Objectives : The aim of this study was to evaluate the effects of Loranthus parasiticus Merr. on cell cycle and expression of related genes in HepG2 cells. Methods : The MTT assay, cell counting assay, $[^3H]-Thymidine$ incorporation assay, flow cytometric analysis, quantitative RT-PCR and western blot assay were studied. Results : In the water extract of Loranthus parasiticus Merr., inhibition of cell proliferation and DNA synthesis in HepG2 cells was seen. These inhibitory effects were due to inhibition of G l-S transition in cell cycle. After treatment with the extract, expression of cyclin D1(G1 check point related gene) was inhibited particularly in dose-dependent and time-dependent manners. Conclusion : These results suggest that the inhibition of cell cycle progression by Loranthus parasiticus Merr. in HepG2 cell is due to suppression of cyclin D1(G1 check point related gene) mRNA expression and protein synthesis.
Granular activated carbon is commonly used in fixed-bed adsorbers to remove organic chemicals. In this experiment organic chemical solutions were prepared by adding the reagent grade organic chemical to distilled water. Isotherm adsorption tests of volatile organic chemicals were conducted using bottle-point technique and column test. Organic chemicals after passing through the column were extracted with hexane and analyzed with gas chromatography (Hewlett-Packard 5890) to check the adsorption capacity and breakthrough curve. The result were as follows: 1. The BET surface area of coconut activated carbon was 658~1,010 m$^2$/g where as coconut shell carbon was 6.6 m$^2$/g. Coconut activated carbon increased the BET surface area and adsorption capacity in bottle-point isotherm. 2. The adsorption capacity of coconut activated carbon for trichloroethylene (TCE) was reduced in the presence of humic substance. 3. A decrease in particle size of activated carbon resulted in higher adsorption capacity and lower intraparticle diffusion coefficient. It is reflected not only as a decrease in Freudlich adsorption capacity value (K) but also as an increase in Freudlich exponenent value (1/n).
Jang, Soo Hwa;Kim, Ah-Ram;Park, Neung-Hwa;Park, Jeong Woo;Han, In-Seob
Molecules and Cells
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제39권9호
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pp.699-704
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2016
Developmentally regulated GTP-binding protein 2 (DRG2) plays an important role in cell growth. Here we explored the linkage between DRG2 and G2/M phase checkpoint function in cell cycle progression. We observed that knockdown of DRG2 in HeLa cells affected growth in a wound-healing assay, and tumorigenicity in nude mice xenografts. Flow cytometry assays and [$^3H$] incorporation assays indicated that G2/M phase arrest was responsible for the decreased proliferation of these cells. Knockdown of DRG2 elicited down-regulation of the major mitotic promoting factor, the cyclin B1/Cdk1 complex, but upregulation of the cell cycle arresting proteins, Wee1, Myt1, and p21. These findings identify a novel role of DRG2 in G2/M progression.
Exposures to environmental chemicals that mimic endogenous hormones are proposed for a number of adverse health effects, including infertility, abnormal prenatal and childhood development and above all cancers. In addition, recently miRNA (micro RNA) has been recognized to play an important role in various diseases and in cellular and molecular responses to toxicants. In this study, endocrine disrupting environmental toxicant, nonylphenol (NP) was treated to MCF-7 (Human breast cancer cell) and HepG2 (Human hepatocellular liver carcinoma) cell line at 3 hrs and 48 hrs time point and miRNA analysis using $mirVana^{TM}$ miRNA bioarray was performed and compared with total mRNA microarray data for the same cell line and treatment. Robust data quality was achieved through the use of dye-swap. Analysis of microarray data identifies a total of 20 and 11 miRNA expressions at 3 hrs and 48 hrs exposure to NP in MCF-7 cell line and a total of 14 and 47 miRNA expression at 3 hrs and 48 hrs exposure respectively to NP in HepG2 cell line. Expression profiling of the selected miRNA (let-7c, miR-16, miR-195, miR-200b, miR200c, miR-205, and miR-589) reveals changes in the expression of target genes related to metabolism, immune response, apoptosis, and cell differentiation. The present study can be informative and helpful to understand the role of miRNA in molecular mechanism of chemical toxicity and their influence on hormone dependent disease. Also this study may prove to be a valuable tool for screening potential estrogen mimicking pollutants in the environment.
