본 실험에서는 만성위염, 위궤양, 십이지장궤양, 위암발생의 원인균으로 알려진 H. pylori를 저해하는 특이항균물질을 생성하는 균주를 토양에서 분리한 방선균액과 곰팡이 추출액을 대상으로 탐색하여 곰팡이 균주번호 60686을 선별하였다. Jar fermentor로 배양하여 얻은 균체를 acetone 및 EtOAc로 추출하였고, 얻어진 추출액을 silica column chromatography와 LH-20 gel chromatography를 수행하여 활성분획을 농축하였고 HPLC를 사용하여 항균 활성을 나타내는 단일물질 IDA를 분리 정제하였다. 항균 활성물질 IDA의 구조를 MS, NMR 분석등을 통해 추정한 결과 곰팡이의 2차 대사산물인 cytochalasan의 전형적 구조를 갖는 분자식 $C_{32}H_{36}N_2O_5$의 chaetoglobosin A라는 물질로 판명되었다. 항균물질 IDA의 항균력을 paper disk법으로 실험한 결과 그람양성 균주중에서는 S. aureus SG 511, 285와 503 3주에서만 항균력을 보였고, 그람음성 균주중에서는 H. pylori 4주에서만 항균력을 보였으나 동일농도 처리시 H. pylori에 대한 항균력이 S. aureus에 비해 우수한 항균효과를 가진다고 판단되었다.
Clitoria ternatea or Commonly known blue pea, is a perennial climber crop native to Asian countries. The current study was aimed to evaluate the antimicrobial activity C. ternatea extract on food borne microorganisms and its antifungal effect on Penicillium expansum. The extract showed significant antimicrobial activity against 3 Gram positive bacteria, 2 Gram negative bacteria and 1 filamentous fungus on disc diffusion assay. The extract also showed good biocidal effect on all Gram positive bacteria tested and P. expansum. However, the kill curve analysis revealed that the fungicidal activity of the extract against P. expansum conidia was depend on the concentration of the extract and the time of exposure of the conidia to the extract. The scanning electron micrograph of the extract treated P. expansum culture showed alterations in the morphology of fungal hyphae. The germination of P. expansum conidia was completely inhibited and conidial development was totally suppressed by the extract, suggesting the possible mode of action of anthocyanin. Besides, the extract also exhibited 5.0-log suppression of microbial growth relative to control in the rice model. The results indicate the potential use of the C. ternatea anthocyanin as food biopreservative.
The antimicrobial activity of Manuka oil, a steam distillate from Leptospermum scoparium, was investigated, and it's MIC against ten kinds of microorganisms was determin ed. MICs against bacteria and fungi were measured by means of both two-fold dliution method and agar plate two-fold dilution method, respectively. MICs of Manuka oil against Staphylococcus aureus KCTC 1916 and Micrococcus luteus KCTC 1915, gram-positive microrganisms, were identical as 3.05 ${\mu}$g/ml, while it's antibacterial activity against gram-negative microrganisms such as Pseudomonas aeruginosa KCTC 2513, Escherichia coli KCFC 1682, Klebsiella pneunioniae KCTC 2001 or Proteus vulgaris KCTC 2433 was negligible(MIC: ${\geq}$ 1000 ${\mu}$g/ml), suggesting a high susceptibility of gram-positive bacteria to Manuka oil. In addition, MIC against Aspergillus niger KCTC 6077 was 24 ${\mu}$g/ml. and that against the other fungi, Tricophyton mentagrophytes KCTC 1374 and Candida albicans KCTC 1940 was ${\geq}$ 1000 ${\mu}$g/ml. When Manuka oil ointment was used in combination with other drugs. i.e.. gentamycin sulfate, chlotrimazol and hydrocortisone acetate, and diphenhydramine HCl and hydrocortisone acetate. it's antibacterial activity against Staphylococcus aureus KCTC 1916 was higher than Manuka oil ointment or other drugs alone. In conclusion, Manuka oil possesses a selective antibacterial activity against Staphylococcus aureus KCTC 1916, and can be used as a potent antibacterial agent against it.
An antimicrobially active bacterium which was identified as Bacillus brevis, was isolated from kimchi. The antimicrobial activity was found against various Gram-positive and Gram-negative bacteria including some pathogens food-spoilage microorganisms, and some yeast strains. The antimicrobial activity was especially strong against Bacillus anthracis and Shigella dysenteriae. The strong activity was observed during an early stationary phase in the culture when incubated at $37^{\circ}C$ with initial medium pH of 6.8. The antimicrobial activity was found to be stable at $90^{\circ}C$ for 30 min and in the pH range of 3-11, and it was insensitive to organic solvents including acetone, acetonitrile, ethanol, and methanol. Analysis of the bacterocin on tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel suggested a molecular mass of approximately 4.5-6.0 kDa. The antimicrobial substance was characterized as a bacteriocin, because of its proteinaceous nature and low molecular weight. The bacteriocin could potentially be used as a food preservative, because of its thermostable property and broad antimicrobial spectrum.
Two species of antimicrobial agent producing bacteria and one sensitive strain were isolated from soil. Those were identified as B. subtilis, B. licheniformis, and Curtobacterium sp. by morphological, biochemical, physiological and chemotaxonomic characteristics. These were designated as B. subtilis cx1, B. licheniformis cy2 and Curtobacterium sp. cf3, respectively. Antimicrobial agent produced by B. subtilis cx1 showed high antibacterial activity against gram positive bacteria including of B. subtilis, Curtobacterium sp., L. mesenteroids, Staphy. aureus, S. faecalis and even gram negative bacteria, P. aeruginosa. Antimicrobial agent from B. licheniformis cy2 showed slightly lower antimi crobial activity than that from B. subtilis cx1. These two strains showed maximum production of antimicrobial agents at 30oC for 9~21hr cultivation. Curtobacterium sp. cf3 showed more sensitive activity than a sensitive strain of B. subtilis ATCC 6633 which was same genus or species with the B. subtilis cx1 and B. subtilis cy2, when the antimicrobial agent producing strains, B. subtilis cx1 and B. subtilis cy2, were directly applied onto these sensitive lawns.
