Sets of sialic acid-containing trisaccharides having different internal and terminal linkages have been synthesized to develop a sensitive method for analysis of the reducing terminal linkage positions. The trisaccharides, sialyl($\alpha$ 2-3)Gal($\beta$ 1-3)GalNAc and sialyl($\alpha$ 2-3)Gal($\beta$ 1-X)GlcNAc where X=3, 4 and 6, were synthesized and examined using electrospray ionization (ESI)-collision induced dissociation (CID) tandem mass spectrometry (MS/MS). The compounds chosen for this study are related to terminal groups likely to be found on polylactosamine-like glycoproteins and glycolipids which occur on the surface of mammalian cells. The purpose of this study is to develop tandem mass spectrometral methods to determine detailed carbohydrate structures on permethylated or partially methylated oligosaccharides for future applications on biologically active glycoconjugates and to exploit a faster method of synthesizing a series of structural isomeric oligosaccharides to be used for further mass spectrometry and instrumental analysis.
Natural killer T (NKT) cell is a special type of T lymphocytes that has both receptor of natural killer (NK) cell (NK1.1, CD161c) and T cell (TCR) and express a conserved or invariant T cell receptor called $V{\alpha}14J{\alpha}18$ in mice or Va24 in humans. Invariant NKT (iNKT) cell recognizes lipid antigen presented by CD1d molecules. Marine-sponge-derived glycolipid, ${\alpha}-galactosylceremide$ (${\alpha}-GalCer$), binds CD1d at the cell surface of antigen-presenting cells and is presented to iNKT cells. Within hours, iNKT cells become activated and start to secrete Interleukin-4 and $interferon-{\gamma}$. NKT cell prevents autoimmune diseases, such as type 1 diabetes, experimental allergic encephalomyelitis, systemic lupus erythematous, inflammatory colitis, and Graves' thyroiditis, by activation with ${\alpha}-GalCer$. In addition, NKT cell is associated with infectious diseases by mycobacteria, leshmania, and virus. Moreover NKT cell is associated with asthma, especially CD4+ iNKT cells. In this review, I will discuss the characteristics of NKT cell and the association with inflammatory diseases, especially asthma.
The conformation of synthetic oligosaccharide can be elucidated by employing molecular modeling and highfield proton NMR (nuclear magnetic resonance) spectroscopy. Information with respect to the composition and configuration of saccharide residues and the sequence and linkage positions of the oligosaccharide can be obtained by employing a variety of one- and two-dimensional NMR techniques and molecular modeling. These techniques are also useful in establishing the solution conformation of the oligosaccharide moiety. This study is focused on the elucidation of linkage positions of synthetic trisaccharides, Gal(β1-4)Glc(β1-3)Glc, Gal(β1-4)Glc(β1-4)Glc and Gal(β1-4)Glc(β1-6)Glc.
Objectives : To investigate the hepatoprotective effect of Gardeniae Fructus (Ga) and Glycine semen preparatum (Gl) aqueous extract against D-galactosamine (D-GalN, 300mg/kg body weight) was administered to the male Sprague Dawley (SD) rats. Materials and Methods : The study was carried out on male SD rats (age matched, weight $250{\pm}10$ g). Experimental groups (Exp) divided four : Normal group (Nor) was administered saline, Control (Con) group was only received D-GalN (300 mg/kg) intraperitoneally. Exp was orally administered Ga (200 mg/kg; Ga group), Gl (700 mg/kg; Gl group), and Chizadochi-Tang (200 mg/kg+700 mg/kg, GG group) after D-GalN treatment during 14 days (n=6). Results : D-GalN administration induced hepatotoxicity in rats which was manifested by increased levels of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP) and lactate dehydrogenase (LDH) but decreased total cholesterol (HDL C) and triglyceride (TG). The serum TG concentrations were significantly increased ($^{\sharp}p$ <0.05) in the Ga group compared with Con. AST and ALP activities were significantly decreased ($^{\sharp}p$ <0.05) in the all experimental groups compared with Con. ALT activities were significantly decreased ($^{\sharp}p$ <0.05) in the Ga group compared with Con. LDH activities were significantly decreased ($^{\sharp}p$ <0.05) in the GG group compared with Con. On the light microscopic study, a number of vacuole were observed in the Con, but decreased in experimental groups. Conclusion : Ga aqueous extract and Chizadochi-Tang extract possesses hepatoprotective potential, thus validating its use in alleviating toxic effects of D-GalN.
