Giemsa C-banded mitotic chromosome prepatations from White Leghorn, New Hampshire and Rhode Island Red inbred lines were compared for frequency of C-band regions on individual chromosomes. Except for autosomes 3, 6, 8 and 9 and W sex chromosomes, C-banding was extremely variable in other macrochromosomes. No divergence for C-band difference between homologous chromosomes of these lines was detected. Approximately 75% of the mitotic metaphase microchromosomes have recognizable C-band regions with the current technique.
Giemsa C-banding analysis with Korean rye strain revealed that individual chromosomes had characteristic banding patterns making it possible to distinguish the seven rye chromosomes one from another. It seems to be evident that B-chromosomes in rye contain proportionally more heterochromatin than autosomes.
C-banded karyotypes in A. anisopodium, A. sacculiferum, A. deltoide-fistulosum and A. splendens were investigated. The chromosome compositions were diploid of 2n=16 in A anisopodium and A. splendens, and teiraploid of 2n=32 in a. sacculiferum and A. deltoide-fistulosum. The bands were distributed in telomeric parts of the chromosomes dominantly in addition to interstitial regions sporadically, resulting in the specific C-banded karyo types according to the species. No centromeric band was observed in these species except only one chromosome in A. deltoidefistulosum. The interspecific relationship based on the C-band distribution will be discussed.
On the basis of karyotypic analysis performed by conventional staining and Giemas C-banding technique, cytological relationship was inferred for 21 lines of Paeonia lactiflora Pal. cultivated in Korea. It was very difficult to infer their organized karyotypic classification system using the composition of somatic chromosomes involving sat-chromosomes, relative length of chromosomes, arm ratio and karyotypic formulae by conventional staining. From the distribution and number of Giemsa C-bands on the chromosomes b and c, 21 lines can be subclassified into 5 groups. It seems that the karyotypic polymorphism is observed in 21 lines of cultivated P. lactiflora because peony mainly propagates by outbreeding.
경북지방(慶北地方)의 소나무와 곰솔에 대한 Giemsa C-분염(分染)에 의한 유전변이(遺傳變異)를 조사(調査)한 바 다음과 같다. 1. Giemsa C-분염(分染)에 의한 핵형분석(核型分析)에서 소나무와 곰솔의 체세포(體細胞) 염색체수(染色體數)는 2n=24이고 2. 소나무는 arm ratio가 비슷한 M형(型)으로 개체간(個體間)에는 큰 차이가 없었으나 이차협착(二次狹窄)의 수(數)와 위치(位置)가 개체간(個體間)에 다소(多少) 차이(差異)가 있었으며 3. 곰솔은 염색체(染色體) 길이와 arm ratio가 M형(型)으로 소나무와 비슷하고 이차협착(二次狹窄)의 수(數)와 위치가 비슷하여 개체간(個體間)의 변이(變異)는 거의 없었다. 4. 염색체(染色體) C-분염(分染)에 의한 유전변이(遺傳變異)에서 소나무와 곰솔은 12쌍(雙)의 염색체(染色體)에 동원체(動原體) 부분(部分)과 이차협착(二次狹窄) 부위(部位)에 band가 나타났고 5. 소나무는 3번, 4번, 7번 염색체(染色體)에서는 개체(個體)에 관계(關係)없이 모두 이차협착(二次狹窄)에 band가 나타나고 1번, 2번, 5번 염색체(染色體)의 이차협착(二次狹窄)의 band는 개체간(個體間)에 변이(變異)가 있었다. 8번, 9번, 10번, 11번 염색체(染色體)에서는 telomere에 band가 나타나고 개체간(個體間)에 변이(變異)가 있었으며 6. 곰솔은 2번, 3번, 5번, 7번 8번 염색체(染色體)의 이차협착(二次狹窄)에 band가 모두 나타나고 개체간(個體間)에 변이(變異)가 없었으며 telomere에는 band가 나타나지 않았다. 7. C-분염(分染)에 의한 변이(變異)는 소나무에서는 개체간(個體間)에 변이(變異)가 있으나 곰솔에서는 변이(變異)가 없었고 소나무는 4번 염색체(染色體)에서, 곰솔은 8번 염색체(染色體)에서 이차협착(二次狹窄)에 band가 나타나고 있다. 이러한 것이 소나무와 곰솔의 C-분염(分染)에 의한 차이점(差異點)이라고 생각된다.
The karyotype of Lilium cernum has been analysed by means of C-banding technique. Most of clones observed were 2n=24 chromosomes which consist of two pairs of submetacentric and ten pairs of subtelocentric chromosomes, among which two pairs of chromosomes(B and E) showed secondary constriction in the short arm. In addition to these chromosomes a small supernumerary telocentric chromosome was seen in the eight clones. Sixtyeight bands were observed in the twentytwo chromosomes of complement and one band in the supernumerary chromosome. A pair of chromosome (L) did not show any band. The bnads on the chromosome. A pair of chromosome (L) did not show any band. The bands on the chromosomes were distributed in the centromere, secondary constriction and intercalary regions of arms. Of the twelve pairs of chromosomes ten pairs showed symmetric banding patterns in each, but two pairs (I and K) showed asymmetric banding patterns.
