홍삼추출물(RGE)의 쓴 맛을 개선하기 위해서 ${\alpha}-,\;{\beta}-,\;{\gamma}$-CD을 이용해서 RGE의 포접화합물을 제조하여, 관능평가를 통해서 RGE-${\gamma}$-CD에 의한 쓴 맛 개선효과가 가장 큰 것을 확인하였다. RGE와 ${\gamma}$-CD의 비율에 따라서 쓴 맛은 선형적으로 감소하지만, RGE 고유의 향 조차도 감소하기 때문에, RGE 대비 10%의 ${\gamma}$-CD를 첨가하여 포접화합물을 형성할 때 쓴 맛은 RGE 대비 78% 정도 감소하였고, 홍삼의 향은 62% 정도를 유지함으로써 기호도면에서 우수한 결과를 얻었다. SD계 흰쥐에 RGE, RGE-${\gamma}$-CD10의 제제를 총 사포닌의 투여량이 제제간에 동일하도록 투여한 후, 혈장 중 RGE에 들어있는 주요한 성분으로 알려져 있는 ginsenoside Rg1, Rb1을 지표물질로 설정하여 전 농도를 측정하여 두 제제간의 AUC를 비교한 결과, Rg1의 경우, RGE 제제 투여 후의 평균값이 $13.11{\mu}g{\cdot}hr/mL$, RGE-${\gamma}$-CD10 투여 후의 평균값은 $12.04{\mu}g{\cdot}hr/mL$로 유의적인 차이는 없었다. 한편, Rb1의 경우, RGE 제제로서 투여하였을 때의 AUC 평균값이 $25.84{\mu}g{\cdot}hr/mL$, RGE-${\gamma}$-CD10 투여 후의 평균값은 $81.48{\mu}g{\cdot}hr/mL$로 3배 이상 높아짐을 알 수 있었다. 본 연구에 의해 ${\gamma}$-CD로 RGE를 포접했을 경우 쓴 맛이 감소하고, ginsenoside Rb1의 생체이용율이 증가하여 RGE를 그대로 섭취할 경우보다 포접화합물로 섭취 시에 더 유용함을 확인하였다.
Wang Wei;Zhao Zhen-Jiang;Xu Yufang;Qian Xu hong;Zhong Jian-Jiang
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제10권2호
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pp.162-165
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2005
A series of fluorine and hydroxyl containing jasmonate derivatives, which were chemically synthesized in our institute, were investigated for their effects on the biosynthesis and heterogeneity of ginsenosides in suspension cultures of Panax notoginseng cells. Com-pared to the control (without addition of elicitors), $100{\mu}M$ of each of the jasmonate was added on day 4 to the suspension cultures of P. notoginseng cells. It was observed that, jasmonates greatly enhanced the ginsenoside content and the ratio of Rb group to Rg group (i.e. $(Rb_1\;+\;Rd)/(Rg_1\;+\;Re)$ in the P. notoginseng cells. Some of the synthetic jasmonates, such as pentafluoropropyl jasmonate (PFPJA), 2-hydroxyethyl jasmonate (HEJA) and 2-hydroxye-thoxyethyl jasmonate (HEEJA), could promote the ginsenoside content to $2.55\;\pm\;0.11,\;3.65\;\pm\;0.13\;and\;2.94\;\pm\;0.06$mg/100 mg DW, respectively, compared to that of $0.64\;\pm\;0.06$mg/100 mg DW for the control and $2.17\;\pm\;0.04$ mg/100 mg DW by the commercially available methyl jasmonate (MJA); and they could change the respective Rb:Rg ratio to $1.60\;\pm\;0.04,\;1.87\;\pm\;0.01\;and\;1.56\;\pm\;0.05$, compared to that of $0.47\;\pm\;0.01$ for the control and $1.42\;\pm\;0.06$ by MJA. The results suggest that suitable esterification of MJA with fluorine or hydroxyl group could in-crease the elicitation activity to induce plant secondary metabolism. The information obtained from this study is useful for hyper-production of heterogeneous products by plant cell cultures.
