• 약학회지
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• 제55권4호
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• pp.277-283
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• 2011

Simultaneous monitoring of catecholamines and serotonin with their appropriate extraction from the biological samples is required in order to understand thoroughly the regulation of the central and peripheral nervous system. In the present research the segmented gradient elution with the solid phase extraction using a C18 cartridge rather than the previous isocratic elution with alumina extraction is successfully employed to determine norepinephrine (NE), epinephrine (E), dopamine (DA), serotonin (5HT), 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) and 5-hydroxyindoleacetic acid (5HIAA) simultaneously within 20 minutes using 3,4-dihydroxyhydrocinnamic aicd as the internal standard (IS). Linearities were obtained in the concentration range between $5{\times}10^{-6}M$ and $1{\times}10^{-4}M$ for all 7 compounds with detection limits of 0.6~1.9 ${\mu}M$. The present HPLC/ECD method yielded reasonable accuracy (relative error; -1.4~1.1%) and precision (relative standard deviation; 0.4~1.9%) for 9 measurements of the standard solution consisting of NE, E, DA, 5HT, DOPAC and 5HIAA compounds. Recoveries of catecholamines, serotonin and their metabolites from human serum were in the range of 57%~86%. While the concentrations of NE and 5HT in the serum of normal Sprague-Dawley rat were found as $1.4{\times}10^{-6}M$ and $2.6{\times}10^{-6}M$, respectively, the contents of NE and 5HT in the serum of the stressed rat were increased 5.6 times and 1.4 times more, respectively.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제49권6호
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• pp.829-834
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• 2011

난백에 함유된 lysozyme은 용균작용을 하며 ovalbumin은 면역계에서 항원으로써 역할을 한다. 난백분석에는 일반적으로 전기영동, 겔 투과 크로마토그래피, reversed-phase HPLC(RP-HPLC)를 사용하는데 신속한 분석을 위해 RPHPLC가 사용된다. HPLC 컬럼으로 C18 컬럼(Agilent, USA)을 사용하였다. 최적의 분리조건을 찾기 위해 이동상의 조성과 온도를 변화하였고 용량인자, 분리도를 계산하여 그 값을 비교하였다. 등용매 용리에서 acetonitrile(ACN), distilled ater(DW), trifluoroacetic acid(TFA)의 이동상 부피비를 30/70/0.1~60/40/0.1로 ACN 부피비를 10%씩 증가시키며 실험하였고 이 때 온도는 $20^{\circ}C$이었다. 기울기 용리에서는 ACN과 증류수의 비율을 20분 동안 10/90~60/40으로 증가시켰고 20, 30, $40^{\circ}C$의 온도변화를 주었다. 등용매 용리에서 이동상 조성이 50/50/0.1일 때 세 개의 피크로 분리되었고 개의 피크 중 첫 번째 피크가 lysozyme, 세 번째 피크가 ovalbumin임을 확인하였다. 기울기 용리에서는 온도가 $30^{\circ}C$일 때 네 개의 피크가 나왔으며 네 개의 피크 중 첫 번째 피크가 lysozyme, 세 번째 피크가 ovalbumin임을 확인하였다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제15권1호
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• pp.74-77
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• 1994

Rare earth elements (REE) were individual separated by applying the gradient elution via HPLC using ${\alpha}-hydroxyisobutyric$ acid (HIBA) as an eluent. However, the overlap of Y and Dy peaks was too severe to obtain the resolution of these two peaks. The target transformation factor analysis (TTFA) was applied to resolve the elution peaks of Y and Dy. [A]$_{raw}$ formed from the absorbances of mixed solution was factor analyzed. The abstract factor analysis(AFA) was used to determine the number of components that contributed to the poorly resolved peaks. The error theory in the AFA showed that the number of components was 2. The test vectors which correspond to pure component were selected from the standard solutions of Y and Dy. TTFA was accomplished by target testing. The results showed that the resolution of two peaks as well as the determination of Y and Dy were possible by the factor analysis.