한국산 Dendmcopos major hondoensis와 D. leucotos Ieucotos의 핵형을 일반염색과 C-banding방법으로 분석하였다. 두 종의 염색체 수는2n=90-92이고, 완의 수는 AN= 92-96으로 동일하게 나타났으며 C-banding 결과 일부 염색체의 장완과 몇 쌍의 단부염색체는 말단에 구조적인 질염색 band가 있었다.
본 연구에서는 가금에 있어 세포유전학적 방법을 이용하여 닭 염색체의 분리방법과 G, C-banding에 의한 분염분석 방법을 재고하여 보다 명확한 염색체의 형태적 양상을 제시하였다. 염색체의 분리는 성장중인 초기배아를 이용하므로써 유사분열 중기상을 쉽게 포악할 수 있었으며, 성장 4-5일째의 배아조직으로부터 염색체의 분리는 다소 불편함이 많았다. 가금에 있어 염색체 분리기술중 가장 중요한 것으로 적합한 sample의 채취와 적절한 중기상의 유도, hypotonic 처리에 따른 뚜렷한 형태의 유도, 도말방법 및 염색의 처리과정이다. 또한 보다 명확한 염색체의 분석을 위하여서는 중기 분열상중 초기 중기 상태의 상을 포착함이 바람직하다. G. C-banding 처리를 위해서는 공히 충분하고도 완전히 건조된 air-dried prepration된 sample을 이용하여야 바람직한 결과를 얻을 수 있으며, slide의 보존시간에 따라 band 양상에 많은 차이를 나타낸다. G-banding 양상에 크게 영향하는 요인으로서는 trypsin의 농도, 처리시간, 처리온도가 주된 작용을 하고, Giemsa solution에 사용하는 buffer의 pH도 크게 작용하는 것으로 나타났다. C-banding에 있어서는 Ba(OJ)$_2$의 농도 처리시간, 처리온도가 큰 영향을 미친 바 다소 짧은 시간의 처리가 바람직한 양상을 보이고, 처리전 HCl 처리로서 세포들의 균일성을 가하고, 처리후 철저한 수세가 좋은 결과를 나타내었다. Band 양상의 보다 정확한 해석을 위해서는 densitometer를 이용하므로써 구체적 양상을 분석할 수 있었다.
As a series of systematic classification for Korean common liver fluke, Fasciola sp., karyotype was investigated by means of the modified air-drying technique and of the regular Giemsa staining. Also, C-staining method was applied for detailed karyological analysis from the germ cells of the fluke. The following is a brief summary of the leading facts gained through the experiment. 1. Korean Pasciola sp. was classified into three types based on their chromosomal complements; individuals with 20 or 30 chromosomes and with a 20/30 mosaic constitution. Worms having 30 chromosomes represent a triploid form with 3 sets of 10 basic chromosomes, while those with 20 chromosomes were diploid and mosaic individuals were 2n/3n mixoploid. 2. The frequency of the individual type calculated is as follows; 67.45% of 212 flukes examined was of diploid, 10.85%, triploid, and the rest, 21.7%, mixoploid, respectively. In many cases, two or three types were found in the peculiar bovine host while single type inhabitant was about 20% out of 52 cases. 3. The twenty chromosomes consisted of 1 pair of large metacentrics, 4 pairs of medium-sized subtelocentrics, and 5 pairs of small submetacentrics, while constitution of the thirty chromosomes was nearly interpreted as a triploid form with 3 sets of 10 basic chromosomes. The high centromeric indexes of both types are the first Pairs among all the examined, and 37.93% was of diploid and 47.93%, triploid, respectively. 4. In mixoploid individuals, constitution of the chromosomes of diploid or triploid cells was the same as that of diploid or triploid individuals. 5. All the chromosomes of the germ cells in both types showed C-band around the centromeric region and especially the chromosomes no's 3,7, and 8 showed a remarkable C-band distinguished from other chromosomes. 6. The variance for the sizes of the worms and the eggs were not parallel with three different genotypes in Korean common liver fluke.
In vitro 소핵시험(vitMNT)은 유전독성의 유망한 대체시험법 중 하나로, OECD에서 TG로 채택되어 화학물질의 등록에 사용되고 있다. 본 시험에서는 CHL cell을 사용한 vitMN test에서 소핵을 판별하기 위한 최적화된 세포질 조건을 찾고자 하였으며, 양성대조물질로 MMC와 Col을 사용하고 세포 염색을 위해 giemza 용액을 사용하였다. 시험결과, 세포현탁을 위해 사용되는 고정액의 acetic acid의 농도는 1%로 하는 것이 band의 두께와 세포질의 퍼짐성 측면에서 적당하였다. 또한 세포의 깨짐을 최소화하는 최종 고정액의 적하시간은 현탁 후 1~4시간이었다. 이러한 결과는 vitMNT에서 소핵관찰의 신속성, 용이성 및 정확성을 확보하는데 도움이 될 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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