cisplatin, VP-16이 주로 사용되었다. 최적임상사용권장량을 결정하기 위하여 1500$\mu\textrm{g}$/M$^2$/day을 12명, 250$\mu\textrm{g}$/M$^2$/day을 12명, 350$\mu\textrm{g}$/M$^2$/day을 13명의 환자에게 투여하였다. 첫번째 항암 요법에는 rhGM-CSF을 투여하지않고 (비투여기) 두 번째 항암요법에서는 항암요법후 익일부터 10일간 연속, 매일 1회 피하주사하여 (투여기), rhGM-CSF 투여기와 비투여기의 백혈구 감소증 정도의 차이를 비교하였다.
Magnesium (Mg) plays an essential role in physiological and metabolic reactions. Recently, there has been an increased interest in the role of Mg deficiency, particularly the relationship between serum Mg value and inflammatory response. This study was designed to determine the relationship between serum Mg deficiency with inflammatory response, electrolytes and hematological alteration over long-term periods. Sixteen male Sprague-Dawley rats were divided into two groups: control (n=8), and Mg deficiency group (MgD group, n=8). Chow and normal water (tap water) were regularly provided to the control group and Mg-depleted chow and third distilled water were regularly provided for 60 days to the MgD group. Body weights, Serum Mg, $K^+$, inorganic phosphorus (IP) and total iron binding capacity (TIBC) levels in the MgD group were lower than those of the control group (P<0.05). Granulocyte fraction and MCV, RDW and PDW levels were higher, whereas lymphocyte fraction, erythrocyte, hemoglobin and MCHC levels were lower in the MgD group than in the control group (P<0.05). MCP-1 and TNF-${\alpha}$ levels in the MgD group were greater than those of the control group (P<0.05). In conclusion, the results of the present study suggest that Mg deficiency over a long-term period had not altered total leukocyte concentration in the blood, but had detrimental effects, including disturbances of electrolytes balance, disturbance of iron indices, potential anemia and elevation of pro-inflammatory cytokine. However, further studies should be performed to determine the relationship between serum Mg deficiency and major organ damage or alteration.
Woo Suk Koh;Jong-Choon Kim;Shin Woo Cha;Young Min Kim;Sung Youb Jung;Se Chang Kwon;Gwan Sun Lee
Biomolecules & Therapeutics
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v.10
no.2
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pp.129-135
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2002
HM10411 is a recombinant granulocyte-colony stimulating factor (rG-CSF) that has been developing as a drug for neutropenia. In this study, antigenic potential of HM10411 was examined by active systemic anaphylaxis (ASA) in guinea pigs and passive cutaneous anaphylaxis (PCA) in guinea pig-guinea pig system. HM10411 was subcutaneously administered at 0,5, and 50 mg/kg and also as a suspension with adjuvant (50 mg/kg+FCA). Ovalbumin (OVA) as a suspension with adjuvant was used to induce positive control responses. In the ASA test, no symptoms except urination and evacuation that were considered as physiological phenomena were observed at 0 and 5 mg/kg. Two of 5 animals at 50 mg/kg showed sneering, dyspnea, or cyanosis. All animals in the adjuvant mixture group showed severe symptoms of anaphylatic shock and 3 of them died. In the PCA test, no antibody against HM 10411 was detected in the sera from the animals sensitized with 0 or 5 mg/kg. Only 1 serum sample from the animals immunized with 50 mg/kg showed positive reaction against HM10411, while all 5 sera collected from the HM10411 and FCA mixture group contained the HM10411-specific antibodies. These results suggest HM10411 is considered to have antigenicity In guinea pig.
Previously, we observed high level expression of goat β-casein/genomic hGH fusion gene in mammary gland of transgenic mice. To develop an expression vector to make a human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF) protein efficiently produced in milk of transgenic animals, we designed a new bicistronic vector using the goat β-casein/genomic hGH fusion gene as regulation sequences for expression and internal ribosome entry site (IRES) as a mediator for second gene expression. This vector was constructed by insertion of encephalomyocarditis virus (EMCV) IRES-dependent second gene region coupled with hG-CSF cDNA into 3' untranslated region of an intact hGH gene. By microinjcetion, four transgenic mice were generated and three of them transmitted the bicistronic vector to their progeny. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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