• FOCUS: LIFE SCIENCE
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• 제1호
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• pp.9.1-9.5
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• 2024

Method development for complex low molecular mass (LMM) samples using reversed-phase (RP) separation conditions presents significant challenges due to the presence of many unknown analytes over wide concentration ranges. This guide aims to optimize method parameters-column length (L), temperature (T), flow rate (F), and final mobile phase conditions (Øfinal)-to maximize separation peak capacity. Validated by prior research, this protocol benefits laboratories dealing with metabolomics, natural products, and contaminant screening. This practical guide provides a structured approach to maximizing peak capacity for complex LMM separations. It complements computational optimization strategies and offers a step-by-step method development process. The Snyder-Dolan test is highlighted as essential for determining the need for gradient or isocratic elution and guiding column length decisions. The decision tree framework helps analysts prioritize variable optimization to develop effective separation methods for complex samples.

• 한국식품과학회지
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• 제20권6호
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• pp.856-861
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• 1988

본 실험은 Staphylococcus aureus의 한 균주로부터 A와 C, 두 종류의 toxin이 동시에 생성될 때 이들의 동시분리를 위하여 각종 분리방법을 연구하였다. 혼합된 toxin A와 C는 CM-column chromatography를 이용하여 pH-gradient법으로 용출했을 때 2개의 분획이 나타났으나 서로 완전히 분리되지 않아 다량의 서로 다른 toxin이 함유되어 있었고 Sephadex G-75, Sephacryl S-300, 그리고 ultro gel을 사용한 gel filtration에서는 하나의 분획을 나타내 상호분리가 불가능 하였으며 정제도와 분리도에서 가장 뛰어난 gel column을 이용한 FPLC도 toxin A와 C를 상호분리할 수 없었다. 그러나 CM-column을 이용한 FPLC에서는 enterotoxin A는 pH 6.8에서 그리고 enterotoxin C는 pH 8.6에서 각각 분리되었으며, immunodiffusion test 결과 enterotoxin A의 분획에서는 toxin C가 전혀 검출되지 않았고 enterotoxin C의 분획에서도 toxin A가 검출되지 않았다. 용출방법에 있어서는 CM-column을 이용한 FPLC에서 pH-stepwise법이나 pH-gradient법으로 enterotoxin A와 C type을 쉽게 동시에 분리할 수 있었다.

• 한국식품과학회지
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• 제33권3호
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• pp.282-287
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• 2001

인삼 조사포닌을 기존의 고온 MeOH 추출/n-BuOH 분획법 및 고온 MeOH 추출/Diaion HP-20 흡착/MeOH 용출법과 새로이 시도된 고온 MeOH 추출/cation AG 50W흡착/$H_2O$ 용출/n-BuOH 추출법(AG 50W법), 상온 MeOH 추출/Diaion HP-20 흡착/MeOH 용출법(상온추출법)과 EtOAc/n-BuOH 직접 추출법으로 분리한 다음 기존의 HPLC/RI 방법으로 ginsenoside조성을 비교한 결과 EtOAc/n-BuOH 직접 추출법을 제외하고는 큰 차이가 없었으나 분리능과 감도가 우수한 HPLC/ELSD방법을 사용한 결과, ginsenoside $Rb_2$, Rf, $Rg_1$ 및 $Rh_1$ 등을 뚜렷이 식별할 수 있었고 추출 및 분획방법에 따라 조사포닌간 ginsenoside의 현저한 조성차이를 볼 수 있었다. 특히 AG 50W법에 의해 분리된 조사포닌에서 뚜렷한 prosapogenin 피크를 볼 수 있었으며 LC/MS의 결과, ginsenoside $Rb_1$, $Rb_2$ 등의 7종의 주종 사포닌 이외에도 5종의 prosapogenin과 1종의 chikusetsusaponin을 포함한 총 13종의 ginsenoside를 동정하였다. 새로이 정립한 HPLC 분석조건, 즉 $NH_2$ 대신에 $C_{18}$ column을 사용하고 $KH_2PO_4/CH_3CN$ gradient로 상온추출법으로 분리한 조사포닌을 분석한 결과, malonyl ginsenoside 피크를 용이하게 확인할 수 있었다.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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• pp.280.1-280.1
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• 2003

