To generate expressed sequence tags for genomics research involving genetic linkage analysis, to examine gene expression profiles in muscles of channel catfish in a non-normalized muscle cDNA library, to compare gene expression in young and mature channel catfish muscles using the EST reagents and gene filters to demonstrate the feasibility of functional genomics research in small laboratories. 102 randomly picked cDNA clones were analyzed from the catfish muscle cDNA library. Of the sequences generated, 90.2% of ESTs was identified as known genes by identity comparisons. These 92 clones of known gene products represent transcriptional products of 24 genes. The 10 clones of unknown gene products represent 8 genes. The major transcripts (70.1% of the analyzed ESTs) in the catfish muscle are from many major genes involved in muscle contraction, relaxation, energy metabolism and calcium binding such as alpha actin, creatine kinase, parvalbumin, myosin, troponins, and tropomyosins. Gene expression of the unique ESTs was comparatively studied in the young and adult catfish muscles. Significant differences were observed for aldolase, myostatin, myosin light chain, parvalbumin, and an unknown gene. While myosin light chain and an unknown gene (CM 192) are down-regulated in the mature fish muscle, the aldolase, myostatin, and parvalbumin are significantly up-regulated in the mature fish muscle. Although the physiological significance of the changes in expression levels needs to be further addressed, this research demonstrates the feasibility and power of functional genomics in channel catfish. Channel catfish muscle gene expression profiles provide a valuable molecular muscle physiology blueprint for functional comparative genomics.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.26-28
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2003
"Epigenetics" means the study of heritable changes in gene-activity without changes in DNA sequences. Methylation of the cytosine residue in a CpG dinucleotide sequence is a characteristic of the vertebrate genome. In vertebrates, methylation of DNA mainly occurs at the 5′-position of cytosine in a CpG dinucleotide forming 5-methylcytosine. Methylation of DNA plays a profound role in transcriptional repression of gene expression through several mechanisms. Generally, DNA of inactive genes is more heavily methylated than that of active ones; conversely demethylation of DNA reactivates gene expression in vivo and in vitro.
Proceedings of the Korean Society for Bioinformatics Conference
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2001.10a
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pp.97-115
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2001
cDNA microarray technology allows the monitoring of expression levels for thousands of genes simultaneously. Many statistical analysis tools become widely applicable to the analysis of cDNA microarray data. In this talk, we consider a two-way ANOVA model to differentiate genes that have high variability and ones that do not. Using this model, we detect genes that have different gene expression profiles among experimental groups. The two-way ANOVA model is illustrated using cDNA microarrays of 3,800 genes obtained in an experiment to search for changes in gene expression profiles during neuronal differentiation of cortical stem cells.
Park, Tae-Seong;Lee, Seong-Gon;Choe, Ho-Sik;Lee, Seung-Yeon;Lee, Yong-Seong
Proceedings of the Korean Statistical Society Conference
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2002.05a
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pp.85-90
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2002
Microarray technology allows the monitoring of expression levels for thousands of genes simultaneously. In time-course experiments in which gene expression is monitored over time we are interested in testing gene expression profiles for different experimental groups. We propose a statistical test based on the ANOVA model to identify genes that have different gene expression profiles among experimental groups in time-course experiments. Using this test, we can detect genes that have different gene expression profiles among experimental groups. The proposed model is illustrated using cDNA microarrays of 3,840 genes obtained in an experiment to search for changes in gene expression profiles during neuronal differentiation of cortical stem cells.
Kim, Ja-Eun;Yoo, Chang-Hyuk;Park, Dong-Yoon;Lee, Han-Yong;Yoon, Jeong-Ho;Kim, Se-Nyun
Molecular & Cellular Toxicology
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v.1
no.4
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pp.248-255
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2005
To understand the response of cancer cells to anticancer drugs at the gene expression level, we examined the gene expression changes in response to five anticancer drugs, 5-fluorouracil, cytarabine, cisplatin, paclitaxel, and cytochalasin D in NCI-H460 human lung cancer cells. Of the five drugs, 5-fluorouracil had the most distinctive gene expression signature. By clustering genes whose expression changed significantly, we identified three clusters with unique gene expression patterns. The first cluster reflected the up-regulation of gene expression by cisplatin, and included genes involved in cell death and DNA repair. The second cluster pointed to a general reduction of gene expression by most of the anticancer drugs tested. A number of genes in this cluster are involved in signal transduction that is important for communication between cells and reception of extracellular signals. The last cluster represented reduced gene expression in response to 5-fluorouracil, the genes involved being implicated in DNA metabolism, the cell cycle, and RNA processing. Since the gene expression signature of 5-fluorouracil was unique, we investigated it in more detail. Significance analysis of microarray data (SAM) identified 808 genes whose expression was significantly altered by 5-fluorouracil. Among the up-regulated genes, those affecting apoptosis were the most noteworthy. The down-regulated genes were mainly associated with transcription-and translation-related processes which are known targets of 5-fluorouracil. These results suggest that the gene expression signature of an anticancer drug is closely related to its physiological action and the response of caner cells.
