• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제21권4호
• /
• pp.363-369
• /
• 1998

Glutathione S-transferase placental form (GST-P) positive foci development and its expression in liver exposed by nongenotoxic carcinogens phenobarbital (PB) and clofibrate (CF), and genotoxic carcinogen 2-amino-3-methylimidazo[4,5-f] quinoline (IQ) were investigated as a measure of carcinogenic potential of these chemicals. Male F344 rats were initially given a single intraperitioneal injection of diethyinitrosamine (200 mg/kg), and 2 weeks later, animals were fed diets containing 0.03% IQ or 0.5% CF or 0.05% PB or basal diet as a control for 6 weeks. All rats were subjected to two-thirds partial hepatectomy (PH) at week 3. Sequential sacrifice of rats was performed at 8 weeks or 52 weeks, and liver tissues were examined for immunohistochemical staining of GST-P positive foci. The numbers (No./$cm^2$) and areas ($mm^2$/ $cm^2$) of GST-P positive foci were increased by IQ or PB, but were decreased by CF compare to the control. Consistent with the development of GST-P positive foci, a time-related increase in the expression of GST-P mRNA was found in the rats treated with IQ, whereas CF decreased it. The incidence of hepatocellular carcinoma at 52 weeks was increased by all three chemicals. These results show that PB and IQ induced GST-P positive foci, but the peroxisome proliferator CF did not, which suggest that the prediction of carcinogenic potency based on the development of prenoplastic foci may cause false negative in a particular category compounds like peroxisome proliferators.

• Korean Journal of Acupuncture
• /
• 제20권1호
• /
• pp.65-70
• /
• 2003

천궁약침액을 7일간 중완혈, 간수혈 및 임의혈에 투여한 후 마우스의 간에서 유도되는 phase II enzyme 유도 효과를 살펴본 결과 마우스의 간 조직에서 Phase II 효소의 활성이 증가된 것으로 보아 천궁약침액은 외부물질이나 대사산물에 의해 일어날 수 있는 암발생 억제 효과가 있는 것으로 사료된다.

• 농약과학회지
• /
• 제10권1호
• /
• pp.50-55
• /
• 2006

본 연구는 강원도 고랭지 배추경작지에서 채집한 chlorpyrifos 포장저항성 계통의 배추좀나방에서 추출한 무독화 효소 esterases와 glutathione-S-tranferase(GST)의 활성과 단백질의 sequestration 비율 및 acetylcholinesterase(AChE) insensitivity를 측정하여 저항성 발달기작을 구명하고자 수행되었다. Esterases의 경우 저항성과 감수성 배추좀나방간의 활성 차이는 없었으나, 전기영동상에서는 특정 isozyme의 차이가 확인되었으며, GST 활성은 포장저항성 계통이 감수성 계통보다 약 1.5배 높았다. 두 계통 간 단백질의 sequestration 차이는 없었으며, chlorpyrifos에 대한 AChE의 sensitivity는 포장저항성 계통의 AChE가 감수성계통보다 약 460배 낮은 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 실내에서 저항성을 유도하여 파악한 배추좀나방의 저항성 특성결과와 동일한 것으로 강원도 고랭지 chlorpyrifos 포장저항성 배추좀나방의 저항성 발달은 AChE의 insensitivity가 주요 요인이며, 부가적으로 GST의 활성 변화도 작용하는 것으로 판단되었다.

• 한국조리학회지
• /
• 제17권5호
• /
• pp.241-252
• /
• 2011

본 연구는 천일염, 구운 소금, 1회 구운 죽염과 9회 구운 죽염으로 만든 된장에서 항암효과를 평가하기 위하여 수행되었다. MTT 분석에서 천일염된장(S-D), 구운 소금된장(R-D), 1회 구운 죽염 된장(B1-D) 및 9회 구운죽염 된장(B9-D)을 0.05%와 0.1%를 첨가하였을 때 인체위암세포인 AGS의 증식에 대하여 상당한 저해효과(64-87%)를 나타내었다. Sarcoma-180 세포를 주사한 Balb/c 마우스 가운데 4종류의 된장을 투여한 쥐의 체중, 간장, 비장, 간장과 심장의 무게는 된장을 투여하지 않은 군보다 무거웠다. 또한 4가지 종류의 된장은 쥐의 종양 형성을 크게 저해하였으며, 특히 R-D와 B1-D는 1.0mg/kg 투여함으로써 97%의 종양세포의 성장억제를 나타내었다. 자연살해세포의 활성은 4종류의 된장을 투여한 쥐에서 상당히 높았으며 R-D를 투여한 쥐에서는 88.2%의 강한 활성을 나타내었다. 4종류의 된장을 투여한 쥐에서 glutathione S-transferase(GST)는 된장을 투여하지 않은 쥐보다 높았으며, 특히 GST 활성은 B1-D를 투여한 군에서 가장 높게 나타났다. 이러한 결과들은 여러 가지 종류의 소금이 된장의 항암활성에 미치는 영향에 차이가 있는 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
• /
• 제16권3호
• /
• pp.369-374
• /
• 2006

