We described morphological characteristics of embryonic, larval, and juvenile period of the yellow puffer, Takifugu obscurus. We defined seven periods of embryogenesis the zygote, cleavage, blastula, gastrula, segmentation, pharygula, and hatching periods. The eggs were adhesive and spherical in shape. The egg yolk had numerous tiny oil globules. Hatching began about 280 hours after insemination at $17.0{\pm}1.0^{\circ}C$ water temperature. Melanopores of star shape were seen on yolk, head and trunk during the pharygula and hatching period. The hatched larvae haying large yolk were $3.00\~3.54$ mm in size with $25\~26$ myomeres. The larvae completely absorbed the yolk materials and oil globules within 7 days after hatching and became post-larvae. Laval fish became juveniles within 60 days after hatching, and they reached $23.54\~30.12$ mm in total length and had fin-rays.
Inductions of hybrids and reciprocal hybrids between Oryzias dancena and O. javanicus (ODJ and OJD) were conducted and backcross hybrids between female O. dancena and male ODJ were also produced for biological and cytogenetic analysis. Embryonic development of ODJ and OJD were compared with those of their parents. Developmental time was fastest in O. dancena and ODJ, followed by O. javanicus and OJD. Oryzias dancena hatched 11 days (d) after fertilization, ODJ at 13 d, O. javanicus at 14 d and OJD at 15 d. The abnormality of external morphology rate in ODJ was 10.6%; however, OJD showed a high degree of abnormality, over 90%. The proportion of males was 90.0% and 31.3% for ODJ and OJD, respectively. Cytogenetic analysis was conducted to obtain basic information for genetic identification of O. dancena, O. javanicus and their hybrids. The karyotypes of all experimental groups showed 2n=48 chromosomes and the fundamental number (FN) was 48. The first pair carried secondary constrictions near the centromeric regions. Erythrocyte area and volume were $9.8\;{\pm}\;0.5\;{\mu}m^2$ and $18.2\;{\pm}\;1.0\;{\mu}m^3$, respectively, for O. dancena, $8.3\;{\pm}\;0.5\;{\mu}m^2$ and $15.8\;{\pm}\;1.5\;{\mu}m^3$ in O. javanicus, and $18.3\;{\pm}\;0.5\;{\mu}m^2$ and $15.7\;{\pm}\;1.3\;{\mu}m^3$ in ODJ. Erythrocyte area and volume in ODJ were similar to those of O. javanicus. In backcross hybrids between female O. dancena and male ODJ, all embryos failed to develop and died in the late gastrula stage.
For the effort to produce transgenic amphibians, a plasmid DNA sequence (cytoplasmic actin promoter-linked bacterial $\beta$-galactosidase gene) was microinjected into fertilized Xenopus eggs. It appeared that the injection of 20 nl solution containing 1-2 ng of DNA was not toxic, but over 4 ng was toxic to embryonic development. The translational product of $\beta$-gal gene ($\beta$-galactosidase) had enzyme activity in all three germ layers of the embryo. Expression of the injected $\beta$-gal genes was first detected at mid-gastrula stage, and the activity persisted up to stage 43 (feeding tadpole) with decreased level of retention. However, the level of the expression was various among the injected individuals as well as each experiment. That is, $\beta$-galactosidase activities did not appear in all cells, instead a localized distribution pattern. Although other possibilities could not be omitted, this mosaic distribution of gene expression seemed to arise from unequal partition of the injected DNA into each blastomere during early cleavage.
Jung, Hyo Sun;Ko, Min Gyun;Lee, Hyo Bin;Noh, Jae-Koo;Kim, Dong Soo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.51
no.4
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pp.420-425
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2018
We characterized egg development and investigated the effects of temperature on embryonic development time, in the convict cichlid Amatitlania nigrofasciata. Fertilized eggs of this species have an ovoid shape (horizontal axis, $1.56{\pm}0.02mm$; vertical axis, $1.26{\pm}0.04mm$) and smooth translucent chorion surrounded by a layer of mucous secretion. At $27{\pm}0.5^{\circ}C$, the first cleavage, blastula, gastrula and 16-somite stages of A. nigrofasciata eggs began at 1.5, 4.83, 14 and 40 hours after fertilization, respectively. We measured the development rate of embryos at $12-33^{\circ}C$ and found that the time period from fertilization to hatching was 94 hours at $24^{\circ}C$, 64 hours at $27^{\circ}C$ and 50 hours at $30^{\circ}C$. At temperatures of $12-21^{\circ}C$, all fertilized eggs died before hatching and those incubated at $33^{\circ}C$ died immediately after hatching.
