의약품과 식품을 포함한 자연이나 환경 속에 포함되어 있는 여러 가지 화학물질들은 암 및 돌연변이를 유발할 수 있기 때문에 이런 것들에 의한 유해작용을 줄이려 노력하고 있으나 완전히 없기에는 어려운 현실이다. 따라서 식생활 습관을 개선하거나 식품 내에 존재하는 발암억제물질은 이용하여 암의 발생을 줄이기 위한 연구는 암의 치료제 개발과 더불어 관심의 대상이 되고 있다. 여러 가지 식품 속에 자연적으로 함유된 ellagic acid는 항돌연변이와 발암억제 효과가 있는 것으로 잘 알려져 있다. 따라서 본 실험에서는 단기간에 ellagic acid의 발암 억제 효과를 알아보기 위하여 전암지표효소인 GST-P 양성증식소를 측정하였다. Diethylnitrosamine으로 간장에서 암을 유발하였고 phenobarbital 과 간부분절제술로 암을 촉진시켰으며, ellagic acid를 400과 800ppm 투여군으로 구분하고 투여시기를 달리하여 실험하였다. 실험결과 암이 유발되기 전부터 실험종료까지 ellagic acid 400 ppm 투여군의 동물에서만 발암 억제효과를 관찰 할 수 있었으나, 800ppm 투여군에서는 투여시기에 관계없이 종양억제효과가 나타났다. 따라서 Diethylnitrosamine으로 유발된 간장의 발암은 ellagic acid에 의해 용량 의존적으로 억제됨을 알 수 있었다.
To clarify whether inhibitory effect of estrogen on liver tumor is associated with cell proliferation, we investigated its role in diethylnitrosamine (DEN)-induced rat preneoplastic lesions, with time sequenced manners. F344 male rats (n = 90) were divided into three groups at 5 weeks of age. The mini-osmotic pumps providing a continuous infusion of DEN was implanted into the abdominal cavity of each animal in group 1, 2 and 3 at 6 weeks of age. To see the effect of estrogen, pellet containing 1 or 10 ${\mu}g$ of estradiol-3-benzoate (EB) was implanted subcutaneously in the animals of groups 2 or 3, respectively, one week prior to DEN treatment. Ten animals of each group were euthanized at 10, 14 and 18 weeks after DEN treatment. Liver tissues at each time point were fixed in 10% phosphate-buffered formalin and were processed and embedded in paraffin and 5 ${\mu}g$ sections mounted on a silanized slide. Glutathione S-transferase placental form (GST-P) positive foci and 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) labeling cells were detected at each time point. Area of GST-P positive foci in DEN+EB 1 or 10 ${\mu}g$ group was significantly decreased compared to DEN alone at 14 weeks (p < 0.01 or p < 0.05, respectively) an at 18 weeks (p < 0.05 or p < 0.01, respectively). BrdU index in DEN+EB 1 or 10 ${\mu}g$ groups was significantly decreased compared to DEN alone at 14 weeks and at 18 weeks (p < 0.01). Taken together, we conclude that EB treatment decrease the DEN-induced liver preneoplastic lesions and this may be associated with decrease of cellular proliferation.
We investigated metabolism and carcinogenesis in livers of Sprague-Dawley rats fed juices and pelleted diets containing Korean native plants petasites japonicus Maxim by evaluating cell localization and expression of cytochrome P450s and GST-P. Anti-cytochrome P450s application in liver sections revealed three to four times increased expression of cytochrome P450E1 immunoreactivity in degenerative hepatocytes when compared to histologically normal hepatocytes. Anti-GST-P in showed positive pren plastic foci as well as in individual hepatocytes randomly scattered throughout all liver sections examined. Additionally GST-P was evident in proliferative endothelial cells and biliary epithelial cells in exposed rat livers. These results suggested that the increased level of cytochrome P4502E1 in affected hepatocytes was a direct consequence of Petasites japonicus toxicity. Further immunoreactivity to anti-GST-P in hepatocytes endothelial cells and biliary epithelial cells indicated a possible preneoplastic effects of Petasites japonicus in Sprague-Dawley rat.