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of Salvia miltiorrhiza extracts on NIH 3T3 fibroblasts and KB cell lines. Disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The comparison of $IC_{50}$ of values of Salvia miltiorrhiza extracts in KB cell lines showed that their susceptibility to these extracts decreased in the following order: hexane extract > chloroform extract > methanol extract> dichloromethane extract > ethyl acetate extract>ethanol extract by the MTT method. The dried roots of Salvia miltiorrhiza was extracted several solvents, and then antimicrobial activity was investigated. The minimal inhibitory concentrations (MIC's) of the extract against microorganisms were also examined. Amtimicrobial activity of ketoconazol as reference was compared to those of extracts of hexane, chloroform, dichloromethane, ethyl acetate, ethanol and methanol. The antimicrobial activity of all extracts from the sample had growth inhibition activity against gram-negative bacteria, gram-positive bacteria and fungi. These results suggest that the hexane and chloroform soluble extracts of Salvia miltiorrhiza may be a valuable choice for the studies on the tumor cell lines and growth inhibition activity.
폐기름 유출지역에서 분리 동정된 미생물 Xl, X2, X3은 폐유나 그 주성분인 난분해성 물질들을 유일 탄소원으로 자랄 수 있었다. Naphthalene과 2-methyl naphthalene은 7일만에 약 80$\%$ 분해되었다. Hexane과 hexadecane은 거의 대부분 분해되며 60$\%$의 분해가 폐유에서 관찰되었다. 합성 계면활성제인 Triton X-100와 Tween 20은 세포의 성장과 분해에 오히려 저해함을 보였다. Xl, X2은 그람 음성을 X3은 그람 양성을 보이며 항생제 ampicillin에 저항성을 가진다. Xl의 30kb plasmid을 E.coli에 transform하여 유전공학적 활용 가능성을 보였다.
This study was performed to investigate the antimicrobial effect against food-borne pathogens of Sanguisorbae officinalis L. ethanol extract. The antimicrobial activity of the ethanol extract was determined using a paper disc-diffusion method and the diameter of the clear zone was measured. The diameters of the clear zone in the presence of 10 mg of the ethanol extract were the maximum against Staphylococcus aureus among the tested 4 gram-positive bacteria and Pseudomonas aeruginosa among the tested 7 gram-negative bacteria. Analysis of the minimum inhibition concentrations (MIC) showed that the ethanol extract exhibited a similar efficacy as sorbic acid, well-known chemical preservatives. The growth inhibitory effects of the ethanol extract in the concentrations of 250, 500, 1,000 and 2,000 mg/L on food-borne pathogens were determined against Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella Typhimurium and Pseudomonas aeruginosa. The growth of the microorganisms was significantly (p<0.05) inhibited by the ethanol extract in the concentrations higher than 250 mg/L. Thus, the results of the present study demonstrate that the ethanol extract exhibits antimicrobial effects against food-borne pathogens, suggesting that Sanguisorbae officinalis L. could be used as natural antibacterial agent in food.
Use of chemical preservative for controlling harmful microorganisms in food products has been debated due to public concerns about food quality because of perceived toxic and carcinogenic potential. Thus, use of non toxic natural antimicrobial agents has become essential. This study was investigated to determine the antimicrobial activity of water or ethanol extract of commercially available tea, and of solvent fractionated ethanol extracts obtained from steamed green tea. Both of water and ethanol extracts of green tea(steamed or roasted), oolong tea and black tea exhibited strong antimicrobial activity against gram positive and negative bacteria, but not effective against yeast and mold. Also, antimicrobial activity of ethanol extract of 4 different kinds of tea was stronger than that of water extract. Among 4 different tea, ethanol extract of steamed green tea was further fractionated. One thousand g/disk buthanol extract had the strongest antimicrobial activity against bacteria and mold. The concentration of the antimicrobial activity of buthanol extract in tested microorganisms ranged from 125~1000 g/disk except for Rhizopus javanicus. Antimicrobial activity of buthanol extract of steamed green tea was not destroyed by heating at 100oC for 60 min and at 121oC for 15 min, which is very stable over heat treatment. The inhibitory effect of the buthanol extract on the growth of Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus was investigated. Growth of both strains was started in the presence of 250 and 500 g/ml after 12 and 24 hour respectively, whereas complete inactivation of both strains was occurred in the presence of 1000 g/ml.
Antimicrobial cationic peptides have attracted increasing research and clinical interest as a natural antibiotics due to their broad spectrum of antimicrobial activites and the rapid development of multidrug-resistant pathogenic microorganisms. In this study, first, we synthesized artificial fusion partner and cationic peptide genes (lactoferricin, magainin, protegrin-1, and indolicidin). Second, we constructed recombinant expression vectors and then transformed Pichia pastoris. Finally, expressed cationic peptides were purified and tested for their antimicrobial activites. Antimicrobial activity has been tested upon the appearance of clearing zone on the plate with the lawn of gram negative E.coli XL- I blue and garm positive Staphylococcus aureus. Protegrin-1 and Indolicidin have apparant activity of cationic peotides. This fusion technique may lead to a general and suitable tool for production of pure antimicrobial cationic peptides in Pichia pastoris.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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