류마티스관절염(rheumatoid arthritis)과 골관절염(osteoarthritis) 같은 관절질환은 연골세포(chondrocytes) 감소와 관절연골(articular cartilage)의 분해를 수반한다. 최근, 연골세포의 활성과 연골 항상성(cartilage homeostasis)에 염증성 ROS (reactive oxygen species) burst 및 나이와 관련된 산화적 스트레스(oxidative stress)의 증가와 관련된 연구가 활발히 진행되고 있다. 본 연구는 관절연골로부터 분리한 연골세포의 노화 과정과 나이대별 관절연골에서 항산화 인자들(antioxidants)의 변화를 조사함으로써, 연골세포와 관절연골의 노화 과정 동안 산화적 스트레스로부터 조직을 보호하는 항산화 인자들의 역할을 규명하는데 목적이 있다. 쥐의 관절연골로부터 분리한 연골세포의 연속 계대배양을 통한 노화 과정에서 산화적 스트레스가 증가함을 관찰하였다. 그리고, 노화 유도한 연골세포는 세포내 총 glutathione (GSSG/GSH) 양과 항산화 효소 superoxide dismutase (SOD)와 heme oxygenase-1 (HO-1)의 발현이 증가하였다. 다음으로, 나이대별 쥐로부터 분리한 관절연골에서 항산화 인자의 발현을 분석하였다. 항산화 인자 glutathione의 양은 40주령에서 발현이 가장 높게 관찰되었으며 72주령에 다소 감소하였고, SOD와 HO-1의 발현은 나이대별로 현저히 증가되는 경향을 보였다. 이를 종합해 볼 때, 세포내 항산화 인자들은 과도한 양의 ROS에 반응하여 연골세포의 노화와 나이와 관련된 관절연골의 퇴화 과정에서 중요한 역할을 하는 것으로 보인다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Glutathione S-transferase (GST) forms a multigene family of phase II detoxification enzymes which are involved in the detoxification of xenobiotics by conjugating substances with glutathione. The aim of this study is to assess the antioxidative status and the degree of DNA damage in the subclinical hypertensive patients in Korea using glutathione S-transferase polymorphisms. SUBJECTS/METHODS: We examined whether DNA damage and antioxidative status show a difference between GSTM1 or GSTT1 genotype in 227 newly diagnosed, untreated (systolic blood pressure $(BP){\geq}130mmHg$ or diastolic $BP{\geq}85mmHg$) subclinical hypertensive patients and 130 normotensive subjects (systolic BP < 120 mmHg and diastolic BP < 80 mmHg). From the blood of the subjects, the degree of the DNA damage in lymphocyte, the activities of erythrocyte superoxide dismutase, the catalase, and the glutathione peroxidase, the level of glutathione, plasma total radical-trapping antioxidant potential (TRAP), anti-oxidative vitamins, as well as plasma lipid profiles and conjugated diene (CD) were analyzed. RESULTS: Of the 227 subjects studied, 68.3% were GSTM1 null genotype and 66.5% were GSTT1 null genotype. GSTM1 null genotype had an increased risk of hypertension (OR: 2.104, CI: 1.38-3.35), but no significant association in GSTT1 null genotype (OR 0.982, CI: 0.62-1.55). No difference in erythrocyte activities of superoxide dismutase, catalase, or glutathione peroxidase, and plasma TRAP, CD, lipid profiles, and GSH levels were observed between GSTM1 or GSTT1 genotype. Plasma levels of ${\alpha}-tocopherol$ increased significantly in GSTT1 wild genotype (P < 0.05); however, plasma level of ${\beta}-carotene$ increased significantly in GSTT1 null genotype (P < 0.01). DNA damage assessed by the Comet assay was significantly higher in GSTM1 null genotype than wild genotype (P < 0.05). CONCLUSIONS: These results confirm the association between GSTM1 null genotype and risk of hypertension as they suggest that GSTM1 null genotype leads to an increased oxidative stress compared with wild genotype.
간 질환 개선용 영양보충제로 시판되고 있는 글루타티온 고함유 Saccharomyces cerevisiae FF-8 효모 균체(FF-8) 급여가 사염화탄소 및 알코올-유발 흰쥐 조직 스트레스에 대하여 억제효과가 있다는 것을보고한 바 있다. 본 실험에서는 글루타티온 고함유 효모 FF-8 급여에 의한 오르트산-유발 지방간에서 각 조직 중 과산화지질 농도와 간 조직 내 미네랄 성분과의 관계를 검토하였다. 체중 증가량은 정상군은 두 실험군에 비해 증가하였으나, 오르트산 급여 실험군들에서는 체중 증가량이 5% 수준에서 유의적으로 감소하였다. 각 조직 중량은 오르트산 급여군에서 간 조직에서 5% 수준에서 유의적으로 증가하였고 FF-8 투여에 의해 다소 감소하는 것으로 나타났다. 한편, 신장 및 비장에서도 오르트산 급여에 의해 5% 수준에서 유의적으로 감소하였다. 간 조직 중의 과산화지질 농도는 오르트산 급여군에서 5% 수준에서 유의적으로 증가하였고, FF-8 균체 급여군에서 감소하였다. 이때 간 조직 중의 글루타티온 농도도 유사한 경향을 보였다. 천연 항산화 미네랄로 알려진 간 조직 중의 아연 농도는 정상군에 비해 오르트산 유발 지방간에서 감소하였고, FF-8 균체 급여에 의해 다소 증가되는 것으로 나타났다. 이상의 실험 결과에서 오르트산-유발 지방간에서 지질과산화 농도의 증가는 간 조직내 천연 항산화 물질인 글로타티온과 아연 농도의 현저한 감소에 기인하였고, 항산화 물질인 글루타티온을 고함유한 S. cerevisiae FF-8 효모 균체 동시 급여에 의해서는 글로타티온과 아연 농도의 증가에 의해 과산화지질 농도가 경감됨으로서 오르트산 유발 산화스트레스를 경감시키는 효과가 있는 것으로 확인되었다.