본 연구는 한국산 겨우살이 물 추출물과 이에서 분리한 렉틴 성분을 실험적으로 간암을 유도한 흰쥐에게 투여하여 이들의 간 발암억제 효과를 조사하고자 하였다. 이를 위해 80~90 g정도로 이유된 3주령 Sprague-Dawley종을 유럽산겨우살이 추출물 투여(10 $\mu\textrm{g}$/kg BW, 100 $\mu\textrm{g}$/kg BW)와 렉틴(1 ng/kg Bw, 10 ng/kg BW)의 투여량 DEN 투여 여부에 따라 12군으로 나누어 발암물질 투여 1주일 후부터 주 2회 복강 투여하고 실험식이를 공급하였다. 총 사육기간은 9주간이었고 희생시킨후 혈청과 간 조직을 분리하여 조직병리학적 변화 측정을 위한 전암성 병변의 지표인 GST-P+ foci의 수와 면적을 측정하였고 생화학적 변화 측정을 위해 간 기능의 지표인 혈청 GOT와 GPT 활성도, 혈청 $\alpha$-L-fucosidase 활성도를 측정하였다. 그결과 다음과 같은 결론을 얻었다. (1)체중은 발암물질에 의해 식이 섭취가 감소하는 것을 고려하여 제한 섭취를 실시하였으나 발암물질 투여나 겨우살이 또는 렉틴의 투여에 따라 약간 감소하는 경향을 보였고 간 무게는 겨우살이 렉틴의 효과는 보이지 않으나 발암물질 투여에 따라 유의적으로 증가하였다. 체중에 대한 상대적인 간 무게에 대한 결과도 간 무게의 결과와 유사하였고 유럽산보다는 한국산 겨우살이 물 추출물의 간 무게와 체중에 대한 간 무게의 비율이 작게 나타나 한국산 겨우살이 물 추출물의 독성이 간에 영향을 작게 미치는 것으로 보여진다 (2) GST-P+ foci의 수나 면적은 겨우살이나 렉틴의 투여에 따라 유의적으로 감소하였고 유럽산과 한국산의 겨우살이 추출물 종류에 따라서는 한국산 겨우살이 추출물을 투여한 군에서 약간 증가하는 경향을 보였으나 한국산 겨우살이 물 추출물의 양을 증가시켜 100 $\mu\textrm{g}$/kg BW 수준으로 투여한 결과 foci의 수나 면적이 유의적으로 감소하여 가장 낮은 값을 보였다. 렉틴의 투여량에 따른 결과도 양이 증가함에 따라 GST-p_ foci의 수와 면적이 감소하였다. (3) 혈청 GOT 활성도는 유의적이지는 않지만 발암물질 투여에 따라 증가하는 경향을 보였고 겨우살이나 렉틴의 투여에 따라유의 으로 증가하였으며 겨우살이와 렉틴에 따라서는 GOT와 비슷한 경향을 나타냈다.을 나타냈다.
홍삼 및 수삼이 랫트의 간조직에서 diethylnitrosamine(DEN)에 의해 유도되는 preneoplastic altered foci 형성에 미치는 영향을 관찰한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Altered foci의 지표로 사용되는 glutathione S-transferase (GST-P)-positive foci의 숫자는 DEN 단독투여군($9.07{\pm}5.69$)에 비하여 수삼병행 투여군 ($4.77{\pm}3.23$)에서, 면적은 DEN 단독투여군($0.93{\pm}0.65$)에 비하여 홍삼병행투여군 ($0.50{\pm}0.31$)에서 각각 현저한 감소를 나타냈다. 이러한 결과는 홍삼 및 수삼이 간암 발생을 억제하는 작용이 있음을 암시하였다.