Umair, Zobia;Kumar, Vijay;Goutam, Ravi Shankar;Kumar, Shiv;Lee, Unjoo;Kim, Jaebong
Molecules and Cells
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v.44
no.10
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pp.723-735
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2021
Spemann organizer is a center of dorsal mesoderm and itself retains the mesoderm character, but it has a stimulatory role for neighboring ectoderm cells in becoming neuroectoderm in gastrula embryos. Goosecoid (Gsc) overexpression in ventral region promotes secondary axis formation including neural tissues, but the role of gsc in neural specification could be indirect. We examined the neural inhibitory and stimulatory roles of gsc in the same cell and neighboring cells contexts. In the animal cap explant system, Gsc overexpression inhibited expression of neural specific genes including foxd4l1.1, zic3, ncam, and neurod. Genome-wide chromatin immunoprecipitation sequencing (ChIP-seq) and promoter analysis of early neural genes of foxd4l1.1 and zic3 were performed to show that the neural inhibitory mode of gsc was direct. Site-directed mutagenesis and serially deleted construct studies of foxd4l1.1 promoter revealed that Gsc directly binds within the foxd4l1.1 promoter to repress its expression. Conjugation assay of animal cap explants was also performed to demonstrate an indirect neural stimulatory role for gsc. The genes for secretory molecules, Chordin and Noggin, were up-regulated in gsc injected cells with the neural fate only achieved in gsc uninjected neighboring cells. These experiments suggested that gsc regulates neuroectoderm formation negatively when expressed in the same cell and positively in neighboring cells via soluble factors. One is a direct suppressive circuit of neural genes in gsc expressing mesoderm cells and the other is an indirect stimulatory circuit for neurogenesis in neighboring ectoderm cells via secreted BMP antagonizers.
Hwang, In Joon;Lee, Si Woo;Han, Young Sim;Kim, Kyeong Hwan
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.24
no.11
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pp.375-382
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2021
In this study, the reproductive behavior and embryonic and larval development of the short ninespine stickleback Pungitius kaibarae was described and illustrated based on observations during spawning, hatching, and larval rearing trials. Adult P. kaibarae were collected downstream in Jinhae during the reproductive season (April-May). Males had nuptial coloration on their entire black bodies, with blue dorsal spines and yellow eyes, whereas females had a brown spotted pattern on their bodies. Males built nests on the stems of water weeds and attracted females. Fertilization occurred in the nest immediately after spawning, and males guarded the eggs until hatching. The fertilized eggs of P. kaibarae were spherical, demersal, adhesive, and transparent, and each egg measured 1.43 ± 0.07 mm in diameter. The morula, blastula, and gastrula stages, as well as hatching began at 5, 18.5, 21.5, and 96 post fertilization (HPF), respectively, at 20.0 ± 0.5℃. The newly hatched larvae had a total length (TL) of 5.67 ± 0.50 mm, with a yolk volume of 0.583 ± 0.059 mm3. Their mouths and anuses had not yet opened. At 2 days posthatching (days post hatching, DPH), the yolk was completely absorbed and the larvae began to feed exogenously. Pigmentation was observed in freshly hatched larvae 4 h after hatching, with the presence of eight areas with a dotted pattern on the dorsal surface of the larvae and dispersed spots on the head and yolk sac. At 30 DPH, the TL of the juveniles was 21.34 ± 1.70 mm. The nest area and number of eggs were 259.56 ± 101.39 mm2 (75.18-506.04) and 155.33 ± 114.12 (0-437), respectively.
Kim, Young Dae;Lee, Chu;Min, Byung Hwa;Kim, MeeKyung;Kim, Gi Seung;Choi, Jae-Suk;An, Won Gun;Nam, Myung-Mo
The Korean Journal of Malacology
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v.30
no.4
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pp.311-319
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2014
Early sexual maturation through temperature stimulation was induced in female and male of yezo scallop. Gonadosomatic index (GSI) in female showed $9.12{\pm}2.9$ in January, $14.89{\pm}2.9$ in February and $21.3{\pm}1.4$ in March in experiment I. GSI in experiment I showed a significant increase (P < 0.05) and in experiments II and III were not show significant variations (P > 0.05). It also showed significant between the control and the experiments I, II, and III in February (P < 0.05) measurements. Experiment I has showed good results in sexual maturation and spawning when compared with other experiments II and III and the control. Histological observation showed that ovary condition was in a growing stage in all the experiments I, II, and III. In February, ovary condition through histological observation was a late mature stage in all the experiments I, II, and III except the control of a growing stage. GSI and gonad weight were $4.4{\pm}0.88$ and 2.8 g, respectively in November whereas it was $15.1{\pm}2.8$, and 11.7 g, respectively in January and $21.7{\pm}5.4$, and 19.4 g, respectively in February after rearing at a water bath of $12^{\circ}C$ depending on the condition of experiment I. It was possible early releasing of eggs and sperms of yezo scallop in February instead of the middle of April to the end of May being spawning period. Fertilized eggs have become a gastrula stage through a spiral cleavage and then become a trochophore larvae after 36 hours. After 10 days, D-shaped larvae have changed into an umbo stage larvae and attached to juveniles in the post larvae after 20-23 days.
