Twenty apple germplasm accessions from the Korean Genebank were successfully cryopreserved using two-step freezing to back up genetic resources maintained by field collections. This study examined the morphological and genetic stability of cryopreserved dormant apple buds that were stored in liquid nitrogen, and then rewarmed and regrown. Whole plants were regenerated directly from dormant buds through budding without an intermediary callus phase. The cryopreserved buds produced high levels of shoot formation (76.2-100%), similar to those of noncryopreserved buds (91.3-100%), with no observed differences between cryopreserved and noncryopreserved materials. Three of the twenty cryopreserved apple germplasm accessions were used to assess morphological and genetic stability. No differences in morphological characteristics including shoot length, leaf shape, leaf width/length ratio, and root length were observed between controls (fresh control and noncryopreserved) and cryopreserved plantlets. The genetic stability of regenerants (before and after cryopreservation) was investigated using inter simple sequence repeat (ISSR) markers. The ISSR markers produced 253 bands using four primers, ISSR 810, SSR 835, ISSR 864, and ISSR 899. These markers showed monomorphic banding patterns and revealed no polymorphism between the mother plant and regenerants before and after cryopreservation, suggesting that cryopreservation using two-step freezing does not affect the genetic stability of apple germplasm. These results show that two-step freezing cryopreservation is a practical method for long-term storage of apple germplasms.
Lysine is the first essential amino acid for optimal nutrient quality in rice grain. For the narrow genetic diversities of lysine contents in rice, somaclonal variation was the source of mutation in our breeding program. Biochemical selection was conducted using 1 mM S-(2-aminoethyl) cysteine followed by two passages of 5 mM lysine plus threonine in the callus subculture medium. The lysine contents in endosperm of all progenies recovered from the biochemical selection were higher than those of their donor cultivar 'Hwayeongbyeo'. These elevated lysine levels of mutants were successfully transmitted to $M_4$ generation. The lysine contents in endosperm varied 3.85 to $4.80\%$ compare to their donor cultivar 'Hwayeongbyeo' was $3.85\%$. Three of high-lysine germplasms, Lys-l, Lys-2 and Lys-7 were selected by biochemical selection and rapid screening methods. DNA analysis showed that a new insertion of Tos 17 which mapped to rice chromosome 11 on the high-lysine mutant, Lys-2.
Background: Safflower (Carthamus tinctorius L.) is a useful medicinal and oil crop in Korea. However, when safflower is cultivated, the flowering period overlaps with the rainy season, and seed maturation is poor. Therefore, this study aimed to use basic research data to develop superior varieties using agronomic characteristics and crossing method. Methods and Results: A total of 34 safflower germplasms were sown and their agronomic characteristics were investigated. Based on these investigations, the cultivar 'ui-san-hong-hwa' was selected as the mother plant, and 'Myanmar safflower' (Hsu Pan) was selected as the father plant. In addition, we developed a floret-protecting cap to cover florets after emasculation during the artificial crossing. When florets were protected by the cap, the seed setting rate increased in comparison to that in the non-covered florets. Conclusions: Agronomic characteristics can contribute to developing suitable varieties. The results suggest that the protection cap will be helpful in breeding without the floral organ drying. This study contributes an efficient breeding method to develop new safflower varieties.
Cytoplasmic male sterility (CMS) induced by mutant mitochondria genome, has been used for commercial seed production of $F_1$ hybrid cultivars in diverse crops. In pepper (Capsicum annuum L.), two sterile cytoplasm specific gene organization, atp6-2 and coxII were identified. An open reading frame, orf456 nearby coxII gene has been speculated to induce male sterility (MS) by mutagenic analysis. Moreover, molecular markers for atp6-2 and coxII of mitochondrial genotype (mitotype) were developed. However, the Cytoplasmic MS specific markers, atp6SCAR and coxIISCAR markers appeared in both N and S cytoplasms when polymerase chain reaction (PCR) cycles prolonged more than 40 cycles. Since the reported molecular markers were dominant markers, the presence of the faint sterile-specific band in normal cytoplasm may lead to the mis-classification of pepper breeding lines. To solve this problem, one common forward primer and two different reverse primers specific to normal coxII and sterile orf456 genes were designed after analyzing their gene organizations. By using these three primers, N and S coxII specific bands were co-amplified in male-sterile lines, but only normal coxII specific band was amplified in maintainer lines. Since the reverse primer for sterile coxII was specifically designed 275 bp downstream of orf456, relatively stable PCR amplification patterns were observed regardless of the number of PCR cycles. These primer sets easily identified different mitotypes among the divergent breeding lines, commercial cultivars and diverse germplasms.
