For the purpose of supplying the information to improve the acceptability of soy paste as the condi-ment, we investigated the changes of free sugar, volatile and nonvolatile organic acids during improved soypaste fermentation. The results were as follows; Free sugars were increased in order of glc> xyl>ara>gal. Acetic, formic, butyric, and propionic acid in volatile organic acids were detected. And total contents were increased until 60 day. In 180 day, contents of volatile organic acids were high in order of acetic>propionic> butyric> formic. The contents of succinic and glutaric acid in nonvolatile organic acids were predominent and increased in order of succinic>glutaric>lactic. Tartaric>citric>malic acid were produced in the next order.
The chitosanase gene (btbchito) of Bacillus thuringiensis BMB171 was cloned and heterologously expressed in the yeast Pichia pastoris. After purification, about 300 mg of recombinant chitosanase was obtained from the 1-1 culture medium with a specific activity of 240 units/mg. Results determined by the combined use of thin layer chromatography (TLC) and matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry (MS) showed that the chitooligosaccharides (COSs) obtained by chitosan (N-deacetylated by 70%, 80%, and 90%) hydrolysis by rBTBCHITO were comprised of oligomers, with degrees of polymerization (DP) mainly ranging from trimers to heptamers; high molecular weight chitopentaose, chitohexaose, and chitoheptaose were also produced. Hydrolysis products was also deduced using MS since the COSs (n) are complex oligosaccharides with various acetyl groups from one to two, so the non-acetyl COSs (GlcN)n and COSs with more acetyls (> 2) were not detected. The employment of this method in the production of high molecular weight COSs may be useful for various industrial and biological applications, and the activity of chitosanase has great significance in research and other applications.
The phosphoenolpyruvate-dependent carbohydrate phosphotransferase system (PTS) is responsible for the simultaneous transfer and phosphorylation of various carbon sources in Escherichia coli. The ptsG gene encoding the enzyme $IICB^{Glc}$, the membrane component of the glucose-specific PTS, is repressed by Mlc and activated by the CRP cAMP complex; various other factors, such as Fis, FruR, and ArcA, are also known to be involved in ptsG regulation. Thus, in an attempt to discover a novel gene affecting the regulation of ptsG, a mutant with a decreased ptsG transcription in the presence of glucose compared with the wild-type strain was screened using transposon random mutagenesis. The mutant was found to have a transposon insertion in yhjV, a putative gene encoding a transporter protein whose function is yet unknown.
Abstract Two glucans (PONGa and PONGb) differing in their anomeric and glycosidic linkage structures were isolated from the water-insoluble materials (PON) of Pleurotus ostreatus basidiocarps, which activated the complement system and were almost soley composed of D-glucose. The isolatIon was achieved by repeated precipitations with ethanol and adsorption on concanavalin A (Con A) of paN suspension in thymol/NaCL Based on methylation analysis. IR, GLC-MS, $^1H,{\;}and{\;}^{13}C-NMR$ spectroscopies, PONGa was found to be a branched a-glucan composed of ${\alpha}-linked$ D-glucopyranose residues and ${\alpha}-linked$ units with 6-branching points, whereas PONGb was a linear ${\beta}-1,3-glucan$ composed mainly of ${\beta}-1,3-linked$ D-glucopyranose residues. The PONGb particles reacted more potently than the PONGa particles as C3 activator in alternative complement hemolysis and crossed-immunoelectrophoresis using anti-human C3, thereby suggesting that the complement activating components of PON were ${\beta}-(13)-glucans rather$ than ${\alpha}-glucan$ components.onents.
To investigate the effects of iota-carrageenan (CAR) and/or alum on the adjuvancity as well as the structural difference of oligosaccharide on the IgG2b in the adjuvant effect, C57BL/6 mice were immunized twice with fetuin as a model antigen. CAR alone showed no significant effect on induction of antibody except IgG1. In contrast, Alum-CAR (after mixing of antigen-Alum, CAR adjuvant was prepared) and CAR-Alum (after formulation of antigen-CAR, Alum adjuvant was prepared) enhanced production of antibody, especially, IgG2b. After separation of IgG2b, changes of glycosylation were investigated using enzymelinked lectin assay. High affinity of IgG2b to N-acetylneuraminic acid, galactose and mannose-specific lectin were induced by CAR-Alum adjuvant, however, the affinity of IgG2b induced by CAR-Alum to GlcNAc and GalNAc-specific lectin were much less than that induced by Alum-CAR.
