Yoon Young Cho;Jeong Hill Park;Jung Hee Lee;Sungkwon Chung
Biomolecules & Therapeutics
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제32권3호
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pp.301-308
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2024
Alzheimer's disease (AD) is a progressive and irreversible neurodegenerative disorder characterized by extracellular amyloid plaques composed of amyloid β-peptide (Aβ). Studies have indicated that Ca2+ dysregulation is involved in AD pathology. It is reported that decreased capacitative Ca2+ entry (CCE), a refilling mechanism of intracellular Ca2+, resulting in increased Aβ production. In contrast, constitutive activation of CCE could decrease Aβ production. Panax ginseng Meyer is known to enhance memory and cognitive functions in healthy human subjects. We have previously reported that some ginsenosides decrease Aβ levels in cultured primary neurons and AD mouse model brains. However, mechanisms involved in the Aβ-lowering effect of ginsenosides remain unclear. In this study, we investigated the relationship between CCE and Aβ production by examining the effects of various ginsenosides on CCE levels. Aβ-lowering ginsenosides such as Rk1, Rg5, and Rg3 potentiated CCE. In contrast, ginsenosides without Aβ-lowering effects (Re and Rb2) failed to potentiate CCE. The potentiating effect of ginsenosides on CCE was inhibited by the presence of 2-aminoethoxydiphenyl borate (2APB), an inhibitor of CCE. 2APB alone increased Aβ42 production. Furthermore, the presence of 2APB prevented the effects of ginsenosides on Aβ42 production. Our results indicate that ginsenosides decrease Aβ production via potentiating CCE levels, confirming a close relationship between CCE levels and Aβ production. Since CCE levels are closely related to Aβ production, modulating CCE could be a novel target for AD therapeutics.
This study was carried out to investigate the some physicochemical properties of Korean red ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) water extract (RGWE) after heated with high temperatures above $100^{\circ}C$ for 2 hours. RGWEs were heated at 100, 110 and $120^{\circ}C$ for 2 hours by using autoclave. After RGWEs were heated at high temperature for 2 hours without not adjustment of pH, the changes of saponin, free sugars, mineral and color in the RGWEs were investigated. Total ginsenoside content in control was 1.99%, while those of RGWE were 1.65, 1.49 and 1.29% when treated at 100, 110 and $120^{\circ}C$, respectively. The contents of total ginsenoside showed decreased tendency as heating temperatures were increased. The ginsenoside-$Rh_{2}$ and $-Rg_{3}$, which have been reported as very stable red ginseng ginsenosides, showed relatively strong spots on TLC when RGWEs were heated at 110 and $120^{\circ}C$. In case of free sugars in RGWEs, fructose, glucose and maltose showed high contents when compared with control, while Fe, Ca and Mg ions showed very low contents. Value of L in RGWE treated with high temperature was almost the same with control, while values of a and b were increased. Values of a were increased from -0.86 of control to +0.04, +0.05 and +1.14 when treated with 100, 110 and $120^{\circ}C$, respectively. Values of b also were increased from 27.68 of control to 33.61, 33.61 and 37.42 when treated with 100, 110 and $120^{\circ}C$, respectively. Values of total color in RGWEs treated with high temperatures, E, were finally increased by values of a and b.
Red Ginseng extracts sol'n was sterilized at 85f for 20 mins and/or stored at 4$0^{\circ}C$ for 6 months and centrifuged for 20 mins at 8,500xg in order to investigate the changes in chemical components of supernatants and the properties of precipitates. Contents of crude saponin and ginsenoside-$Rb_1$, -$Rg_1$, -Re were partially decreased during heating and storage. Starch contents were decreased from 26.81% in red ginseng extracts to 17.50-8.81% in supernatants, whereas free sugar contents were increased from 15.50% to 20.29~21.35% by heating and storage. The contents of protein and minerals in supernatants were decreased, but acidic polysaccharides and polyphenol compounds were not changed. pH values of supernatants and precipitates were decreased. The absorbances of brown color precursor and brown pigment in precipitates, detected at 285 nm and 440 nm were remarkably increased. The Overa11 data suggest that precipitates in red ginseng extracts sol'n formed during steilization and storage are provably the brown pigments resulting from Maillard reaction of amino compounds with reducing sugar which could be released from starch and protein matrix and $Cu^+$, $Ca^{2+}$ and $Fe^{3+}$ ions are implicated with the reaction incorporated.
