Poly-L-lysine (PLL) was reported to suppress mucin release from airway goblet cells during 30 min treatment period. In this study, we investigated whether PLL consistently suppresses mucin release from cultured airway goblet cells during 24 h after 30 min treatment and also specifically suppresses the release of mucin without any effects on the other releasable glycoproteins. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radiolabeled with $^3H$-glucosamine for 24 h and chased for 30 min in the presence of varying concentrations of PLL to assess the effects on $^3H$-mucin release and on the total elution profile of the treated culture medium. The total mucin content during 24 h after 30 min treatment of PLL was assesed to investigate the consistency of effects. PLL did not affect the release of the other releasable glycoproteins whose molecular weights were less than mucin, and decreased the total mucin content during 24 h after 30 min treatment. We conclude that PLL can specifically suppress mucin release from cultured airway goblet cells and the suppression on mucin release is consistent. This finding suggests that PLL might be used as a specific airway mucin-regulating agent by directly acting on airway mucin-secreting cells.
Objectives : The author intended to investigate Seonbangpaedoktang (SBPT) significantly affect in vivo and in vitro mucin secretion from airway epithelial cells. Methods : In vivo experiment, the author induced hypersecretion of airway mucin, hyperplasia of tracheal goblet cells and the increase in intraepithelial mucosubstances. Effects of orally-administered SBPT during 1 week on in vivo mucin secretion and hyperplasia of tracheal goblet cells were assessed. For in vitro experiment, confluent hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radiolabeled and chased in the presence of SBPT to assess the effect of the agent on 3H-mucin secretion. Total elution profiles of control spent media and treatment sample through Sepharose CL-4B column were analysed. Possible cytotoxicity of the agent was assessed by measuring LDH release. Also, the effect of SBPT on contractility of isolated tracheal smooth muscle was investigated. Results : SBPT inhibited hypersecretion of in vivo mucin and inhibited the increase of number of goblet cells ; SBPT did not affect in vitro mucin secretion and the secretion of the other releasable glycoproteins with less molecular weight than mucin from cultured HTSE cells, without significant effect on LDH release; SBPT did not affect Ach-induced contraction of isolated tracheal smooth muscle. Conclusions : SBPT can inihibit hypersecretion of in vivo mucin and the author suggest that the effect SBPT with their components should investigate further.
연구배경 : 기관지 천식등과 같은 만성 기도질환의 병태생리는 점액의 과분비, 배상세포의 과형성, 평활근의 비후와 호산구등의 염증세포의 침윤등으로 설명되고 있다. 배상세포의 증식에 대한 생화학적 기전은 이러한 양상을 만드는데 필요한 시간이 길고, 기도염증과 연관된 매우 복잡함 때문에 아직 잘 알려지지 않고 있다. 이에 본 저자들은 배상세포증식과 기도염증의 상관성을 알고자 그 첫 단계로 백서의 기관을 통한 $TiO_2$의 주입으로 단시간 내에 형성되는 배상세포증식의 동물 모형을 만들어 기도내 주로 어느 부위에서 배상세포의 과형성이 나타나는지 관찰하고 염증세포의 침윤 여부 및 dexamethasone 이 과형성된 배상세포 및 침윤된 염증세포에 대해 영향을 평가해 보고자 하였다. 방법 : 8주된 21마리의 수컷 Sprague-Dawley를 세 군으로 나누어서 첫 번째 군(group 1) 은 endotoxin-free water를 기관내 주입하고 두 번째 군(group 2)은 $TiO_2$를 주입을 하고 세 번째 군(group 3)은 $TiO_2$를 주입하고 dexamethasone을 $TiO_2$ 투여전날부터 희생전날까지 투여하였다. 흰쥐를 희생시켜 기관, 기관지와 폐 부위를 각각 절제하여 paraffin bloc을 만든 후 $4{\mu}m$의 section을 하여 PAS 염색한 후 각 부위에서의 상피세포에 대한 배상세포의 비를 구하여 각 군별로 비교하였고, Luna 염색으로 호산구의 침윤을 비교하였다. 결과 : 1. 기관에서의 배상세포의 비의 평균은 1군에서는 4.09$\pm$8.28%, 2군은 10.19$\pm$11.33%로 $TiO_2$를 주입한 2군에서 배상세포의 과형성을 관찰할 수 있었다 (P<0.01). 