생후 6주령된 Fischer344 랫드를 4개군으로 나누어 시험 개시 일에 diethylnitrosamine을 제 1, 2, 3 군에 복강내로 각각 체중 kg당 200mg을 1회 주사하였고, 제 4군에는 생리적 식염수를 복강내로 1회 투여하였으며, 간 변화의 증폭을 위해 시험개시 3주후에 간의 약 67%를 부분절제하였다. 제1,2 군은 시험개시 후 제 2주부터 2-acetylaminofluorene(2-AAF)를 사료에 0.02%가 되게 섞어 4주간 투여하였고, 제3군과 대조군인 제4군에는 기초 사료만을 급여하였다. 제 1,3군은 철저항병소의 검색을 위하여 시험종료 2주전에 iron dextran을 체중 100g당 0.125 mg을 주 3회 피하로 투여하였고, 시험종료 후에 모든 랫드를 부검하여, 고정제로 고정한 후 일반적인 조직표본을 만들었다. 전암병소 검색을 위해 glutathione S-transeferase placental form(GST-P)에 대한 면역조직화화적 염색과 Perl's 법에 의한 철염색을 한 후, 동일한 조직을 연속절편하여 hematoxylin & eosin 염색한 것과 비교하였고, 칼라 화상분석기로 병소의 면적을 계산하여 통계학적 분석을 하였다. 본 연구의 결과는 철 저항 nodule이 주위의 정상조직과 한계가 어느정도 굴별되어 병변을 검색할 수 있었으나 GST-P 양성 nodule에 비하여 확실하지 않았고, 또한 철저항 foci는 주위의 정상조직과 한계가 명확하게 구별할 수 없었다. 간엽 전체에 대한 병소의 면적비교는 철 저항병소의 면적이 GST-P양성 병소의 면적보다 유의성 있게 낮았다. (p<0.01). 따라서 전암병소를 검색하는데는 GST-P양성 병소에 의한 검색이 철 저항 병소에 의한 검색보다 더 민감하고 믿을만한 지표가 되는 것으로 생각된다.하고 있는 각종 지구관측위성(EOS)들이 실용화 될 2000년 대에는 일반 지구환경감시는 물론 수계환경 감시 체계구축에 획기적인 진전이 있을 것으로 기대된다.limon(Jordan et Fowler) 및 청자갈치 Allolepis hollandi Jordan et Hubbs, 장갱이란 Stichaeidae의 세줄베도라치 식nogrammus hewagrammus(Temminck et Schlegel), 장갱이 Stichaeus grigorjemi Her\ulcornerenstein, 왜도라치 Chri'olophis wui(Wang et Wang ) , 괴도라치 Chirolophis joponicus(Jordan et snyder) , 벼슬베도라치 각ectrias benjamini Jordan et Snyder, 가시베도라치 Lumpenella nigricons Matsubara, 육점날개 Ophistocentws zonope jordan et Snyder, 그물베도라치 Dictyosoma burgeri Van der Hoeven 및 황점 베도라치Dictyosoma wbrimaculata Yatsu, Yasuda et Taki, 그리고 황줄베도라치란 Pholididae의 황줄베도라치 Phoris taczanowskii(Steindachner), 오색베도라치 Phoris omotus (Girad), 베도라치 Pholis nebuloso(Temminck et Schlegel), 횐베도라치 Pholisfangi(Wang et Wang) 및 점베도라치 Pholis crossispino(Temminck et Schlegel)의 17속 25종이 분류되었다. 이중에서 Zoarchias glaber, Chirofophis oui, Alectrias benjamini, Dictyosoma mbrimaculamia 및 Pholis crassispina의 5종은
The effect of green tea drinking on the hepatocellular chemical cacinogenesis have been studied. Placental glutathione S-transferase(GST-P) positive foci area in a liver tissue, contents of thiobarbituric acid reactive substances(TBARS), total cytochrome P450 and glucose 6-phospphatase(G6P) activity in hepatic microsomes were investigated. Weaning Sprague-Dawley male rats were fed AIN-76A diet with deionized water or green tea infusion, Rats of CTR and CTR+ groups were provided deionized water while GTI and GTI+ groups were provided green tea instead of deionized water for the entire experimental period of 13weeks. Rats of GTP and GTP + groups had deionized water for the first 6 weeks and switched to green tea for the last 7weeks of the experimental period. CTR+, GTI +, and GTP + groups were carcinogen treated groups, Diethylnitrosamine(DEN) was injected as a single dose of 200mg/kg body weight intraperitoneally after 4 weeks of feeding. 2-Acetyla-minofluorene(AAF) was used as a carcinogen proliferater and suppled in the diets of carcinogen treated rats as 0.02% content for the last 6weeks starting from 2weeks after DEN injection. Rats were sacrificed after 13week weeks of feeding. The area and number of GST-P positive foci detected in carcinogen treated rats were decreased by green tea ingestion but when timing and duration of green tea ingestion was delayed after promotion period as in GTP + group, GST-P positive foci were not decreased as much as in GTI+ group. TBARS contents of carcinogen treated rats decreased by 13weeks of green tea ingestion but GTP groups did not show statiscally significant differences. G6P activities tended to decrease by carcinogen treatment but changes were not statiscally significant by green tea ingestion. Total cytochrome P450 contents were increased by carcinogen treatment. Thirteen weeks of green tea ingestion (GTI) also increased to total cytochrome P450 contents while 7weeks of green tea ingestion(GTP) did show any effects. These results suggest that green tea has suppressive effects on hepatocellular chemical carcinogenesis probably through the activities of antioxidant compounds. (Korean J Community utrition 2(5) : 735∼744, 1997)
