The changes in expression of copper-zinc superoxide dismutase (CuZn-SOD), manganese superoxide dismutase (Mn-SOD) and glutathione peroxidase (GPX) in light-damaged rat retinas were examined. Sprague-Dawley rats (male, 6-weeks-old) were maintained on a cyclic photoperiod (12 hours light and 12 hours darkness) for 2 weeks. The illumination intensity during the light period was 80 lux. To induce light damage to the retina, a high-intensity illumination (3000-lux) was applied to the animals for 24 hours. After light exposure, the animals were returned to cyclic lighting. Eyes were enucleated 12 and 24 hours after light exposure started or 1,3, and 7 days after light exposure ended. Eyes were fixed and embedded in paraffin wax. Tissues were cut into 4${\mu}{\textrm}{m}$-thick sections. Sections were immunostained using antibody against CuZn-SOD, Mn-SOD, GPX and 8-hydroxy-deoxyguanocine (8-OHdG) as oxidative stress marker. 8-OHdG was observed in the outer nuclear layer (ONL) and retinal pigment epithelium (RPE) during light exposure. In light-damaged retinas CuZn-SOD labeling was up regulated in the ONL and RPE. Mn-SOD labeling was up regulated in rod inner segments (RIS) during light exposure and that in the RPE was up regulated after exposure. GPX labeling was observed in rod outer segments (ROS) during light exposure. GPX labeling was also observed in the RPE during and after light exposure. All three enzymes were observed in the outer retina, which suffered light damage, but occurred in defferent layers except within the RPE, in which case all three were expressed. These enzymes may play complementary roles as protective factors in light-damaged retinas.
Superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPX), and catalase (CAT) play crucial roles in balancing the production and decomposition of reactive oxygen species (ROS) in living organisms. These enzymes act cooperatively and synergistically to scavenge ROS. In order to imitate the synergism of these enzymes, we designed and synthesized a novel 32-mer peptide (32P) on the basis of the previous 15-mer peptide with GPX activity and a 17-mer peptide with SOD activity. Upon the selenation and chelation of copper, the 32-mer peptide was converted to a new Se- and Cu-containing 32-mer peptide (Se-Cu-32P) that displayed both SOD and GPX activities, and its kinetics was studied. Moreover, the novel peptide was demonstrated to be able to better protect vero cells from the injury induced by the xanthine oxidase (XOD)/xanthine/$Fe^{2+}$ damage system than its parents. Thus, this bifunctional enzyme imitated the synergism of SOD and GPX and could be a better candidate of therapeutic medicine.
In the present study, we investigated and compared the cardiopulmonary and oxidative stress effects of dogs undergoing open and thoracoscopic lung lobectomy. Ten healthy dogs, 5-8 years old, weighing 9-12 kg were used. The animals were randomly assigned to one of two groups according to the type of surgical procedure; open (group 1, n=5) or thoracoscopic lung lobectomy (group 2, n=5). Cardiopulmonary parameters, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPx) concentrations were measured. There were statistically significant changes in arterial blood gases values in both groups. Total anesthesia and surgical times were significantly shorter in thoracoscopic lobectomy group compared with open surgery group. Increases in plasma SOD and CAT levels, and decreases in GPx levels were observed in both groups after surgery. Significant difference in GPx levels was found when the groups were compared. The GPx level was significantly lower in the thoracoscopic lobectomy group compared with the open surgery group.
Pregnancy is a physiological state accompained by a high energy demand of many bodily functions and an increased oxygen requirement. Because of the increased intake and utilization of oxygen, increased levels of oxidative stress would be expected. So we observed the activities of the hepatic antioxidant enzymes from rat treated with total saponin from the red ginseng against free raicals produced in pregnant rats. The activity of superoxide dismutase (SOD) in the control group was slightly decreased during pregnancy, and SOD activity in total saponin treated group was not observed any siginificant change compared with the control group. The activities of glutathione peroxidase (GPX), glutathione reductase (GRD) and catalase in the control group have shown the decreasing tendency during pregnancy, whereas the activities of GRD and catalase in total saponin treated group showed significant increased tendency compared with the control group. GPX activity in total saponin treated group was slightly decreased tendnency compared with the control group. The activity of glutathione-S-transferase (GST) in the control group was increased to keep the state of homaeostasis tendency in pregnant rats. On the other hand, the activity of GST after total saponin treatment was increased than control group. Activity of all enzymes in the control group and total saponin treated group recovered the normal level after delivery of rats. In spite of the physiological changes in vivo, the inflaunce of total saponin on activaties of hepatic antioxidant enzyme in pregnant rats seems to be regulated the biological homeostatic adaptation mechanism which protects the maternal liver aganist oxygen induced toxicity
Four-d-old broiler chicks were randomly assigned to 3 groups with 9 replicates (8 birds/cage) under high ambient temperature; birds fed a basal diet (CON), a basal diet supplemented with 0.25% of probiotic complex (LPB, 1 × 106 Lactobacillus plantarum, 1 × 106 Bacillus subtilis, and 1 × 106 Saccharomyces cerevisiae) and 0.5% probiotic complex (HPB). Immediately after 28-d feeding trial, 6 birds having average body weight per group were sacrificed for evaluating the effects of probiotics on antioxidant parameters in the serum, intestine, and liver of birds. As results, serum biochemical parameters of nitrogen components including total protein, albumin, urea nitrogen, and glutathione were unaffected by dietary probiotics. In addition, serum superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPX), and glutathione S-transferase (GST) activities, and lipid peroxidation (MDA) were not changed by dietary probiotic supplement in birds. In the intestinal mucosa, SOD activity in the HPB group significantly (P<0.05) increased compared with that in the CON and the LPB groups. Lipid peroxidation in the HPB group significantly (P<0.05) decreased compared with that in the CON group. However, there was no statistical difference in GPX, and GST activities in the intestinal mucosa among treatment groups. In the liver, the activities of SOD, GPX, and GST, and the level of MDA were unaffected by probiotic supplement. In conclusion, 0.5% of probiotics significantly increased SOD activity and decreased lipid peroxidation in the intestinal mucosa, suggesting that probiotic complex could be potential to improve the small intestinal antioxidant capacity of bird under high ambient temperature conditions.