The glycosylation of therapeutic glycoproteins can affect their efficacy, stability, solubility, and half-life. Analyzing the composition of monosaccharides, such as that of neutral and amino sugars, is the first step for elucidating the structure of glycan attached to glycoproteins. In the present study, neutral and amino sugars of lectin obtained from Maackia fauriei were analyzed using an enzyme-linked lectinsorbent assay (ELLA) and high-performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detection (HPAEC-PAD). Peroxidase-labeled lectins such as concanavalin A, Ricinus communis agglutinin, and soybean agglutinin were used for ELLA, since they specifically bind to the monosaccharide residue most frequently encountered in a glycan. The hydrosylate of lectin was prepared by treatment with trifluoroacetic acid, which resulted in the lectin mainly possessing the N-glycan consisting of 98.1 pmol Fuc, 342.1 pmol GlcN, 51.9 pmol Gal, 678.9 pmol Man, and 330.7 pmol Xyl. The present results demonstrate that ELLA and HPAEC-PAD are very effective methods for rapidly estimating the types and relative amounts of monosaccharides in intact glycoproteins.
The objectives of this investigation were to produce artificially an antitumor constituent by submerged culture of the mycelium of Coriolus versicolor (Fr.) Quel., to characterize the influence of various modifications of the nutrient and culture conditions with respect to the production, to determine chemical composition of the antitumor constituent, and to examine effects of the constituent on the immune response of mice. Submerged agitation of the mycelium in flasks containing a nutrient solution showed its adequate growth. Especially the mycelial growth in the medium containing glucose and yeast extract was abundant. The addition of cotton seed flour or ginseng waste to the medium increased the yield of mycelial growth and the production of the antitumor constituent. The replacement of glucose with starch also yielded the adequate growth. The antitumor constituent extracted from the mycelium and isolated from the culture filtrate was a protein-bound polysaccharide. The analyses of this constituent by GLC and amino acid autoanalysis showed that it contained four monosaccharides and fifteen amino acids. The protein-free polysaccharide of the constituent was also found to exert greater antitumor activity against sarcoma-180 in mice than the entire constituent. The antitumor constituent was found to potentiate the immune response of mice against sheep red blood cell. The protein-bound polysaccharide exerted more favorable influence on the immunity than the protein-free moiety.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.20
no.3
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pp.225-232
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1991
A Study was carried out to elucidate the triglyceride compositions of the red pepper seed oils harvested from two different areas. The oil was extracted from the red pepper seed with nhexane. Each triglyceride of the oil was separated by thin layer chromatography (TLC) and fractonated by reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) on the basis of acyl carbon numbers, and partition number group(PN) and fatty acid composition of triglyceride were analyzed by gas liquid chromatography (GLC). From the results, it was found that the red pepper seed oils of the Chungsong and Youngyang areas consisted of 14 and 18 kinds of triglycerides, respectively. The red pepper seed oil of the Chungsong area consisted of (C18:2, C18:2, C18:2=41.0%), (C16:0, C18:2, C18:2=37.1%), and that of the Youngyang area consisted of (C18:2, C18:2, C18:2=41.0%), (C16:0, C18:2, C18:2=36.3%) and (C16:0, C16:2, C18:2=8.4%), as the major triglycerides.
Enterobacteria, named ${\lambda}-bacteria$ isolated from fusiform fish bearing higher antioxidative capacity with ORP values, ${\lambda}-28$ strain bore higher anti-angiogenesis effect than other ${\lambda}-species$. Optimum growth condition of ${\lambda}-28$ bacterium was $25^{\circ}C$, neutral pH, Glc as a C-source, ammonium chloride as a N-source, and not effected with organic N-source.
The age-46.5 gene of Escherichia coli is induced by nitrate ion and regulated by Fnr, NarL, and NarP during anaerobic growth. aeg-46.5::lacZ fusion gene shows its maximum expression in narL host after two hours of aerobic to anaerobic switch in M9-Glc-nitrate medium. Fnr and NarP act as positive regulators, and NarL acts as a negative regulator. The control region of the aeg-46.5 was identified and the binding sites of regulator proteins have been predicted (Reznikoff and Choe (1993)). It has two symmetry regions. One is located at -52~-37 bp from the anaerobic mRNA 5'-end, which is the binding site of NarL and NarP. The other is located at +37~+56 bp from the 5'-end of mRNA. In this study, the downstream symmetry region from the mRNA 5'-end was investigated by site-directed mutagenesis. The destruction of the symmetry region increases the expression level of aeg-46.5. We propose that the symmetry region interferes with the expression of aeg-46.5 possibly by forming a stem-and-loop structure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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