Ginsenosides of 20(S)-protopanaxadiol and 20(S)-protopanaxatriol classification including the aglycones, PD, PI and ginsenosides Rh2, Rhl were shown to posses characteristic effects on proliferation of THP-l human leukaemia cells. A similar result was not apparent for ginsenoside Rg3 or dexamathasone. The concentration to inhibit $50\%$ of cells $(LC_{50})$ for PD, Rh2, PI and Rhl were 13 ${\mu}g/mL,\;15{\mu}g/mL,\;19{\mu}g/mL\;and\;210\;{\mu}g/mL$ respectively. Cell cycle analysis showed apoptosis with PD and PI treatment of THP-1 cells resulting in a build up of sub-G1 cells after 24, 48 and 72 hours of treatment. Rh2, and dexamathasone treatments also increased apoptotic cells after 24 hours, where as Rhl did not. After 48 and 72 hours Rh2, Rhl and dexamathasone similarly increased apoptosis, but these effects were significantly (P<0.05) lower than observed for both PD and PI treatments. Furthermore, treatments that produced the largest build up of apoptotic cells were also found to have the largest release of lactate dehydrogenase (LDH). It can be concluded from these studies that the presence of sugars to PD and PI aglycone structure reduces the potency to induce apoptosis, and alternately alter membrane integrity. These cytotoxic effects to THP-l cells were different from dexamethasone.
사포닌 함량과 PD계 사포닌과 PT계 사포닌의 조성 비율이 상이한 사포닌 분획물 TS-1, TS-2, TS-3 즉 주종 ginsenoside의 총함량$(G-Rb_1,\;-Rb_2,\;-Rc,\;-Rd,\;G-Re,\;-Rf,\;-Rg_1)$은 각각 $41\%,40\%,62\%$이고, PD계 사포닌과 PT계 사포닌의 함유 조성비율(PD/PT)이 각각 1.55, 2.25, 2.61인 시료를 6년근 홍삼으로부터 추출 제조하여, 생체외 실험으로 음경해면체 절편에 대한 이완반응과 생체내 실험으로 사포닌분획물 투여에 따른 음경 해면체내압의 변화에 미치는 효과를 조사하였다. PHE에 의해 수축된 음경해면체 절편에 대한 이완 반응은 홍삼 사포닌은 각각 농도 의존적 이완작용을 보였으며, 음경 해면체평활근의 이완작용에 있어 각 분획물의 $ED_{50}$은 TS-1이 1.68, TS-2, 1.97, TS-3, 2.29 mg/ml서 TS-1이 가장 의의있게 낮았다. 이러한 홍삼 사포닌 분획물의 이완효과 기전은 음경 해면체평활근에 NO나 칼슘 및 칼륨 통로 등에 영향을 미쳐 복합적인 이완작용을 보이는 것으로 사료되었다. 흰쥐를 이용한 생체내 실험으로 홍삼 사포닌 투여에 따른 음경해면체내압의 변화 조사에서 각 사포닌 분획물은 농도의존적으로 해면체내압의 증가를 야기시켰다. 이들 해면체내압의 증가 정도는 TS-1이 가장 강하였고,TS-2,TS-3 순이었다. 이상의 결과로부터 홍삼의 사포닌 분획물은 음경해면체평활근의 이완작용과 내압의 증가에 영향을 미쳐 음경발기의 상승을 야기시키는 효과가 있으며 그 효과는 그 함유 조성에 따라 차별성이 있다는 것이 확인되었으므로 금후 주요 활성성분의 구명이 요망되고 있다.
대장균군은 유통형, 맞춤형 및 건강기능형 홍삼음료 모두에서 음성이었다. 일반세균은 유통형 홍삼음료 및 건강기능형 홍삼음료에서는 검출되지 않았으나, 맞춤형 홍삼음료에서는 58건 중 13건(22.4%)이 검출되었다. 총 100건의 제품 중 5건의 제품에서 안식향산이 검출되었다. 함량은 19.2-543.0 mg/kg이며 이 중 유통형 홍삼음료에서 검출된 1건의 제품(19.2 mg/kg)과 건강기능형 홍삼음료 1건(31.4 mg/kg)의 함량은 원료에서 유래된 것으로 판단되었다. 유통형 홍삼음료의 납 평균 함량은 62.3 ${\mu}g/kg$, 맞춤형 홍삼음료는 74.6 ${\mu}g/kg$, 건강기능형 홍삼음료는 28.8 ${\mu}g/kg$으로 나타났다. 카드뮴의 평균 함량은 유통형 1.15 ${\mu}g/kg$, 맞춤형 1.62 ${\mu}g/kg$, 건강기능형 홍삼음료는 4.18 ${\mu}g/kg$으로 조사되었다. 수은의 평균 함량은 0.10-0.18 ${\mu}g/kg$으로 조사되었다. 홍삼 건강기능식품의 지표성분인 Rg1과 Rb1함량은 유통형 및 맞춤형 홍삼음료가 0.1-23.4 mg/90 mL으로 함유되어 있었다. 하루에 3회 섭취한다고 가정하고 건강기능식품의 일일 섭취량 3-80 mg/day와 비교해보면, 이번에 조사된 37건의 유통형 홍삼음료 중에서 22건(59%), 맞춤형 홍삼음료 58건에서는 26건(45%)이 건강기능식품에 해당하는 지표성분(Rg1과 Rb1)을 함유하고 있는 것을 알 수 있었다. 그러나 홍삼음료들 간에 서로 홍삼성분의 함량차이가 크고 건강기능식품 섭취기준(3-80 mg/day) 양에 미치지 못한 47건 중 1회 분량 90 mL 기준 홍삼성분이 0.2 mg 이하로 함유되어 있는 제품도 20 건이나 되는 것으로 나타났다.