The high-performance liquid chromatography method was performed for test method development of related compounds in pharmaceuticals. Using reverse-phase column and gradient elution of 1 ％ acetonitrile-acetonitrile: H20:triethylamine (70:30:0.5), lansoprazole, 2-hydroxybenzimidazole, 2-mercaptobenzimidazole, lansoprazole sulfone, lansoprazole sulfide could be individually identified and quantitated. (omitted)

• Journal of Nutrition and Health
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• 제24권3호
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• pp.199-205
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• 1991

비타민 A의 활성 대사물인 비타민 A arid(retinoir acid, Rh)를 사람의 간 조직내에서 처음으로 검출하고, 측정하는 방법을 고안하였다. Reverse phase HPLC에 gradient elution을 사용하는 이 방법은 Multiwavelength 검출법을 이용하여 RA, 비타민 A, 비타민 E 및 카로티노이드를 모두 약 30mg정도의 시료로부터 검출할 수 있었다. HPLC 분석에 소요되는 시간은 시료당 20분으로 상당히 신속하며 또 예민하다. 간 조직내의 총비타민 A량에 대한 Rh의 비율은 비타민 A의 축적량에 관계없이 일정한 편으로 약 $2.4\pm0.2%로$ 나타났다. RA의 간 조직내의 검출은 RA가 비타민 A의 체내 대사산물임을 다시 한번 확인시켰으며, 그 함량에 대한 정보는 총비타민 A량과 함께 비타민 A 영양 상태 판정에 보다 좋은 지표가 될 것이다. 특히 간 조직의 needle biopsy가 필요한 질병 상태의 경우, 비타민 A의 기능적 영양 상태판정을 가능하게 하여 질병의 진단 및 처치에 도움이 되리라 사료된다.

• KSBB Journal
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• 제14권1호
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• pp.109-113
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• 1999

이산화탄소를 용매로하는 초임계유체 크로마토그래퍼(SFC)방법을 이용하여 어유로부터 EPA및 DHA를 고순도로 분리정제하는 연구를 하였다. 질산은 칼럼을 이용하는 초임계 이산화탄소의 초기 압력조건 변화가 저 지방산의 용해도 및 분리도에 미치는 영향을 조사하였는데 압력이 증가될수록 저지방산의 용해도는 증가되었고, 반면에 EPA와의 분리도는 감소하는 경향을 나타내었다. EPA의 분리정제 효율을 높이기 위해 초임계 이산화탄소에 대한 단계별 밀도구매 방법을 적용하였다. 적용 결과 초기에 저지방산이 먼저 분리되었고, 계속해서 92.1%~97.8%EPA 순도를 갖는 분획들을 얻을 수 있었다. 순도가 높은 3개의 분획의 평균 순도는 95.6%이었고 회수율은 30%에 달하였다.

• Nuclear Engineering and Technology
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• 제25권2호
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• pp.259-264
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• 1993

조사후핵연료의 연소도측정에 1-octanesulfonate 를 양이온 교환체로 사용하고 $\alpha$-hydroxyisobutyric acid를 용리액으로 사용하는 동적계의 이온크로마토그래피를 적용하였다 Pu, U 및 Nd의 최적 분리조건을 찾기위해 분리조건들을 변화하였다. 이들 원소들을 $\alpha$-hydroxyisobutyric acid 용리액을 0.05 M과 0.40 M을 혼합시키는 기울기용리법으로 개별 분리한후 분취하여 동위원소희석 질량분석법으로 각각 정량하였다. 본 방법에 의래 구한 연소도 값을 기존의 음이온교환수지법에 의한 값과 비교한 결과 3.5 %차이 이내에서 두 값이 서로 일치하였다.