심비디움속 유전자원 48품종에 대하여 RAPD와 URP를 이용하여 유전적 유연관계를 분석하였다. RAPD분석에는 10mer에 해당하는 random primer (Operon사) 80개를, URP는 20 mer에 해당하는 12종의 상용 primer를 이용하였다. 48 품종의 심비디움에는 34종의 동양 심비디움, 7종의 동서양란 교잡종, 7종의 서양 심비디움이 포함되어 있다. 선별된 41개의 random primer와 6개의 URP primer로부터 각각 407, 56개의 다형성 밴드를 획득하여 총 463개의 마커를 이용하였다. 이들 마커의 크기 범위는 0.4 kb 에서 1.5 kb 에 해당하였다. 유전적 유사도를 바탕으로 UPGMA clustering 프로그램을 이용하여 dendrogram을 작성하였는데 유전자원 48품종은 유사도 0.638 수준에서 총 4그룹으로 구분되었다.
Polyphenol 화합물이 다량 함유된 식물종의 유연관계 분석이나 형질전환 유전자 확인 등을 위해 PCR을 이용할 경우 다량의 재료로부터 신속 간편하게 분리한 DNA를 이용할 수 있는 조건을 설정 하였다. 폴리페놀 함량이 높은 포도, 사과, 복분자와 같은 과수류에서 간편법에 의해 추출된 DNA를 이용한 PCR 반응액에 2%의 BLOTTO를 첨가함으로서 DNA의 재현적 증폭이 가능하였다. 간편 추출 DNA를 이용한 PCR에서 의 BLOTTO효과는 primer, 품종, 식물종에 관계없이 일반적으로 발현되었다. 상추의 형질전환 유전자 검색을 위한 PCR에서 도 BLOTTO 효과가 확인되었다. 따라서 PCR 반응액에 2% BLOTTO를 첨가하면 간편 법 에 의해 추출된 polyphenol 화합물 고함유 식물종의 DNA를 이용하여서도 PCR에 의한 유전배경 및 특정 유전자의 대량 신속 분석이 가능할 것이다.
Pourkhaloee, Ali;Khosh-Khui, Morteza;Arens, Paul;Salehi, Hassan;Razi, Hooman;Niazi, Ali;Afsharifar, Alireza;Tuyl, Jaap van
Horticulture, Environment, and Biotechnology : HEB
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제59권6호
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pp.875-888
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2018
Tulip (Tulipa L.) is one of the most important ornamental geophytes in the world. Analysis of molecular variability of tulips is of great importance in conservation and parental lines selection in breeding programs. Of the 70 genic microsatellites, 15 highly polymorphic and reproducible markers were used to assess the genetic diversity, structure, and relationships among 280 individuals of 36 wild and cultivated tulip accessions from two countries: Iran and the Netherlands. The mean values of gene diversity and polymorphism information content were 0.69 and 0.66, respectively, which indicated the high discriminatory power of markers. The calculated genetic diversity parameters were found to be the highest in wild T. systola Stapf (Derak region). Bayesian model-based STRU CTU RE analysis detected five gene pools for 36 germplasms which corresponded with morphological observations and traditional classifications. Based on analysis of molecular variance, to conserve wild genetic resources in some geographical locations, sampling should be performed from distant locations to achieve high diversity. The unweighted pair group method with arithmetic mean dendrogram and principal component analysis plot indicated that among wild tulips, T. systola and T. micheliana Hoog exhibited the closest relationships with cultivated tulips. Thus, it can be assumed that wild tulips from Iran and perhaps other Middle East countries played a role in the origin of T. gesneriana, which is likely a tulip species hybrid of unclear origin. In conclusion, due to the high genetic variability of wild tulips, they can be used in tulip breeding programs as a source of useful alleles related to resistance against stresses.