Background: Korean Red Ginseng (KRG) is an effective anti-stress treatment. In this study, we investigated the therapeutic potential effects of KRG on relieving stress in a general population using transcriptome analysis. Methods: We conducted an 8-week clinical pilot study on 90 healthy men who reported stress. The study was completed by 43 participants in the KRG group and 44 participants in the placebo group. Participants were randomized 1:1 to the KRG and placebo groups. We evaluated the stress by stress response inventory (SRI) at baseline and 8 weeks. The main outcomes were changes in the levels of neurotransmitters (NTs) and NT-related gene expression. NTs were analyzed using automated (GC) content, and levels of gene expression were measured by reads per kilobase of transcript per million mapped reads (RPKM). Results: The KRG group showed significantly preserved epinephrine decrease compared with placebo group at 8 weeks (changes in epinephrine, KRG vs. placebo; -1623.2 ± 46101.5 vs. -35116.3 ± 86288.2, p = 0012). Among subjects who higher SRI score, meaning stress increased compared to baseline, the KRG group showed a smaller decrease in serotonin than the placebo group (changes in serotonin, KRG vs. placebo; -2627.5 ± 5859.1 vs, -8087.4 ± 7162.4, p = 0.005) and a smaller increase in cortisol than the placebo group (changes in cortisol, KRG vs. placebo; 1912.7 ± 10097.75 vs. 8046.2 ± 8050.6 , p = 0.019) in subgroup analysis. Transcriptome findings indicated that KRG intake affects gene expression related with metabolism of choline, adrenalin, and monoamine. Conclusion: These findings suggest that KRG has beneficial effects on the amelioration of stress response in NTs, and this effect is more prominent in stressful situations. Further clinical studies are required to confirm the anti-stress effect of KRG.
Infection of human fibroblast (HF) cells with human cytomegalovirus (HCMV) result in changes in the intracellular level of second messengers. Since nitric oxide (NO) production has been known to be related with other second messengers, it is probable that HCMV infection of HF cells may involve NO. To test this possibility, the amount of NO was measured following ogenous addition of NO generators such as sodium nitroprusside (SNP) or S-nitroso-N-a-cetylpenicillamine (SNAP) immediately after HCMV infection, however, inhibited virus multiplication. Furthermore, immunoblot experiment using monoclonal antibody to HCMV major immediate early (MIE) proteins or CAT assay using pCMVIE/CAT (plasmid containing CAT gene driven by HCMV MIE promoter) revealed that SNP or SNAP blocked the MIE gene expression. SNP was more effective than SNAP in hibiting HCMV multiplication or MIE gene expression. SNP produced more NO than SNAP in inhibiting HCMV multiplication or MIE gene expression. SNP produced more NO than SNAP. Although the mechanism for the inhibition of HCMV multiplication and MIE gene expression by NO is still elusive some correlation with NO-mediated inhibition of HCMV-induced increase in cytosolic free Ca$\^$2+/ concentration ([Ca$\^$2+/]) was observed. The increase of [Ca$\^$2+/] following HCMV infection was inhibited by SNP, and less effectively by SNAP. Raising [Ca$\^$2+/ with bromo-A23187 partially reversed the SNP block of MIE gene expression. Thus, there appear to e some relationships among NO. [Ca$\^$2+/], and HCMV MIE gene expression.
The heat shock protein (HSP) genes are expressed at various stages of the Drosophila life cycle even under non-heat-shock conditions. In the present study, developmental changes of HSP23 gene expression and the role of 20-hydroxyecdysone (2OHE) on the HSP23 gene expression were investigated in Drosophila melanogaster. The Northern blot and Western blot analyses showed that HSP23 gene expression occurred at the early third instar larval stage, reached the highest with a sharp peak in the white prepupa, and then decreased throughout the pupal period. When the HSP23 gene expression was compared with the secretion of 20HE, there is a slmiladty between 20HE synthesis and HSP23 gene expression during the third instar larval-prepupal period. It appears that 2OHE regulates expression of HSP23 gene at larva-pupa molting period, and that, 2OHE is also involved in the control the metamorphosis in some part through the HSP23.