2. 주 기관지에서의 배상세포의 비의 평균은 1군에서 3.61$\pm$4.84%, 2군에서는 34.09$\pm$23.91%로 $TiO_2$를 주입한 2군에서 배상세포의 과형성을 관찰 할 수 있었다(P<0.01). 3. 세기관지 부위에서의 배상세포의 양성 incidence와 severity (R$\times$S)로 표시를 하였으며 이는 각각 1 군은 0, 2군은 0.3 이었다. 4. 침윤된 호산구는 1군(1.99$\pm$3.84%)에서보다 2군 (21.43$\pm$23.85%)에서 유의하게 증가되었다(p<0.05). 5. 1군, 2군, 3군의 주기관지내에서 배상세포의 과형성과 호산구 침윤간에는 의미있는 상관관계를 보였다(p=0.001). 6. dexamethasone이 배상세포의 과형성과 호산구의 침윤을 억제함을 관찰하였다. 결론 : 백서에서 $TiO_2$로 처치시 기도에서 배상세포의 과형성이 5일내에 주로 주 기관지에서 발생하였으며 호산구 침윤이 동반하는 배상세포 증식의 동물 모형이 만들어졌다. 배상세포의 과형성은 염증과 동반되며 dexamethasone 투여시 억제되므로, 배상세포의 증식기전 에서 기도내 염증과정이 주요한 역할을 하는 것으로 생각된다. 향 후 이러한 동물 모형은 배상세포 증식의 기전을 이해하는데 유용한 도구가 될 것으로 사료된다.
The intent of this study is to investigate whether two oriental medical prescriptions named haengsotang(HST) and gami-palmihwan(GPMH) significantly effect mucin release from cultured hamster tracheal surface epithelial(HTSE) cells, Confluent HTSE cells were metabolically radiolabeled with $^3H-glucosamine$ for 24 hrs and chased for 30 min in the presence of HST or GPMH to assess the effect of each agent on $^3H-mucin$ release. Possible cytotoxicities of each agent were assessed by measuring lactate dehydrogenase(LDH) release. Also, the effects of HST and GPMH on contractility of isolated tracheal smooth muscle were investigated. The results are consistant with the following assertions: (1) HST significantly inhibited mucin release from cultured HTSE cells, without cytotoxicity; (2) GPMH did not effect mucin release without cytotoxicity; (3) HST and GPMH did not effect contractility of isolated tracheal smooth muscle. These results suggest a need for further investigation of HST and its components, for its potential in oriental medicine prescriptions and novel agents that effectively regulate (inhibit) mucin secretion from airway goblet cells.
Kim, Ji Young;Kim, Dae Yong;Lee, Yun Song;Lee, Bong Ki;Lee, Kyung-Hoon;Ro, Jai Youl
Molecules and Cells
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제22권1호
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pp.104-112
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2006
We previously reported that DA-9601, ethanol herbal extract of Artemisia asiatica, inhibited histamine and leukotriene releases in guinea pig lung mast cells activated with specific antigen/antibody reaction. This study aimed to evaluate the inhibitory effect of DA-9601 on the OVA-induced airway inflammation in allergic asthma mouse model. BALB/c mice were sensitized and challenged with OVA. DA-9601 was administered orally 1 h before every local OVA-challenge. OVA-specific serum IgE was measured by ELISA, recruitment of inflammatory cells in BAL fluids and lung tissues by Diff-Quik and H&E staining, respectively, the expressions of CD40, CD40L and VCAM-1 by immunohistochemistry, goblet cell hyperplasia by PAS staining, activities of MMPs by gelatin zymography, expressions of mRNA and proteins of cytokines by RT-PCR and ELISA, activities of MAP kinases by western blot, and activity of NF-${\kappa}B$ by EMSA. DA-9601 reduced IgE level, recruitment of inflammatory cells into the BAL fluid and lung tissues, expressions of CD40, CD40L and VCAM-1 molecules, goblet cell hyperplasia, MMPs activity, expressions of mRNA and productions of various cytokines, activities of MAP kinases and NK-${\kappa}B$ increased from OVA-challenged mice. These data suggest that DA-9601 may be developed as a clinical therapeutic agent in allergic diseases due to suppressing the airway allergic inflammation via regulation of various cellular molecules expressed by MAP kinases/NF-${\kappa}B$ pathway.