The purpose of this study was to investigate the effects of vitamin E supplementation on the activities of antioxidative enzymes in liver of KK mice of various ages and various duration of diabetes. Diabetes was induced by feeding high fat diet containing 20% corn oil(wt/wt). Weaned KK mice were fed high fat diet containing 51 IU or 2080 IU vitamin E per kg diet. Animals were sacrificed at 4, 6, and 9 months of age. In nondiabetic group, we found the decrease of antionxidative enzyme activities with aging. In diabetic group, antioxidative enzyme activities were decreased, and the change of hepatic vitamin E was related to glutathione peroxidase activity (r=0.71, p<0.001). Treatment with vitamin E did not modify the level of fasting blood glucose. However, it was observered that glutathione reductase and glutathione peroxidase activities as well as hepatic glutathione levels were increased by vitamie E supplementation, whereas catalase activity did not changed. The present result suggest that high vitamin E supplementation protects against lipid peroxidative damage in diabetic KK mice.
Several bichemical parameters related to free radicals were estimated in senile-prone (P) and resistant(R) strains of male senescence-accelerated mice(SAM) at 2, 5 and 11 months of age. The superoxide generation was increased with age in SAM-R/1 and SAM-P/2. Compared to SAM-R/1, more generation of superoxide was significantly noted in the SAM-P/2 liver. The activities of Cu/Zn-superoxide dismutase and catalase were decreased during aging and these activities in SAM-P/2 were significantly lower than in SAM-R/l liver. The activities of glutathione S-transferase were varied with aging, whereas SAM-P/2 showed lower levels compared to SAM-R/l. The gradual decreases of glutathione, protein bound-SH and nonprotein bound-SH contents were noted with increasing age. SAM-P/2 liver contained lesser amounts of glutathione and nonprotein bound-SH compared to SAM-R. In conclusion, superoxide generation was increased whereas the antioxidant enzyme activities were decreased during aging in SAM-R/1. In addition, SAM-P/2 strain showed more superoxide generation and less antioxidant enzyme activities than SAM-R/1 in the liver, thus we assume that these factors might accelerate the senescence of SAM-P/2 strain.
Many defined cell culture media were formulated over 3() years ago and may be deficient in certain micronutrients whose essentiality has only subsequently been recognised. The objective of this study was to evaluate whether alpha-minimal essential medium (MEM) supplemented with 10% foetal bovine serum contained sufficient selenium for optimal activity of the selenium containing enzymes cytosolic glutathione peroxidase (cGPx) and phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPx) in cultured Chinese hamster ovary (CHO) cells. Additionally, the effect of zinc deficiency and metallothionein (MT) overexpression on cGPx and PHGPx activity was studied. The addition of 100 nM of selenous acid to the culture medium increased cGPx expression by 10-fold and PHGPx by about 2-fold in both wild-type CHO-K1 cells and CHO-K1 cells overexpressing mouse MT-1. Zinc deficiency had no significant effect on enzyme activity, but cells overexpressing mouse MT-1 had higher levels of cGPx activity. Zinc deficiency decreased cell survival but overexpression of MT-1 was partially protective, probably because its presence in quantity favoured the uptake, sequestration and cellular retention of any remaining zinc. This study demonstrates that selenium in complete alpha-MEM is insufficient for optimal cGPx and PHGPx activity and may compromise the cellular response to oxidative stress.
This study was performed to investigate the effect of acorn supplementation on the lipid profile and redox antioxidant enzyme activities in obese rat. Obesity in the rats was induced by feeding diet contained 10% lard and 0.5% cholesterol for 4 week. After 4 weeks, rats were divided into the following 5 groups; high fat diet (Control), high fat diet plus 10% Acorn powder (APlO%), high fat diet plus 20% Acorn powder (AP20%), high fat diet plus 0.2% Acorn extract (AE0.2%), high fat diet plus 0.5% Acorn extract (AE0.5%). Total food intake and food efficiency ratio (FER) was not significantly different by acorn powder and extract supplementation. But, body weight was decreased by 20% acorn powder. Acorn powder and extract supplementation for 4 weeks tend to decrease total cholesterol and triglyceride level on the serum and hepatic tissue. There was no significant difference in hepatic glutathione (GSH) content among all the groups. The hepatic GST activity in acorn supplemented groups was lower than that of control. Glutathione peroxidase and catalase activities were higher in acorn supplemented groups than that of control. Hepatic TBARS levels of experimental groups were also significantly lower than that of control group. Our finding suggest that acorn powders and extract might have potential role for improving lipid profiles and antioxidant enzyme activities in obese rats.