우리나라에서는 특수한 용도로 이용되어온 수집 검정콩 및 기타 유색콩 1,081점에 대한 종실의 주요 품종적 특성을 구명하기 위하여 종실의 화학적 조성과 이와 관련된 몇가지 형질들에 관한 조사한 바 그 결과는 다음과 같다. 국내 수집 검정콩 유전자원 1,081점의 조단백, 조지방, 전당 함량을 분석한 결과 조단백 함량 변이는 34.1 ~ 48.0% (평균 39,8%), 조지방은 14.1~ 23.8 (평균 20.1%)이었으며 전당함량은 8.3~12.1% (평균 10.1%)의 변이를 보였다. 이들 화학성분을 성숙군별로 나누어 비교하면 대체로 조생종일수록 조단백 함량치가 높은 반면 전당은 만생종일수록 함량이 높게 나타났다. 또한 녹색자엽을 가진 수집종이 황색자엽 보다 종실의 당함량이 높고, 소비자의 선호도도 높아 밥및콩 육성시 중요한 형질일 것으로 판단된다. 수원 15005 등 5계통의 평균 지방산 중 불포화 지방산의 함량 비율은 84%였다.
Wheat is the staple food crop in the word, but wheat products have a low bioavailability of iron and zinc. So in the developing world, where wheat is a staple food, it suffers from micronutrients deficiency. This study was conducted to generate wheat varieties with enhanced grain Zn and Fe contents. Sixty wheat resource were cultivated over 2 years (2019-2021) in the field of NICS, Jeonju, Republic of Korea, to identify agronomic traits. Wheat grains were ground using grinder and analyzed whole wheat flour protein contents and Fe and Zn contents using ICP-OES. The average contents of Zn and Fe grain were 4.6 mg/100g (2.4~8.8 mg/100g) and 4.5 mg/100g (2.4~7.9 mg/100g), respectively. The contents of Fe and Zn in the wheat grain had a positive correlation with the protein content of whole wheat flour, but there was no correlation with heading date (4.22~5.27) and the thousand kernel weight (21.3~57.5 g). Although there was year variation, six resources with high contents of Fe (>5.2 mg/100 g) and Zn (>5.3 mg/100 g) grain in 2 years were selected. These results provide information for selecting breeding materials for biofortified wheat, and further studies on germplasms genetic variations and bioavailability are needed.
Wheat (Triticum spp.) is an important source of food worldwide and the focus of considerable efforts to identify new combinations of genetic diversity for crop improvement. In particular, wheat starch composition is a major target for changes that could benefit human health. Starches with increased levels of amylose are of interest because of the correlation between high amylose content and elevated levels of resistant starch, which has been shown to have beneficial effects on health for combating obesity and diabetes. In this study, high amylose wheat germplasms from other countries were collected and cultivated in Korea, and then the content of amylose was evaluated, we examined amylose content in 614 wheat germplasm. Furthermore, amylose content was validated using several milling processes such as roller, hammer, and grinding mill. As a result, the amylose content distribution was divided into five groups. The range of the amylose levels in whole wheat flour was 18.3% to 29.6%. In addition, the mutant lines were screened for high amylose, and two mutant lines (WX-1046 and WX-1074) exhibited a comparable amylose content to Keumkang whole wheat (19.6%). It has been established that high amylose indicated SS IIa null and necessitate GBSS. Based on these findings, it may be helpful to develop high amylose wheat germplasm and production techniques, particularly in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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