Kim, Il-Woung;Sun, Won Suk;Yun, Bong-Sik;Kim, Na-Ri;Min, Dongsun;Kim, Si-Kwan
Journal of Ginseng Research
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제37권1호
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pp.124-134
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2013
The authentication of the physico-chemical properties of ginsenosides reference materials as well as qualitative and quantitative batch analytical data based on validated analytical procedures is a prerequisite for certifying good manufacturing practice (GMP). Ginsenoside Rb1 and Rg1, representing protopanaxadiol and protopanaxatriol ginsenosides, respectively, are accepted as marker substances in quality control standards worldwide. However, the current analytical methods for these two compounds recommended by Korean, Chinese, European, and Japanese pharmacopoeia do not apply to red ginseng preparations, particularly the extract, because of the relatively low content of the two agents in red ginseng compared to white ginseng. In manufacturing fresh ginseng into red ginseng products, ginseng roots are exposed to a high temperature for many hours, and the naturally occurring ginsenoside Rb1 and Rg1 are converted to artifact ginsenosides such as Rg3, Rg5, Rh1, and Rh2 during the heating process. The analysis of ginsenosides in commercially available ginseng products in Korea led us to propose the inclusion of the (20S)- and (20R)-ginsenoside Rg3, including ginsenoside Rb1 and Rg1, as additional reference materials for ginseng preparations. (20S)- and (20R)-ginsenoside Rg3 were isolated by Diaion HP-20 adsorption chromatography, silica gel flash chromatography, recrystallization, and preparative HPLC. HPLC fractions corresponding to those two ginsenosides were recrystallized in appropriate solvents for the analysis of physico-chemical properties. Documentation of those isolated ginsenosides was achieved according to the method proposed by Gaedcke and Steinhoff. The ginsenosides were subjected to analyses of their general characteristics, identification, purity, content quantification, and mass balance tests. The isolated ginsenosides showed 100% purity when determined by the three HPLC systems. Also, the water content was found to be 0.534% for (20S)-Rg3 and 0.920% for (20R)-Rg3, meaning that the net mass balances for (20S)-Rg3 and (20R)-Rg3 were 99.466% and 99.080%, respectively. From these results, we could assess and propose a full spectrum of physico-chemical properties of (20S)- and (20R)-ginsenoside Rg3 as standard reference materials for GMP-based quality control.
인삼 사포닌을 역상 고속 액체크로마토그래피 방법을 이용하여 여러 종류의 컬럼으로 분석하였다. 최적 조건은 Novapak $C_{18}$ ODS 역상 칼럼($3.9mm{\times}150mm$, $5{\mu}m$), $CH_3CN/H_2O$ 이성분 이동상 용액과 기울기 제어장치, 그리고 1.5 mL/min의 용매 흐름속도였으며, UV 검출기(203 nm)를 사용하였다. 인삼의 주성분인 ginsenoside $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Rd, Re, Rf 그리고 $Rg_1$ 7종을 50분 안에 양호하게 분리하였다. 각 성분에 대한 검량선은 직선성이 좋았으며, 회귀계수는 0.98~0.99이었다.
In this study, ginseng flower water extracts were analyzed to set up the ginsenoside content and quality optimization condition. The highest total ginsenoside content among the ginseng flower water extracts was 67.44mg/g which was extracted at $85^{\circ}C$ for 3 hours. In addition, the ginsenoside content decreased according to the increased extraction temperature and time. The highest total content of $Rb_2$ and Re was 37.42mg/g at $75^{\circ}C$ for 6 hours. Total content of $Rb_2$ and Re decreased according to the increased extraction temperature and time. The highest prosapogenin ($Rg_2$ + $Rg_3$ + $Rh_1$) content among the total of ginseng flower water extracts was 18.58mg/g which was extracted at $95^{\circ}C$ for 12 hours. The sweetness, absorbance were increased according to the increased extraction temperature and time. But pH was decreased according to the increased extraction time.
The effective component Ginsenoside in Ginseng has been widely used to cure some hypochondriasis and be as supplementary medicines. There are many chemical analysis methods to measure the contents of Ginsenoside in Ginseng; however, all these methods have some shortcomings such as long time, environmental pollution and damaging the samples. In this paper, it is possible to use near infrared spectroscopy to measure the content of Ginsenoside in Ginseng without destruction. As the results, Rg1, Rb1, Re and T-Saponin of Ginsenoside can be measured with the accuracy of R(0.81) SEP (1.704 mg/g), R(0.74) SEP (1.211 mg/g), R (0.78) SEP (1.049 mg/g) and R(0.84), SEP(4.537 mg/g).
The ginsenoside Rh2 has strong anti-cancer, anti-inflammatory, and anti-diabetic effects. However, the application of ginsenoside Rh2 is restricted because of the small amounts found in Korean white and red ginsengs. To enhance the production of ginsenoside Rh2-MIX (comprising 20(S)-Rh2, 20(R)-Rh2, Rk2, and Rh3 as a 10-g unit) with high specificity, yield, and purity, a new combination of enzymatic conversion using the commercial enzyme Viscozyme L followed by acid treatment was developed. Viscozyme L treatment at pH 5.0 and $50^{\circ}C$ was used initially to transform the major ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, and Rd into ginsenoside F2, followed by acid-heat treatment using citric acid 2% (w/v) at pH 2.0 and $121^{\circ}C$ for 15 min. Scale-up production in a 10-L jar fermenter, using 60 g of the protopanaxadiol-type ginsenoside mixture from ginseng roots, produced 24 g of ginsenoside Rh2-MIX. Using 2 g of Rh2-MIX, 131 mg of 20(S)-Rh2, 58 mg of 20(R)-Rh2, 47 mg of Rk2, and 26 mg of Rh3 were obtained at over 98% chromatographic purity. Then, the anti-cancer effect of the four purified ginsenosides was investigated on B16F10, MDA-MB-231, and HuH-7 cell lines. As a result, these four rare ginsenosides markedly inhibited the growth of the cancer cell lines. These results suggested that rare ginsenoside Rh2-MIX could be exploited to prepare an anti-cancer supplement in the functional food and pharmaceutical industries.