Oxidative stress occurs in patients undergoing coronary artery bypass operation. The aim of this study was to investigate the difference in oxidative stress in off-pump versus on-pump coronary artery bypass surgery. In the present study, in serial blood samples, plasma malondialdehyde (MDA) as index of lipid peroxidation, red blood cells glutathione peroxidase (GPx) and superoxide dismutase (SOD) were measured to compare the extent of oxidative stress in 30 patients undergoing OPCAB (off-pump coronary artery bypass grafting), 12 patients undergoing CABG (on-pump coronary artery bypass grafting) and 18 healthy controls. In CABG group, MDA levels increased significantly from $2.87{\pm}0.62\;nmol/mL$ before anesthesia and $2.87{\pm}0.65\;nmol/mL$ after anesthesia to $3.05{\pm}0.66\;nmol/mL$ after ischemia (p < 0.05). Similarly, SOD levels also elevated significantly from $661.58{\pm}78.70\;U/g$ Hb before anesthesia and $659.42{\pm}81.21\;U/g$ Hb anesthesia induction to $678.08{\pm}75.80\;U/g$ Hb after ischemia (p < 0.01, p < 0.01, respectively). In OPCAB group, only SOD levels increased from $581.73{\pm}86.24\;U/g$ Hb anesthesia induction to $590.90{\pm}88.90\;U/g$ Hb after reperfusion (p < 0.05). Glutathione peroxidase levels were not changed according to blood collection times in both of CABG group or OPCAB group (p > 0.05). Our results show that only mild signs of oxidative stress is found after reperfusion in OPCAB operation compared with CABG operation. Further studies are needed in order to confirm this hypothesis.
The present study was aimed to determine the effects of green tea extract (GTE) and beta-mercaptoethanol (${\beta}-ME$) supplementation in boar sperm freezing extender on in vitro fertilization (IVF) and reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH) levels of presumptive zygotes (PZs). Experimental groups were allocated into lactose egg yolk (LEY) without antioxidant (control), GTE (1,000 mg/l in LEY) and ${\beta}-ME$ ($50{\mu}M$ in LEY). In freezing, spermatozoa extended with LEY were cooled to $5^{\circ}C$ for 3 h and then kept at $5^{\circ}C$ for 30 min following dilution with LEY containing 9% glycerol and 1.5% Equex STM. The final sperm concentration was $1{\times}10^8/ml$. Spermatozoa were loaded into straws and frozen in nitrogen vapor for 20 min. For IVF, oocytes were matured in NCSU-23 medium and co-cultured with spermatozoa following thawing at $37^{\circ}C$ for 25 sec. At 12 h following IVF, IVF parameters (sperm penetration and monospermy) were evaluated. In addition, GSH and ROS levels of PZs were determined by Cell Tracker Blue CMF2HC and DCHFDA, respectively. IVF parameters did not show any significant difference among the experimental groups. GSH and ROS levels of PZs were not significantly different between groups. In conclusion, antioxidant supplementation in boar sperm freezing could not influence IVF parameters, ROS and GSH levels of PZs.
Claudia Carolina Perez-Castro;Alexandre Kormanovski;Gustavo Guevara-Balcazar;Maria del Carmen Castillo-Hernandez;Jose Ruben Garcia-Sanchez;Ivonne Maria Olivares-Corichi;Pedro Lopez-Sanchez;Ivan Rubio-Gayosso
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제27권1호
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pp.9-20
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2023
The mechanism is unclear for the reported protective effect of hyperbaric oxygen preconditioning against oxidative stress in tissues, and the distinct effects of hyperbaric oxygen applied after stress. The trained mice were divided into three groups: the control, hyperbaric oxygenation preconditioning, and hyperbaric oxygenation applied after mild (fasting) or hard (prolonged exercise) stress. After preconditioning, we observed a decrease in basal levels of nitric oxide, tetrahydrobiopterin, and catalase despite the drastic increase in inducible and endothelial nitric oxide synthases. Moreover, the basal levels of glutathione, related enzymes, and nitrosative stress only increased in the preconditioning group. The control and preconditioning groups showed a similar mild stress response of the endothelial and neuronal nitric oxide synthases. At the same time, the activity of all nitric oxide synthase, glutathione (GSH) in muscle, declined in the experimental groups but increased in control during hard stress. The results suggested that hyperbaric oxygen preconditioning provoked uncoupling of nitric oxide synthases and the elevated levels of GSH in muscle during this study, while hyperbaric oxygen applied after stress showed a lower level of GSH but higher recovery post-exercise levels in the majority of antioxidant enzymes. We discuss the possible mechanisms of the redox response and the role of the nitric oxide in this process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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