In order to evaluate the effect of the extracts of eidble and medicinalplant son the activation of immune cells, measurements were made by ELISA and radioimmunoassay on the degree of release for the tumor necrosis factor (TNF) and neopterin by the edible and medicinal plants in peripheral blood cells. The results of measurements of TNF in the supernatant cultured liquid showed nothing in t도 control which does not have any edible and medicinal plants. However, measurements of TNF 9pg/ml) in the samples are given as follows : 716.7 in lipopolysaccharide (LPS 1 g/ml), 465.2 Rheum plamatum L.m302.7 Sanguisorba offciinalis L. 818.2 Rubus coreanus M, 328.3 Terminalia chebula R., 426.6 AReca catechu L. 227.0 Eugenia caryophiliata T., 272.9 Ephedra sinica S., 30.1 Caesalpinia sappan L., 474.0 Chaenomeles japonica L., 396.0 Cornus officinalis S.in edible and medicinalplants. ENopterin (n mole/L) value showed below the check point in the control group, however, the values are 11.0 in LPS, and edible and medicinal plants, 5.3 Rheum palmatum L., 11.6 Eugenia caryophiliata T., 5.5 Ephedra sinica S., 4.5 Caesalpinia sappan L., 4.3 Chaenomelees japonica L.3.7 Cornus officinalis S. In order to find m RNA levels of Cytokines increased by edible and medicinal plants, total RNA was separated from mononuclear cells treated 5 hrs with Rubus coreanus M. and then administrated for RT-PCR. The considerable increases of the m RNA of TNF, IL-1 $\alpha$ and IL-6 were observed.
본 연구에서는 명아주과 수송나물속 솔장다리(Salsola collina Pall.) 추출물의 항산화 및 항암 활성을 분석하였다. 먼저 솔장다리의 에탄올 추출물의 DPPH radical scavenging activity를 분석한 결과, $IC_{50}$가 $4.82{\mu}g/ml$로 나타나 강한 항산화능을 보유하였음을 확인하였다. 또한 대장암 세포주(HT29), 폐암 세포주(A549), 간암 세포주(HepG2)를 사용하여 솔장다리 추출물의 암세포 사멸효과를 분석한 결과, $IC_{50}$가 각각 43.8, 64.1, $92.5{\mu}g/ml$로 강력한 세포사멸효과를 나타냈으며 특히 HT29에 대한 강한 사멸효과를 보였다. 솔장다리 추출물의 항암 활성 기전 분석을 위해 세포주기를 분석한 결과, 대장암세포인 HT29의 G2/M arrest를 유도하였으며 최고 농도인 $60{\mu}g/ml$까지 S기 세포수가 증가하였다. 세포주기관련 단백질의 발현 분석 결과, 솔장다리 추출물을 처리한 경우, G2기에서 M기로의 전이에 필수적인 단백질인 Cdc25C와 cyclin A의 발현이 감소되었고, 반면 Cdc25C와 Cdc2의 불활성화 형태인 p-Cdc25C, p-Cdc2는 증가하였다. 또한 p21과 Wee1의 발현도 증가되었다. 하지만 p53의 발현량은 변화가 없었다. 이러한 결과는 솔장다리 추출물을 처리한 경우, p53 비의존적으로 p21의 발현이 증가되어 cyclin A/Cdc2 complex의 활성이 조절되고, 이어서 G2/M phase의 check point에 작용하는 Wee1의 발현증가 및 Cdc25C, Cdc2의 인산화에 의한 불활성화를 통하여 G2/M arrest가 유도되는 것을 시사한다. 또한 솔장다리 추출물 처리에 의해 S기 진행을 조절하는 Cdk2의 발현량도 감소하여, cyclin A/Cdk2 complex가 감소되어 S기의 세포수가 증가한 것으로 보인다. 따라서 본 연구 결과를 통해 솔장다리 추출물이 높은 항산화 활성을 지니며 암세포의 세포주기를 조절하여 높은 항암 활성을 보유함을 확인하였다.
The cellular apoptosis susceptibility (CSE1L) gene has been demonstrated to regulate multiple cellular mechanisms including the mitotic spindle check point as well as proliferation and apoptosis. However, the importance of CSE1L in human colon cancer is largely unknown. In the present study, we examined expression levels of CSE1L mRNA by semiquantitative RT-PCR. A lentivirus-mediated small interfering RNA (siRNA) was used to knock down CSE1L expression in the human colon cancer cell line RKO. Changes in CSE1L target gene expression were determined by RT-PCR. Cell proliferation was examined by a high content screening assay. In vitro tumorigenesis was measured by colony-formation assay. Cell cycle distribution and apoptosis were detected by flow cytometric analysis. We found CSE1L mRNA to be expressed in human colon cancer cells. Using a lentivirus based RNAi approach, CSE1L expression was significantly inhibited in RKO cells, causing cell cycle arrest in the G2/M and S phases and a delay in cell proliferation, as well as induction of apoptosis and an inhibition of colony growth capacity. Collectively, the results suggest that silencing of CSE1L may be a potential therapeutic approach for colon cancer.