The morphological studies on the cecal development in the 60-, 90-, and 120-day-old fetuses and the newborns of Korean native goats were investigated by scanning and transmission electron microscopy. The results were summarized as follows ; Scanning electron microscopic studies : 1. In the 60-day-old fetuses, fold-like shapes protrusion on the cecal mucosa surface appeared. In the 90-day-old fetuses, the cecal villi appeared to be columnar shapes. In the 120-day-old fetuses, the cecal villi showed various tongue-like or columnar shapes. In the newborns, only the rudimental trace of the villi and the intestinal glands were observed. Transmission electron microscopic studies : 2. In the 60-day-old fetuses, the cecal epithelia were simple columnar in some areas and stratified columnar in others, and the epithelial cells contained nuclei, nucleoli, ER, mitochondria, Golgi complexes, zonula occludens, desmosomes, digitiform intercellular junctions, and large masses of the glycogen granules. 3. In the 90-day-old fetuses, the cecal epithelia were simple columnar in some area and stratified columnar in other. The microvilli of the cecal epithelia became much larger and longer than those in the 60-day-old fetuses, and intercellular junctions were developed, and increased numbers of ER, mitochondria, Golgi complexes were observed and the goblet cells contained a lot of the secretory granules. 4. In the 120-day-old fetuses, the cecal epithelia were only simple columnar in all areas. Microvilli and cytoplasmic organelles were well developed and the irregular annular nuclei were observed. 5. In the newborns, the cecal epithelia were covered with extensive microvilli, and the goblet cells with secretory granules were protruded into the lumen. And some goblet cells secreted the secretory granules into the lumen.
Objectives: This study was undertaken to investigate the effects of Yijin-tang and GamiYijin-tang on the gastrointestinal functions of rats Methods: Sprague-Dawley rats were used as experimental animals, and were administered Yijin-tang (Sample I group, 47.5 mg/ml) and GamiYijin-tang(Sample II group, 38.37 mg/ml, Sample ill group, 85.3 mg/ml) water extract once a day. Changes of gastric juice volume and intestinal mobility index were measured. The effects on colitis induced by dextran sulfate sodium in the rats were also observed. Results: 1. Gastric juice volume was decreased significantly in the sample I group (P<0.05) compared to the control group; there was not significant effect in the sample II and sample III groups. 2. The moving distance of carbon bolus was increased significantly in the sample n (p<0.05) and sample II (p<0.05) groups compared to the control group; there was not significant effect in the sample I group. 3. The intestinal mobility index was increased significantly only in the sample II group (P<0.05) compared to the control group. 4. The feces consistency was increased significantly on the 3rd and 5th day of the sample I group (P<0.05), on 3rd, 4th, and 5th day of the sample II (p<0.05) and the sample III (p<0.05) groups compared to the control group. 5. The feces property index was increased significantly only on the 5th day of the sample III group (p<0.05) compared to the control group. 6. The number of WBC and RBC, levels of hemoglobin and hematocrit were not changed in all sample groups compared to the control group. 7. The number of the type B Goblet cells were increased significantly in the sample II (p<0.05) and the sample III (P<0.05) groups, but the number of the type C Goblet cells were decreased significantly only in the sample ill group (P<0.05) compared to the control group. Conclusions: According to the above results, GamiYijin-tang compared to the Yijin-tang were decreased hight significantly in gastrointestinal mucose and histological antidiarrheal function with protection of the goblet cell more excellently were observed.