The purpose of this study was to examine the effect of taurine supplementation time on the activity of the enzymes metabolizing lipid peroxide in the liver of streptozotocin(STZ)-induced diabetic rats, Sprague-Dawley male rats were fed the purified diet for 7 weeks. They were supplemented with or without 1% taurine in drinking water before or after STZ injection or during all experimental procedure. In comparison to diabetic group without taurine, glucose-6-phosphatase(G6Pase) activity was decreased in diabetic group supplemented with taurine before STZ injection, and it was increased in diabetic group supplemented with taurine after STZ injection, but the difference was not significant. Glutathione S-transferase(GST) activity was significantly increased by the injection of STZ. However, the GST activities of diabetic groups exposed to taurine after STZ injection or during all experimental procedure were significantly decreased. Glutathione peroxidase(GPx) activities was significantly decreased by STZ injection. However, only in diabetic group supplemented with taurine before STZ injection, GPx activities was not decreased by the STZ injection. These results suggest that taurine supplementation may change the activities of GSH-related enzymes metabolizing lipid peroxide in the liver of streptozotocin(STZ)-induced diabetic rats and that may be helpful for the prevention of diabetic complication.
Background: To assess the antioxidant effects of gamma-oryzanol on human prostate cancer cells. Materials and Methods: Cytotoxic activity of gamma-oryzanol on human DU145 and PC3 prostate cancer cells was determined by proliferation assay using 3-(4, 5-dimethylthiazol, 2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reagent. mRNA levels of genes involved in the intracellular antioxidant system, superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPX) and glutathione reductase (GSR) were determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Cancer cell lysates were used to measure lipid peroxidation using thiobarbituric acid reactive substance (TBARS). Glutathione contents of the cell lysates were estimated by the reaction between sulfhydryl group of 5, 5'-dithio (bis) nitrobenzoic acid (DTNB) to produce a yellow-color of 5-thio-2-nitrobenzoic acid using colorimetric assay. Catalase activity was also analysed by examining peroxidative function. Protein concentration was estimated by Bradford's assay. Results: All concentrations of gamma-oryzanol, 0.1-2.0mg/ml, significantly inhibited cell growth in a dose- and time-dependent fashion in both prostate cancer cell lines, DU145 and PC3. Gene expression of catalase in DU145 and PC3 exposed to gamma-orizanol at 0.5mg/ml for 14 days was down regulated, while mRNA of GPX was also down regulated in PC3. The MDA and glutathione levels including catalase activity in the cell lysates of DU145 and PC3 treated with gamma-oryzanol 0.1 and 0.5mg/ml were generally decreased. Conclusions: This study highlighted effects of gamma-oryzanol via the down-regulation of antioxidant genes, catalase and GPX, not cytotoxic roles. This might be interesting for adjuvant chemotherapy to make prostate cancer cells more sensitive to free radicals. It might be useful for the reduction of cytotoxic agents and cancer chemoprevention.
Skin is constantly exposed to air, solar radiation, ozone and other air pollutants formulating free radicals. The reactive oxygen species(ROS), formed under these conditions, are associated with skin cancers, cutaneous photoaging, and cutaneous inflammatory disorders. In this study, we sought to establish an animal model for UVB-induced skin alteration using BALB/c mice. The level of UVB irradiation used in this model was within physiological dose. BALB/c mice were exposed to a single dose of UVB ($200mJ/cm^2$ and were sacrificed at 3, 6, 24, and 48 hours following the irradiation. The effect of a single exposure to UVB irradiation on skin catalase(CAT), superoxide dismutase(SOD), and glutathione peroxidase(GPx) activities were examined. Significant decrease in the activity of all enzymes were observed at 6 hours after irradiation(p<.05). The activity of CAT decreased more sharply than those of SOD and GPx, and then remained depressed until 48 hours after UVB irradiation, whereas the activity of GPx recovered to basal level at 48 h after UVB irradiation. Our results indicate that BALB/c mouse could be an adequate animal model of UVB irradiation experiment. These results will also provide fundamental knowledge for the effective nursing strategies in reducing UV-induced skin disorders.
The water fraction exhibiting anticancer activity was prepared from 70% methanol extract of Artemisis argyi by stepwise solvent partioning. This water fraction(5 $\mu$g/ml concentration) showed a considerable cytotoxicity against leukemic L1210 cells with a maximal value of 92% for 3 days culture. Contrastingly to such substantial anticancer activities the identical fraction showed far low toxicity against normal lymphocytes than chloroform fraction of Artemisia argyi mitomycine and 5-fluorouracil at every concentration ranging 0.01$\mu$g/ml~10.00$\mu$g/ml. The cytotoxicity displayed against L1210 cells by the water fraction of Artemisia was found to be proportinal to the decrease of viability of L1210 cells. On the other hand, $O_2$ion generation in L1210 cells appeared to be elevated in accordance to cytotoxicity by the water fraction with concurrent increases of superoxide dismuatse (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) which are responsible for the conversion of $O_2$ ion and $H_2O$$_2$ respectively These findings taken together indicate that the death of L1210 cells by the water fraction of Auemisia atgyi, may be induced at least in part by the detrimental action of reactive oxygen species (ROS) including $O_2$- in spite of substantial extorts of SOD and GPx to overcome the attack of ROS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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