Although nucleolar protein nucleostemin (NS) is essential for cell proliferation and early embryogenesis and expression has been observed in some types of human cancer and stem cells, the molecular mechanisms involved in mediation of cell proliferation and cell cycling remains largely elusive. The aim of the present study was to evaluate NS as a potential target for gene therapy of human breast carcinoma by investigating NS gene expression and its effects on SKBR-3 cell proliferation and apoptosis. NS mRNA and protein were both found to be highly expressed in all detected cancer cell lines. The apoptotic rate of the pcDNA3.1-NS-Silencer group ($12.1-15.4{\pm}3.8%$) was significantly higher than those of pcDNA3.1-NS ($7.2-12.0{\pm}1.7%$) and non-transfection groups ($4.1-6.5{\pm}1.8%$, P<0.01). MTT assays showed the knockdown of NS expression reduced the proliferation rate of SKBR-3 cells significantly. Matrigel invasion and wound healing assays indicated that the number of invading cells was significantly decreased in the pcDNA3.1-NS-siRNA group (P<0.01), but there were no significant difference between non-transfected and over-expression groups (P>0.05). Moreover, RNAi-mediated NS down-regulation induced SKBR-3 cell G1 phase arrest, inhibited cell proliferation, and promoted p53 pathway-mediated cell apoptosis in SKBR-3 cells. NS might thus be an important regulator in the G2/M check point of cell cycle, blocking SKBR-3 cell progression through the G1/S phase. On the whole, these results suggest NS might be a tumor suppressor and important therapeutic target in human cancers.
다히(dahi)는 원유를 이용하여 방글라데시 전통 방법으로 발효시킨 요구르트와 비슷한 발효 유제품으로 본 연구는 실험실에서 만든 다히(dahi)와 시장에서 판매되고 있는 다히(dahi)의 품질을 비교하기 위하여 수행되었다. 실험실에서 준비한 다히(dahi)는 (A), Kishoregonj 지역에서 수집한 다히(dahi)는 (B), Gazipur 지역의 다히(dahi)는 (C), Bogra 지역의 다히(dahi)는 (D), Dhaka 지역의 다히(dahi)는 (E, F)로 각각 구분하였다. 소비자 만족 품질은 심사위원들에 의해 100점 만점으로 판단되었으며 화학적 미생물학적 품질 시험은 확립된 방법에 의해 수행되었다. 'A' 타입의 다히(dahi)가 소비자 만족 품질에 있어서 가장 우수한 것으로 나타났으며 그 다음으로 E, D, F, B, C 순으로 나타났다. 화학적 시험 결과, 'B'타입의 다히(dahi)가 가장 낮은 pH ($3.75\;{\pm}\;0.05$)를 나타냈으며 'C'타입의 다히(dahi)가 가장 높은 pH ($4.46\;{\pm}\;0.15$)를 나타내었다. 'F' 타입의 다히(dahi)의 총 고형물, 지방, 단백질, 회분이 각 각 $318.40\;{\pm}\;4.44\;g/kg$, $52.00\;{\pm}\;2.00\;g/kg$, $44.33\;{\pm}\;2.00\;g/kg$, $10.76\;{\pm}\;0.31\;g/kg$으로 가장 높게 나타났다. 'B'타입의 다히(dahi)에서 total viable count (TVC)는 $94.00\;{\pm}\;4.58\;cfu/ml$, 효모가 $183.33\;{\pm}\;15.28\;cfu/ml$, 곰팡이가 $53.33\;{\pm}\;15.28\;cfu/ml$로 미생물학적 품질 측면에서 가장 좋지 않은 것으로 나타났다. 'A' 타입의 다히(dahi)는 TVC, 효모와 곰팡이가 각 각 $39.67\;{\pm}\;4.51\;cfu/ml$, $50.00\;{\pm}\;10.00\;cfu/ml$, $20.00\;{\pm}\;10.00\;cfu/ml$로 나타났다. 3가지 주요 품질을 고려하였을 때 'A'타입의 다히(dahi)가 가장 우수하였으며 그 다음으로 F, D, E, C, B 순으로 나타났다.
Objectives: This study was conducted to establish the study form of atopic dermatitis in oriental medicine, to find out the effect of herbal medicine and to compare Bangpungtongsungsan group with symptom-complexes prescription group. Methods: We gave scores(1-3) to the 37 outpatients who visited the dept. of Ophthalmotolaryngology & Dermatosurgery of the Kyunghee Oriental Medical Center from June 1,2000 to September 30, 2000. According to transformed the G. Rajka, T. Langeland and Jon M. Hanifin standard. We checked the Eosinophil count, IgE and the scores (intensity: the degree of itching, course: the degree of itching during a year, extent: erythema, lichenification, scaling. dryness, erosion' oozing). After herbal treatment for 6 weeks, we checked the above factors again in the same way. In treatment, we divided the patients into Bangpungtongsungsan group and Symptom-complexes group for cross-comparison. Results: There were 19 patients we could check by score and 14 patients by laboratory. 1. In the 14 lab cases, the number of abnormal value of Eosinophil count and IgE was decreased but it was not significant. 2. In the 19 cases by score, clinical severity of the intensity of itching, lichenification, scaling' dryness was significantly decreased between the before- and after-herbal treatment periods (P<0.01, P<0.01, P<0.05). 3. In 19 cases, clinical severity of erythema, erosion. oozing was decreased after herbal treatment but it was not significant(p>0.05). 4. In point of total score, clinical severity of atopic dermatitis was significantly decreased after herbal treatment(p<0.01). 5. There was no significant difference between Bangpungtongsungsan group and Symptom-complexes group(P<0.05). Conclusions: Although more study is needed, these results indicate that herbal treatment is effective on atopic dermatitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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