The prescriptions (DB-1-DB-5) were prepared with the active herbal medicines, Acanthopanax senticosus, Glycyrrhiza uralensis, Polygonatum odoratum, and Cichorium intybus. The most active crude polysaccharide fraction (DB-2-3), which was isolated through the fractionation of hot-water extract from DB-2, was significantly reduced by periodate oxidation (52.7 and 63.7%) on intestinal immune system modulating and anticancer activity. When DB-2-3 was further fractionated by column chromatographies, DB-2-3IIc-2 showed the most potent activities. In addition, DB-2-3IIc stimulated the proliferation of bone marrow cells via Peyer's patch in dose-dependent pattern by oral administration. The metastasis of colon 26-M3.1 lung carcinoma had significantly inhibited in mice fed DB-2-3IIc at 1 mg/mouse (43.8%). DB-2-3IIc-2 mainly contained uronic acid (46.1%) and 42.5% of neutral sugar with a small amount of protein (7.6%), and component sugar analysis also showed that DB-2-3IIc-2 was composed Ara, Gal, and GalA (molar ratio; 0.50:0.63:1.00). It may be suggested that activities of DB-2-3IIc-2 are resulted from pectic polysaccharides containing a polygalacturonan moiety with side chain of neutral sugars, such as Ara and Gal.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.42
no.5
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pp.721-729
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2013
To improve the quality and functionality of the low salt squid Jeot-gal, extracts from three types of medicinal and edible plants (bay leaf, green tea, pine needle) were added. The quality characteristics, bioactivities, and shelf-lives of these preparations were determined at three different fermentation temperatures. The pH decreased more rapidly at higher temperatures, while the amount of volatile basic nitrogen (VBN), total viable cells, and amino nitrogen ($NH_2$-N) increased. The shelf-lives of Jeot-gal with natural plant extracts at $10^{\circ}C$ were 34~35 days, similar to the control. The major free and compositional amino acids of Jeot-gal were glutamic acid, proline, and alanine, while the major nucleotides (and related compounds) were hypoxanthine and inosine. In bioactivity assays, samples supplemented with plant extracts showed higher bioactivities than the control. The DPPH radical scavenging activity of ethanol extracts from Jeot-gal were stronger than the water extracts; in contrast, the water extracts were stronger for hydrogen peroxide scavenging activity. However, superoxide dismutase (SOD)-like activity and ${\beta}$-glucuronidase inhibitory activity were moderately low at 20 mg/mL. Based on sensory evaluation results, the quality of low salt squid Jeot-gal with natural plant extracts is similar to the control. Therefore, low salt squid Jeot-gal with natural plant extracts can be commercialized as a functional fermented food.
A lactic acid bacteria with ${\beta}$-gal activity was isolated from Kimchi, a traditional fermented vegetable food in Korea. The isolate was identified as a Lactococcus lactis strain and named L. lactis A2. The gene encoding ${\beta}$-gal of L. lactis A2 was cloned as a 5.8 kb PstI fragment. DNA sequencing identified the complete lacA (galactoside acetyltransferase)-lacZ (${\beta}$-galactosidase) genes together with the 3' part of upstream galT (galactose-1-phosphate uridyltransferase), and the 5'region of downstream galE (UDP-galactose-4-epimerase) genes. L. lactis A2 had the same gal/lac operon structure as in L. lactis subsp. lactis 7962. Other genes of the Leloir pathway are most likely to be located in the 5'upstream of the 5.8 kb fragment on the A2 chromosome. Sequences downstream of galE were different from those of L. lactis subsp. lactis 7962.