본 연구에서는 7년근과 13년근 산양삼을 선정하여 적변 유무에 따라 분류하고 적변에 따른 산양삼의 생육특성과 진세노사이드 함량을 조사하기 위해 수행되었다. 산양삼 재배지 9개소의 산양삼 지하부의 생육특성을 분석한 결과, 7년근과 13년근 산양삼의 생육특성은 적변에 따른 유의적인 차이는 확인되지 않았다. 적변에 따른 연근별 산양삼의 진세노사이드 함량을 비교 분석한 결과, 7년근 산양삼은 Rb1과 Rg1은 진세노사이드 함량이 일반삼에 비해 적변삼에서 높았고, 진세노사이드 Rc, Rd, Re, Rg2는 적변삼에 비해 일반삼에서 유의적으로 높은 것을 확인하였으나 적변에 따른 13년근 산양삼의 진세노사이드 함량 유의적인 차이는 확인할 수 없었다. 산양삼 생육특성과 진세노사이드 함량 간의 상관관계를 분석한 결과, 일반삼의 경우 진세노사이드 Rb2, Rc, Rd, Rf, Rg1이 산양삼의 지하부 길이와 유의적인 정의 상관관계를 보였고, 적변삼은 진세노사이드 Rd가 지하부 길이와는 유의적인 정의 상관관계, 주근직경과는 유의적인 부의 상관관계를 보였다. 본 연구에서는 7년근과 13년근 모두 적변에 따른 생육특성의 차이는 확인되지 않았고, 진세노사이드 함량은 7년근에서는 적변에 따라 유의적인 차이를 보였지만 13년근에서는 유의적인 차이가 없는 것을 확인하였다. 임가에서 산양삼은 7년근에 비해 13년근이 보다 고가에 거래되는 만큼 본 연구의 결과를 통해 적변삼에 대한 소비자들의 인식을 개선하여 산양삼 재배 농가의 소득 증대에 도움을 주고, 향후 산양삼의 품질규격을 정립하는 데 있어 유용한 정보를 제공할 수 있을 것으로 사료된다.
추출 시간을 5시간으로, 추출 온도를 33-5$0^{\circ}C$로 설정한 진공역적방식 조건과 8$0^{\circ}C$의 고온의 다중단 추출방식 간의 조사포닌 함량비교 결과, 고온의 다중단 추출방법으로 제조한 흥삼엑스의 조사포닌 함량이 8.1-8.2%인데 비하여, 저온 및 단시간 추출인 진공역적 추출방법은 조사포닌 함량이 5.4-5.9%로 조사포닌 함량은 낮은 반면에 사포닌 Rg$_1$ 및 Re의 분해가 거의 없는 것으로 나타났다. 또한 진공역적 추출방법이 다중단 추출방식보다 수율에서도 15-20% 높은 경향을 나타내었다. 진공역적추출 엑스의 색상은 기존 다중단 추출 방식으로 추출된 엑스와 유사하였고, 유동성은 보다 향상된 것으로 나타났다.