본 연구는 단삼 분획추출물로부터 in vitro와 in vivo상에서 QR과 GST의 활성 유도와 GSH의 함량변화를 지표로 암예방 효과를 측정하였다. Hepalcla7 세포에 대한 in vitro상에서의 실험결과 QR 활성 유도율은 70% EtOH 추출물 50 ${\mu}g/ml$ 처리군에서 2.5배로 가장 높은 유도율을 나타내었고, GST 활성 측정은 EtOAc추출물 50 ${\mu}g/ml$농도에서 1.4배의 유도율을 나타내었다. GSH 생성변화를 살펴본 결과에서는 $H_2O$추출물, 70% EtOH 추출물 그리고 water layer 추출물 50 ${\mu}g/ml$ 농도에서 높은 생성율을 나타내었다. 이상의 결과에서 QR활성과 GSH 함량변화에서 높은 증가효과를 나타낸 70% EtOH 추출물을 관류법으로 마우스에 투여하여 in vivo 상에서의 QR과 GST의 활성 변화와 GSH 함량을 측정한 결과 QR, GST활성과 GSH함량이 250 mg 투여시 각각 1.7배 및 1.5배의 활성 증가와 1.4배 함량증가를 측정할 수 있었음으로 70% EtOH추출물은 암예방효과가 가장 높은 것으로 생각된다.

• 농약과학회지
• /
• 제9권4호
• /
• pp.338-346
• /
• 2005

Carbendazim의 랫드 간 해독체계에 대한 영향을 검색하기 위하여 간장독성의 지표 효소인 혈장 ALT(alanine aminotransferase) 및 AST(aspartate aminotransferase) 활성, 간에 대한 독성, 해독 및 대사에 대한 영향을 구명하기 위하여 간 GSH(glutathione), GST(glutathione-S-transferase), cytochrome P450 및 cytochrome P450 reductase 활성을 375, 750, 1,500 mg/kg 약량에서 측정한 결과 혈장 ALT 및 AST 활성이 120분 후에 약간의 증가가 있었으나 특이한 독성증상은 관찰되지 않았다. GSH는 고농도와 중농도 120분에서 20%의 함량증가가 있었고, GST는 120분까지 $36{\sim}50%$ 정도의 활성저해가 있었으나 240분에는 활성이 회복되었다. Cytochrome P450함량은 60분까지 $25{\sim}50%$까지 함량이 저하되었으나 120분에 70%이상 회복되었고, 240분 저농도에서는 거의 회복되었으며, cytochrome P450 reductase도 120분까지 $25{\sim}50%$ 활성저해가 있었으나, 240분에는 무처리 군의 활성과 유사하게 회복되어 대사관련 효소에 대한 손상은 크지 않을 것으로 판단되었다. 이상의 결과에서 benzimidazole 계 살균제인 carbendazim은 생체내 해독 및 대사관련 체계에 영향이 적은 농약으로 급성적인 중독은 일으키지 않을 것으로 판단되었다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
• /
• 제12권1호
• /
• pp.32-47
• /
• 1995

생쥐의 백혈병세포 L1210과 항암제에 대하여 내성이 유도된 L1210AdR, L1210VcR과 L1210Cis에서 glutathione의 농도와 glutathione의 합성 조절에 관여하는 ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase(GCS)와 ${\gamma}$-glutamyl transpeptidase (GGT), 세포 이물질을 축합하는데 촉매하는 glutathione S-transferase(GST)의 효소 활성도와 유전자의 발현 여부를 관찰하였다. 세포내 glutathione농도(${\mu}M/mg$ protein)는 L1210이 $0.41{\pm}0.003$, L1210AdR가 $0.73{\pm}0.006$, L1210VcR은 $1.16{\pm}0.060$, L1210Cis가 $2.19{\pm}0.282$으로 모세포에 비하여 내성세포에서 통계적으로 유의한 증가를 관찰하였다. Buthionine sulfoxamine(BSO)를 1 ${\mu}M$농도로 첨가하여 12시간 배양한 세포들에서의 glutathione농도는 L1210이 88%, L1210AdR가 85%, L1210VcR이 89%, 그리고 L1210Cis는 79%의 감소를 보였다. GCS의 활성도(nM/mg protein/min)는 L1210이 104인데 비하여 L1210AdR가 128, L1210VcR는 227, 및 L1210Cis는 212로 증가하였다. GGT의 활성도(nM/mg protein/min)는 L1210이 $2.15{\pm}0.531$이었고, L1210AdR은 $2.80{\pm}0.498$, L1210VcR은 $2.42{\pm}0.389$, 그리고 L1210Cis는 $2.98{\pm}0.623$으로 내성인 세포들에서 증가하였으며 L1210AdR과 L1210Cis에서 유의하였다. GST활성도(nM/mg protein/min)는 L1210이 $16.70{\pm}4.798$이었고, L1210AdR은 $14.51{\pm}3.402$, L1210VcR은 $19.52{\pm}4.255$, L1210Cis $17.77{\pm}4.495$로 L1210VcR과 L1210Cis가 약간의 증가를 보였으며, L1210AdR은 오히려 감소를 보였다. DNA의 slot blot에서 GCS, GGT, GST 유전자의 모세포와 내성세포간에 별다른 차이를 보이지 않았다. Northern hybridization에서 GCS는 약 4.5kb 크기의 band, GST-${\pi}$는 약 1.05kb 크기의 band를 보였으며 내성세포 모두에서 발현 증가가 관찰되었다. GGT의 경우 크기가 다른 6개의 band가 보였으며 특히 11.5 kb크기의 band에서 L1210AdR과 L1 210VcR의 발현이 증가하였으며, L1210VcR에서는 L1210과 다른 내성세포에서 보이는 1.95kb크기의 band가 보이지 않고 2.2kb 크기의 다른 band가 관찰되었다. 이상에서 L1210AdR과 L1210VcR의 내성에는 mdr1 유전자가 관여하고, L1210Cis의 내성에는 특히 glutathione이 중요하다. GCS, GGT 및 GST등의 활성도 및 유전자의 발현도 내성세포들에서 증가하였으며 이중 GCS는 내성세포내의 glutathione 합성에 가장 중요한 조절인자라 할 수 있다.