Le, Huong Giang;Yao, Zhuang;Kim, Jeong A;Lee, Se Jin;Meng, Yu;Park, Ji Yeong;Kim, Jeong Hwan
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.48
no.3
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pp.287-295
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2020
Lactobacillus zymae GU240 was previously isolated from Kimchi, a Korean fermented vegetable, as a strong GABA producer. The strain showed β-galactosidase (β-Gal) activity on MRS agar plates with X-gal. When growth and β-Gal activities of GU240 were measured using MRS (glucose, 2%, w/v) and MRSL (lactose, 2%, w/v) broths, cells were found to grow slowly in MRSL, and the β-Gal activity (36 units at 4 h) was lower than that of cells grown in MRS (94 units at 16 h). The highest OD600 value of the culture in MRS was 1.6 at 24 h at 37℃, whereas that of the culture in MRSL was 0.6 at 16 h. β-Gal activity of the culture in MRS reached the maximum (95.6 u/ml) at 16 h, decreased thereafter, and was not detected at 48 h. β-Gal activity for culture in MRSL reached its highest (36 u/ml) at 4 h and decreased gradually, but some activity (11.05 u/ml) still remained at 72 h. The structural gene encoding β-Gal in L. zymae GU240 was cloned as a 3.1 kb fragment, and DNA sequencing confirmed the presence of complete lacLM genes. lacLM genes from L. zymae GU240 showed 98-99% homologies in nucleotide sequences with other lacLM genes from L. brevis. Reverse transcription (RT)-PCR confirmed the operon structure of lacLM. The results indicated that L. zymae GU240 might be in the process of losing the ability to grow rapidly on lactose-containing medium, such as milk, due to adaptations to plant environments, including kimchi.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.27
no.5
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pp.617-624
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2013
The purpose of this study is to investigate the protective effects of 25 herbal formulas on acetaminophen (APAP) or D-galactosamine (D-GalN)-induced hepatotoxicity in primary rat hepatocytes. Cell viability was measured using by Cell Counting Kit-8. 15 kinds of herbal formulas significantly reversed the cell viabilities of D-GalN-treated rat hepatocytes compared with D-GalN alone (p<0.05). In particular, 9 herbal formulas (Bangpungtongseong-san, Bojungikgi-tang, Galgeun-tang, Gumiganghwal-tang, Guibi-tang, Sagunja-tang, Samsoeum, Pyeongwi-san and Yijin-tang) showed the potent protective effects. However, 8 herbal formula exerted weak protective effects and 2 herbal formula did not exert effects on hepatotoxicity by D-GalN. On APAP-induced hepatotoxicity, 7 kinds of herbal formulas increased the viabilities of hepatocytes compare with APAP alone (p<0.05). These results could be provide a valuable information for the future in vivo or clinical studies to predict the hepatoprotective effects of herbal formulas.
Energy minimization and conformational studies of molecular ions generated by ESI (electrospray ionization) tandem mass spectrometry (MS/MS) can be used for the discrimination of stereoisomeric permethylated and sodium cationized trisaccharides. Sets of fucose-containing trisaccharides having different internal and terminal linkages have been synthesized to analyze the reducing terminal linkage positions using BT and IT fusion approaches. A detailed investigation has been undertaken on the conformational behaviors of four trisaccharide fragments from human milk and blood group determinants of Type 1 and Type 2, namely Fuc($\alpha$1- 3)Gal($\beta$1-3)GalNAc and Fuc($\alpha$1-3)Gal($\beta$1-X)GlcNAc where X = 3, 4 and 6 using molecular modeling methods. Three dimensional rigid and adiabatic phi-psi-energy maps (Surfer program) describing the energy as a function of rotation around corresponding glycosidic linkages were calculated by SYBYL molecular modeling and MM4 force field programs conjunction with cleavage energies of ESI MS/MS for the side group orientations. This approach predicted conformational behaviors exhibited by isomer saccharides for future applications on biologically active glycoconjugates and to exploit a faster method of synthesizing a series of structural isomeric oligosaccharides.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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