The polysialic acid (polySia) glycotope covalently modifies cell surface glycoconjugates on cells as evolutionarily diverse as microbes and human. The recent chemical identification of polysialylated glycoproteins in the jelly coat and on the cell surface of the sea urchin egg raises important questions about their biosynthesis and possible function. Using CMP-[$^{14}$ C]Neu5Ac as substrate and cell free preparations from eggs and embryos of the sea urchin Stronglylcentrotus nudus, we have identified a membrane associated CMP-Neu5Ac:poly-$\alpha$2, 8 sialosyl sialyltransferase (polyST) that transfers Neu5Ac to an endogenous acceptor. Optimal conditions for the polyST activity were found to be 2$0^{\circ}C$ in 20 mM MOPS buffer (pH 7.0). The polyST activity was increased 2.7 times by the addition of 10 mM $Mg^2$$^{+}$. The membrane-associated polyST also catalyzed the polysialylation of mammalian ganglioside GD3. Given that no structurally similar natural polysialylated gangliosides have been described, nor were observed in the present study, we conclude that a single polyST activity catalyzes sialylation of the endogenous acceptor and the gangliosides. Using an excess of GD3 as an exogenous acceptor, it was established that the expression of the polyST in S. nudus embryos increased rapidly at the mesenchyme blastula stage and reached at maximum at the gastrula stage. The finding that this polyST in the sea urchin embryo is developmentally regulated raises the possibility that it may play a role in the changing cell and tissue interactions that occur during gastrulation and the early stages of spicule formation.n.
Smad proteins mediate transforming growth $factor(TGF)-{\beta}$ signaling and play a pivotal role in embryonic development. The estrogen receptor-related receptors(ERRs), which are structurally similar to estrogen receptors, are members of orphan nuclear receptor in the nuclear receptor superfamily and their functions are known to be involved in the formation of extra-embryonic ectoderm. To investigate the involvement of Smad3 and $ERR{\beta}$ like 1 in reproductive activities and embryogenesis in marine invertebrate, we examined gene expression of Smad3 and $ERR{\beta}$ like 1 in Strongylocentrotus nudus during their seasonal changes and embryonic development using real-time polymerase chain reaction. The Smad3 mRNA levels in gonad showed an increasing pattern from February to June 2004 but decreased at August(spawning season) followed by an elevation of the levels at October and December 2004. The mRNA levels of the $ERR{\beta}$ like 1 significantly elevated during the spawning season. During embryonic development, Smad3 mRNA levels at $8{\sim}16$ cell stages were significantly higher than those of other stages, whereas the mRNA of the $ERR{\beta}$ like 1 was significantly high levels at late development stages, i.e., blastular, gastrula and plutei stages. These results suggest that the Smad3 could be involved at least in part in the early cleavage stages and the $ERR{\beta}$ like 1 may play an important role in the spawning season and late developmental stage in the sea urchin.
Water temperature, salinity and density on egg development of the sunray surf clam, Mactra chinensis were investigated for artificial seedling production. The required time from fertilization to D-shaped larvae were 33.8 hours in $18^{\circ}C$, 20.6 hours in $23^{\circ}C$, 18.2 hours in $28^{\circ}C$ and 15.0 hours in $33^{\circ}C$. The development duration was reduced with increasing temperature. The relationships between temperature and the required time from egg to each developmental stage were described as follows: 2-cell, 1/h = 0.1051WT - 1.4782; 8-cell, 1/h = 0.037WT - 0.3686; gastrula, 1/h = 0.008WT - 0.0521; trochophore, 1/h = 0.0041WT - 0.0235; D-shaped larva, 1/h = 0.0024WT - 0.0102. Biological minimum temperature for the egg development was estimated to be $8.0^{\circ}C$ in average. The possible range of temperature for the development of D-shaped larvae was $18-28^{\circ}C$ and optimum of water temperature for the development of egg was $23^{\circ}C$. The possible range of salinity for the development of D-shaped larvae was 20-35 psu and optimum of salinity for the development of egg was 30-35 psu over 25 psu at least. The density of fertilized egg was below 40 per 1 ml in rearing seawater for elevating the development rate from fertilized egg to D-shaped larva.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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