본 연구에서는 인삼잎이 인삼뿌리보다 사포닌 함량이 높은 부위로서 식품 소재로 이용가치가 있을 것으로 생각되어 인삼잎을 이용하여 차 제품을 개발하기 위한 방안으로 인삼잎을 발효시켜 진세노사이드 조성 및 형태별 페놀산 조성의 변화를 분석하고 인삼잎을 침출시켜 침출액에 대한 전자공여능과 tyrosinase 저해활성을 측정하였다. 인삼잎에서 진세노사이드는 10종이 검출되었고 주된 진세노사이드는 ginsenoside-Rg1(26.0 mg/g), -Re(47.3 mg/g) 및 -Rd(23.9mg/g)이었고 발효에 의하여 ginsenoside-Rh2, -Rh1, -Rg2 및 -Rg3는 증가하였으며 특히 Rg3는 15배가 증가하였다. 인삼잎의 총 폴리페놀성 함량은 350.4 mg%이었고 발효인삼잎은 312.5 mg%으로 발효에 의해서는 약간 감소하였다. 인삼잎의 페놀산은 결합형은 검출되지 않았고, 유리형과 에스테르형이 각각 8 및 6종이 검출되었으며 그중에서 ferulic acid가 각각 12.6 및 50.7 mg%로 가장 많은 함량을 차지하고 있었다. 발효인삼잎에서는 ferulic acid는 상당량이 감소하였으나 protocatechuic acid, p-hydroxybenzoic acid, vanillic acid의 3종의 페놀산이 유리형, 에스테르형 및 결합형 모두에서 상당량 증가하여 총 함량이 각각 28배, 5배 및 7.8배 증가하였다. 인삼잎을 침출시킨 액을 이용하여 전자공여능과 tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 전자공여능은 발효에 의하여 활성이 증가하지는 않았으나, tyrosinase 저해활성은 증가하여 $500\;{\mu}L/mL$ 농도로 첨가 시 46.5%를 나타내어 무발효인삼잎에 비하여 2배 이상 증가하여 시판녹차와 비슷한 결과를 보여주었다.
This investigation was carried out to study the influence of pH and heat treatment on the ginsenosides in the white ginseng extract. Changes in ginsenosides (Rb1, Rb2, ,Rc, Rd) and free sugar were measured by the peak area variation of HPLC chromatogram during 25 hours heat treatment at the various level of pH. It was found that :(1) The peak areas of Rb1. Rb2, Rc and Rd on the HPLC chromatogram were decreased remarkably below pH 4.0 and more decrease was found as the temperature and heating time increased. (2) Those of glucose and arabinose were increased remarkably. It is considrered that the increase of glucose and the formation of arabinose result from the hydrolysis of ginsenoside( Rb1, Rb2, Rc, Rd) linked with sugars.
인삼의 주종 사포닌인 7종 사포닌($Rb_1,\;Rb_2,\;Rc,\;Rd,\;Re,\;Rf\;and\;Rg_1$)을 고속액체크로마토그라피로 분석하는 일반적인 방법인 순상 column에서 $Rg_1$, Re 및 Rf가 명확히 분리되지 않는 문제점을 개선하기위하여 본 연구를 수행하였다. 고속액체크로마토그라피를 이웅하여 역상 ${\mu}{\beta}ondapak$ ODS컬럼으로 인삼중 주종 사포닌인 7종 ginsenosides $Rg_{1},\;Re,\;Rf,\;Rb_{1},\;RC,\;Rb_{2}$ 및 Rd를 양호하게 분리하였다. 이때 분석 조건으로 이동상 용매 조성은 (A) $H_{2}O$, (B) methyl cyanaide을 (A) 90/(B) 10에서 (A) 0/(B) 100으로 기울기 용리를 이용하였으며, 기울기 용리 제어장치를 사용하여 용리시켰다. 용매 흐름속도는 1.5ml/min, 검출기는 UV detector(203nm)이었다. 이 방법은 분리능과 재현성 및 회수율이 양호하므로, 앞으로 인삼중 ginsenosides 분석에 응용될 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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