Lee, Sang Hyub;Jung, Bong-Kwang;Park, Jae-Hwan;Shin, Eun-Hee;Chai, Jong-Yil
Parasites, Hosts and Diseases
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제52권3호
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pp.273-280
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2014
The changing patterns of goblet cell hyperplasia, intestinal epithelial cell turnover, and intestinal motility were studied in ICR and C57BL/6 mice infected with Gymnophalloides seoi (Digenea: Gymnophallidae). Whereas ICR mice retained G. seoi worms until day 7 post-infection (PI), C57BL/6 mice showed a rapid worm expulsion within day 3 PI. Immunosuppression with Depo-Medrol significantly delayed the worm expulsion in C57BL/6 mice. Goblet cell counts were increased in both strains of mice, peaking at day 1 PI in C57BL/6 mice and slowly increasing until day 7 PI in ICR mice. In C57BL/6 mice infected with G. seoi, newly proliferating intestinal epithelial cells were remarkably increased in the crypt, and the increase was the highest at day 1 PI. However, in ICR mice, newly proliferating intestinal epithelial cells increased slowly from day 1 to day 7 PI. Intestinal motility was increased in G. seoi-infected mice, and its chronological pattern was highly correlated with the worm load in both strains of mice. Meanwhile, immunosuppression of C57BL/6 mice abrogated the goblet cell proliferation, reduced the epithelial cell proliferation, and suppressed the intestinal motility. Goblet cell hyperplasia, increased intestinal epithelial cell turnover, and increased intestinal motility should be important mucosal defense mechanisms in G. seoi-infected C57BL/6 mice.
경골어류 4종(조피볼락, 용치놀래기, 송곳니베도라치 및 졸복)의 장관 상피 선조연 및 배상세포의 점액질의 조직화학적 성상을 밝히기 위해 PAS 반응, AB pH 1.0 및 pH 2.5, AB pH 2.5-PAS, AF pH 1.7-AB pH 2.5 및 HID-AB pH 2.5 염색법을 사용하였다. 장관 선조연의 점액질은 조피볼락의 근위장과 직장은 중성점액질만을, 중간장과 원위장은 중성점액질과 산성점액질의 혼합성이었으나 용치놀래기는 전 장관에서 중성점액질과 산성점액질을 함유하고 있었으며, 송곳니베도라치와 졸복의 전 장관은 중성점액질만을 함유하고 있었다. 중성점액질의 양은 조피볼락과 용치놀래기는 중등량 내지 상당량, 송곳니베도라치와 졸복은 미량 내지 소량이었다. 장 배상세포 점액질의 양과 성상은 어종 및 장 부위에 따라 차이가 있어 송곳니베도라치와 졸복은 중성점액질만을 함유하고 조피볼락과 용치놀래기는 중성 점액질, sulfomucin 및 sialomucin의 혼합성이었다. 중성점액질의 양은 졸복의 원위장 및 직장은 상당량 내지 다량이었고 조피볼락의 전장, 용치놀래기의 근위장, 원위장 및 직장, 졸복의 근위장 및 중간장은 중등량 내지 상당량이었으며 용치놀래기의 중간장은 미량 내지 소량이었다. 조피볼락의 장 배상세포는 미량의 강 sulfomucin, 약 sulfomucin 및 미량 내지 소량의 sialomucin을 함유하고 있었으며 직장을 제외한 용치놀래기의 장 배상세포는 미량 내지 소량의 강 sulfomucin과 sialomucin을 함유하고 있었다.
Kim, Ju-Ock;Kim, Hyung-Soo;Kim, Sun-Young;Jeong, Seong-Soo;Heo, Ho-Jin;Seok, Jeong-Ho;Lee, Choong-Jae
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제9권3호
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pp.155-158
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2005
In this study, we investigated whether sphingosine-1-phosphate, furosemide, and indomethacin affect mucin release from airway goblet cells. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial cells were metabolically radiolabeled and chased for 30 min or 24 hr in the presence of varying concentrations of the above agents to assess the effects on $^3H-mucin$ release. Sphingosine-1-phosphate stimulated mucin release during 30 min of treatment period in a dose-dependent manner. However, furosemide and indomethacin showed no effect on both basal and stimulated mucin release during 30 min or 24 hr of treatment period. We conclude that sphingosine-1-phosphate can affect mucin release by directly acting on airway mucin-secreting cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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