Spirogyra neglecta, a freshwater green alga, is a local food in the northern and northeastern parts of Thailand. This investigation explored the anticarcinogenicity of S neglecta and its possible cancer chemopreventive mechanisms in rats divided into 14 groups. Groups 1 and 10 served as positive and negative control groups, respectively. Groups 1-9 were intraperitoneally injected with diethylnitrosamine (DEN) once a week for 3 weeks. Groups 10-14 received normal saline instead. One week after the last DEN injection, groups 2-5 were administered for 9 consecutive weeks various doses of S neglecta extract (SNE) and dried S neglecta (SND), mixed with basal diet. Groups 6-9 and 11-14 similarly were administered various doses of SNE and SND starting from the first week of the experiment. Administration of SNE and SND was not associated with formation of glutathione-Stransferase placental form (GST-P) positive foci in rat liver. SNE and SND during initiation phase significantly reduced the number of GST-P positive foci in rats injected with DEN. The number of GST-P also diminished in groups treated with SNE and SND after injection with DEN, except for the low dose extract group. SNE showed stronger anticarcinogenic potency than SND. Furthermore, SNE also decreased the number of Ki-67 positive cells. However, the numbers of TUNEL-positive cells in the liver of the SNE-treated groups were not statistically different from the controls. The GST activity in 50 mg/kg bw of SNE and 1% of SND groups was significantly increased as compared to the positive control. In conclusion, Spirogyra neglecta (Hassall) K$\ddot{u}$tzing showed cancer chemopreventive properties at the early stages of diethylnitrosamine-induced hepatocarcinogenesis in rats. Possible inhibitory mechanisms include enhancement of the activities of some detoxifying enzymes and/or suppression of precancerous cells.
Caffeine이 랫드의 간조직에서 diethylnitrosamine(200mg/kg B.W., DEN)에 의해 유도되는 preneoplastic altered foci형성의 promotion단계에 미치는 효과를 관찰한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Altered foci의 지표로 사용되는 glutathione S-transferase(GST-P)-positive foci의 수는 caffeine 음수 $m{\ell}$당 2mg 병행투여군($3.10{\pm}2.74$) 및 1mg병행 투여군($5.86{\pm}2.83$) 모두에서 DEN 단독투여 대조군($11.55{\pm}5.82$)에 비하여 현저히 낮게 나타났으며 면적 또한 caffeine 2mg 병행투여군($0.13{\pm}0.11$), 1mg 병행투여군($0.21{\pm}0.12$)에서 DEN 단독투여 대조군($0.76{\pm}0.33$)에 비하여 유의성있는 낮은 수치가 관찰되었다. 간 세포배양에서 unscheduled DNA synthesis(UDS)는 DEN($250{\mu}g/m{\ell}$ of medium)단독처리군에 비하여 caffeine($200{\mu}g/m{\ell}$ of medium) 처리시 약 70% 감소하였다. 이러한 결과는 caffeine이 간암발생의 promotion단계에 작용하여 억제효과를 나타냄을 암시하며 이는 DNA회복의 억제와 관계됨을 알 수 있었다.
Caffeine이 랫트의 간조직에서 diethylnitrosamine(200mg/kg B.W., DEN)에 의해 유도되는 preneoplastic altered foci형성의 initiation단계에 미치는 효과를 관찰한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Altered foci의 지표로 사용되는 glutathione S-transferase(GST-P)-positive foci의 수는 caffeine 음수수 ml 당 2mg병행투여군 $(7.48{\pm}3.33)$ 및 1mg 병행 투여군 $(7.50{\pm}3.32)$ 모두에서 DEN 단독투여대조군$(14.08{\pm}5.16)$에 비하여 현저히 낮게 나타났으며, 면적 또한 caffeine 2mg병행투여군 $(0.29{\pm}0.17)$, 1mg병행투여군 $(0.30{\pm}0.13)$에서 DEN단독투여대조군 $(0.46{\pm}0.21)$에 비하여 유의성 있는 낮은 수치가 관찰되었다. 이러한 결과는 caffeine이 간암발생의 initiation 단계에 작용하여 억제효과를 나타냄을 암시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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