Lee, Kyungho;Leesungbok, Richard;Ahn, Su-Jin;Park, Su-Jung;Lee, Suk Won
The Journal of Korean Academy of Prosthodontics
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v.55
no.4
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pp.361-371
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2017
Purpose: We aimed to investigate the gene expression of human gingival fibroblasts on microgroove surface using DNA microarray. Materials and methods: Microgrooves were applied on grade II titanium discs to have 0/$0{\mu}m$ (NE0, control group), 60/$10{\mu}m$ (E60/10, experimental group) of respective width/depth by photolithography. The entire surface of the microgrooved Ti substrata was further acid etched and used as the two experimental groups in this study. Human gingival fibroblasts were cultured in the experimental group and the control group, and total RNA was extracted. The oligonucleotide microarray was performed to confirm the changes of various gene expression levels between experimental group and control group. Changes of gene expression level were determined at the pathway level by mapping the expression results of DNA chips, using the KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes) pathway analysis. Results: Gene expression levels on E60/10 and NE0 were analyzed, there were 123 genes showing significant differences in expression more than 1.5 times on E60/10 microgrooved surface compared to NE0 surface, and 19 genes showing significant differences in expression more than 2 times. The KEGG pathway analysis confirmed the changes in gene expression levels under experimental conditions. Cell signaling, proliferation, and activity among the various gene expression results were identified. Conclusion: Microgrooved surfaces induce gene expression changes and related cell signaling. According to the results of this study, microgrooves can be used as the surface of various biomaterials which need to improve cell activity through gene expression changes and activation of cell signaling.
Nutritional regulation of gene expression associated with growth and feeding behavior in avian species can become an important technique to improve poultry production according to the supply of nutrients in the diet. Insulin-like growth factor-I (IGF-I) found in chickens has been characterized to be a 70 amino acid polypeptide and plays an important role in growth and metabolism. Although it is been well known that IGF-I is highly associated with embryonic development and post-hatching growth, changes in the distribution of IGF-I gene expression throughout early- to late-embryogenesis have not been studied so far. We revealed that the developmental pattern of IGF-I gene expression during embryogenesis differed among various tissues. No bands of IGF-I mRNA were detected in embryonic liver at 7 days of incubation, and thereafter the amount of hepatic IGF-I mRNA was increased from 14 to 20 days of incubation. In eyes, a peak in IGF-I mRNA levels occurred at mid-embryogenesis, but by contrast, IGF-I mRNA was barely detectable in the heart throughout all incubation periods. In the muscle, no significant difference in IGF-I gene expression was observed during different stages of embryogenesis. After hatching, hepatic IGF-I gene expression as well as plasma IGF-I concentration increases rapidly with age, reaches a peak before sexual maturity, and then declines. The IGF-I gene expression is very sensitive to changes in nutritional conditions. Food-restriction and fasting decreased hepatic IGF-I gene expression and refeeding restored IGF-I gene expression to the level of fed chickens. Dietary protein is also a very strong factor in changing hepatic IGF-I gene expression. Refeeding with dietary protein alone successfully restored hepatic IGF-I gene expression of fasted chickens to the level of fed controls. In most circumstances, IGF-I makes a complex with specific high-affinity IGF-binding proteins (IGFBPs). So far, four different IGFBPs have been identified in avian species and the major IGFBP in chicken plasma has been reported to be IGFBP-2. We studied the relationship between nutritional status and IGFBP-2 gene expression in various tissues of young chickens. In the liver of fed chickens, almost no IGFBP-2 mRNA was detected. However, fasting markedly increased hepatic IGFBP-2 gene expression, and the level was reduced after refeeding. In the gizzard of well-fed young chickens, IGFBP-2 gene expression was detected and fasting significantly elevated gizzard IGFBP-2 mRNA levels to about double that of fed controls. After refeeding, gizzard IGFBP-2 gene expression decreased similar to hepatic IGFBP-2 gene expression. In the brain, IGFBP-2 mRNA was observed in fed chickens and had significantly decreased by fasting. In the kidney, IGFBP-2 gene expression was observed but not influenced by fasting and refeeding. Recently, we have demonstrated in vivo that gizzard and hepatic IGFBP-2 gene expression in fasted chickens was rapidly reduced by intravenous administration of insulin, as indicated that in young chickens the reduction in gizzard and hepatic IGFBP-2 gene expression in vivo stimulated by malnutrition may be, in part, regulated by means of the increase in plasma insulin concentration via an insulin-response element. The influence of dietary protein source (isolated soybean protein vs. casein) and the supplementation of essential amino acids on gizzard IGFBP-2 gene expression was examined. In both soybean protein and casein diet groups, the deficiency of essential amino acids stimulated chickens to increase gizzard IGFBP-2 gene expression. Although amino acid supplementation of a soybean protein diet significantly decreased gizzard IGFBP-2 mRNA levels, a similar reduction was not observed in chickens fed a casein diet supplemented with amino acids. This overview of nutritional regulation of IGF-I and IGFBP-2 gene expression in young chickens would serve for the establishment of the supply of nutrients to diets to improve poultry production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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