• Preventive Nutrition and Food Science
• /
• 제4권4호
• /
• pp.260-264
• /
• 1999

Korean traditional fermented soy paste (doenjang) prolonged the life span of Balb/c mice injected with the sarcoma-180 cells. The activities of liver enzymes, such as xanthine oxidase, aminopyrine N-demethylase, aniline hydroxylase, ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase, glutathione reductase and glutathione S-transferase (GST), and the contents of lipid peroxide and glutathione were determined from the sarcoma-180 cell injected mice that were treated with methanol extracts from doenjang, miso and soybean. The content of lipid peroxide and the activity of xanthine oxidase in the liver of Balb/c mice which were increased by the transplantation of the sarcoma-180 cells were decreased by treatment with the methanol extract from doenjang. But the activities of aminopyrine N-dementhylase and aniline hydroxylase were not affected by the treatment of methanol extracts from doenjang to the mice injected with the sarcoma-180 cells. The content of glutathione, the activities of glutamylcysteine synthetase, glutathione reductase and glutathione S-transferase decreased by the injection of the sarcoma-180 were recovered considerably by the treatment of the methanol extract from doenjang.

• 생약학회지
• /
• 제28권1호
• /
• pp.48-53
• /
• 1997

This study was performed to elucidate the possible antioxidative effects of several wild plant extracts. Wild plants were extracted with methanol or water using general method. In first experiments, antioxidative effects were measured by lipid peroxidation using rat brain homogenate. Coptis japonica extract showed the highest antioxidative activity among the 15 wild plant extracts. In second experiments, rats were fed on the semipurified diets with or without Coptis japonica extracts at the level of 0.5% for 4 weeks. MDA production of liver homogenate were significantly lower in the rats fed Coptis japonica extracts (P<0.05). Cytosolic catalase. GPX, and SOD activities were not changed, whereas the activities of GST and glutathione level were significantly higher in rats fed Coptis japonica extracts (P<0.05). These results suggest that Coptis japonica extract has an antioxidative effect through increasing GST activity and glutathione level and decreasing MDA production.

• BMB Reports
• /
• 제31권3호
• /
• pp.287-295
• /
• 1998

Acetolactate synthase (ALS) is the first common enzyme in the biosynthesis of L-Ieucine, L-isoleucine, and L-valine. The sulfonylurea-resistant ALS gene from Nicotiana tabacum was cloned into the bacterial expression vector pGEX-2T. The resulting recombinant plasmid pGEX-ALS3 was used to transform Escherichia coli strain XL1-Blue, and the mutant tobacco ALS (mALS) was expressed in the bacteria as a protein fused with glutathione S-transferase (GST). The fusion product GST-mALS was purified in a single step on a glutathione-Sepharose column. ALS activities of 0.9-2.5 ${\mu}mol/min/mg$ protein were observed in the GST-mALS, and the Km values for pyruvate, FAD, and TPP were 10.8-24.1, $(1.9-8.9){\times}10^{-3}$, and 0.14-0.38 mM, respectively. The purified GST-mALS was resistant to both the sulfonylurea and the triazolopyrimidine herbicides, and lost its sensitivity to end products, L-valine and L-leucine. For comparision, the tobacco wild-type recombinant ALS fused with GST, GST-wALS, was also characterized with respect to its pyruvate and cofactor bindings. These results suggest that the purified mutant recombinant tobacco ALS was functionally active, that the mutations resulting in herbicide resistance has affected pyruvate and cofactor bindings," and that the two classes of herbicides interact at a common site on the plant ALS.