백미삼(지근), 홍미삼(지근), 홍삼절편Ⅰ(주근: 수삼-증삼-건조-습점-절편-건조) 및 홍삼절편II(주근: 수삼-절편-증삼-건조)을 puffing gun으로 팽화시켜 그 전후의 성분특성을 조사하였다. 팽화 후 기화로 인해 수분함량은 감소하였으나 다른 일반 성분에서는 큰 차이를 보이지 않았다. 총당의 경우 팽화 후 모든 시료에서 감소 경향을 보였으나 환원당의 경우 백미삼을 제외한 홍삼류 시료에서 증가 경향을 보였다. 모든 시료에서 조사포닌 함량이 증가하였으며 홍삼류 시료들은 일부 ginsenoside에서 2배 이상의 증가량을 보였다. 또한 팽화 후 산성 다당체가 증가하였을 뿐만아니라 총 페놀성 화합물과 전자공여능의 경우 비슷한 경향으로 증가하여 팽화에 의해 항산화 활성이 전반적으로 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 한편 팽화 후 아미노산 함량 및 지방산 함량이 감소하였으나 백미삼의 경우 불포화지방산에서는 큰 변화를 보이지 않았다. 무기질 함량은 팽화 전후로 큰 변화를 보이지 않았다. 결론적으로 모든 시료에서 일반 성분, 무기질 등의 함량변화 없이 약리활성을 가지는 조사포닌, 총 페놀성 화합물, 산성 다당체 등의 성분들이 팽화 가공으로 인해 증가하는 결과를 확인할 수 있었다. 따라서 고부가가치의 인삼 기능성 식품개발을 위하여 팽화가공법의 적용이 가능할 것으로 기대된다.
인삼(人蔘)의 유효성분(有效成分)으로 알려진 saponin을 Thin layer chromatography로 전개(展開)하여 Digital Densitometer를 사용(使用)하여 한국인삼(韓國人蔘)의 산지별(産地別), 부위별(部位別), 재배연도별(栽培年度別) saponin함량(含量) 및 그 saponin fraction의 조성비(組成比)를 정량(定量)하고, 홍삼(紅蔘) 및 인삼(人蔘)엑기스 제조중(製造中) 일어나는 saponin함량(含量)의 변화(變化)를 연구(硏究)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 산지별(産地別) saponin 함량(含量)에는 별로 차이(差異)가 없었으며, panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin군(群)과 panaxatriol을 aglycone으로 하는 sapon군(群)의 조성비(組成比)는 ($1.7{\sim}2.6$) : 1정도였다. 2. 부위별(部位別)로 볼 때, saponin함량(含量)은 미삼(尾蔘)이 12.7%로서 3.3%인 백삼(白蔘)의 4배에 가까운 높은 값을보였다. 그리고 saponin fraction별(別)로 볼 때, panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin fraction도 미삼(尾蔘)이 백삼(白蔘)보다 많으나, panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction은 반대(反對)로 미삼(尾蓼)이 백삼(白蔘)보다 적었다. TLC의 2차원전개결과(次元展開結果), ginsenoside-Rd는 백삼(白蔘)에만 나타나고, 미삼(尾蔘)에서는 나타나지 않는 반면(反面), Rf와 $Rg_1$은 미삼(尾蔘)에서는 분리(分離)되었으나, 백삼(白蔘)에서는 $Rg_1$만이 존재하고, Rf는 분리(分離)되지 않았다 3. 재배연도별(栽培年度別) 근부(根部)의 saponin함량(含量)은 재배기간(栽培其間)에 따라 일정(一定)한 경향(傾向)을 찾아볼 수 없으나, 인삼근당평균(人蔘根當平均) saponin함량(含量)은 2년근(年根)이 90.3mg, 3년근(年根)이 254.2mg. 4년근(年根)이 404.2mg, 5년근(年根)이 996.9mg, 6년근(年根)이 1377.1mg으로 재배기간(栽培其間)이 길어질수록 현저(顯著)하게 높았다. 그리고 인삼지상부(人蔘地上部)의 saponin함량(含量)도 재배기간(栽培其間)에 길어질수록 높아지는 경향(傾向)을 볼 수 있었다. 그러나, saponin fraction별(別)볼 때는 $5{\sim}6$년(年)의 수확기(收穫期)에 가까워질수록 panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 함량(含量)이 높았다. 4. 홍삼제조중(紅蔘製造中)의 saponin fraction별(別) panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 조성비(組成比)도 건삼(乾蔘)에 비(比)하여 홍삼(紅蔘)이 낮아졌으나, panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 조성비(組成比)는 건삼(乾蔘)에 비(比)하여 홍삼(紅蔘)이 오히려 높았다. 홍삼(紅蔘)의 Thin layer chromatogram에는 건삼(乾蔘)의 그것에 나타나지 않았던 수개(數個)의 미확인(未確認) spot를 더 볼 수 있었다. 5. Ethanol과 물로 미삼(尾蔘)을 추출(抽出)하여, 29.9%의 인삼(人蔘)엑기스를 얻었는데, 이 엑기스에는 미삼(尾蔘)으로부터 추출수율(抽出收率)이 94.2%에 상당(相當)하는 saponin이 이행(移行) 함유(含有)되어 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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