This study was conducted to evaluate the antifungal activity of 19 agro-materials that have been registered for organic cultivation in Korea, after inoculation of pear leaves with Venturia nashicola and Gymnosporangium asiaticum. In V. nashicola, most of the nine agro- materials containing sulfur and copper completely inhibited spore germination, and some of the spores that germinated did not form appressoria. However, in only lime sulfur, Neobordeaux (cupric sulfate), and Wheengaris (sulfur)showed antifungal activity against G. asiaticum. Among the agro-materials containing plant extracts, Wheengarujaba (wood vinegar+spirits+rhubarb) inhibited conidial germination in V. nashicola and G. asiaticum by 100% and 71.6%, respectively. Among the agro-materials containing antifungal microorganisms, Cheongotan (Streptomyces griseus) reduced spore germination rate of V. nashicola to 88.8%; moreover, formation of appressoria or intracellular accumulation was not observed. Application of Topsid (Paenibacillus polymyxa) reduced spore germination rates in V. nashicola and G. asiaticum to 71.0% and 90.6%, respectively, and the formation of appressoria was not observed. Studying the antifungal activity of agro-materials because of cumulative applications under the field conditions is necessary, owing to their contact fungicidal effect and the induced-resistance by microbial metabolites and natural compounds.
Candida biofilms are self-organized microbial communities growing on the surfaces of host tissues and medical devices. These biofilms have been displaying increasing resistance against conventional antifungal agents. The roots of Scutellaria baicalensis have been widely used for medicinal purpose throughout East Asia. The aim of the present study was to evaluate the effect of S. baicalensis aqueous extract upon the preformed biofilms of 10 clinical C. albicans isolates, and assess the mechanism of the antibiofilm activity. Its effect on preformed biofilm was judged using an XTT reduction assay and the metabolic activity of all tested strains were reduced ($57.7{\pm}17.3$%) at MIC values. The S. baicalenis extract inhibited (1, 3)-${\beta}$-D-glucan synthase activity. The effect of S. baicalensis on the morphology of C. albicans was related to the changes in growth caused by inhibiting glucan synthesis; most cells were round and swollen, and cell walls were densely stained or ruptured. The anticandidal activity was fungicidal, and the extract also arrested C. albicans cells at $G_0/G_1$. The data suggest that S. baicalensis has multiple fatal effects on target fungi, which ultimately result in cell wall disruption and killing by inhibiting (1, 3)-${\beta}$-D-glucan synthesis. Therefore, S. baicalensis holds great promise for use in treating and eliminating biofilm-associated Candida infections.
Park, Seong-Woo;Kang, Beom-Kwan;Kim, Hong-Sik;Woo, Sun-Hee;Kim, Heung-Tae
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.11
no.1
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pp.18-26
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2007
Fungicidal screening was performed to control soybean black root rot caused by Calonectria ilicicola through in vitro and greenhouse assays. In in vitro assay, 25 fungicides were assessed by an agar dilution method and a 96-well microtiter plate method. While protective fungicides including dithianon, dichlofluanid, mancozeb, and captan showed a very low activity against the mycelial growth C. ilicicola SC03-15 in the agar dilution method, they displayed potent inhibitory activity against spore germination in a 96-well microtiter plate method with $EC_{50}$ values of 4.65, 0.61, 4.64, and $0.29{\mu}g\;mL^{-1}$, respectively. Ergosterol biosynthesis-inhibiting (EBI) fungicides showed different antifungal activity against mycelial growth and spore germination according to molecules. Difenconazole displayed higher antifungal activity against spore germination rather than mycelial growth, and prochloraz inhibited potently both mycelial growth and spore germination with EC50 values less than $1.8{\mu}g\;ml^{-1}$. In contrast, the other EBI fungicides inhibited more highly mycelial growth than spore germination. Carbendazim+diethofencarb and dazomet also inhibited both mycelial growth and spore germination of C. ilicicola SC03-15 at very low concentrations. In greenhouse assay, carbendazim+diethofencarb effectively controlled a soybean black root rot by drenching 2 days before or after inoculation. In addition, tebuconazole showed potent curative activity against soybean black root rot.
In the continued research on natural fungicides for control of plant diseases by using plant-derived products, we found that Spatholobus suberectus Dunn had a strong fungicidal activity against several plant pathogens. S. suberectus (1 kg) was extracted with 80% aqueous MeOH and then the concentrated extract was partitioned with n-hexane, EtOAc, n-BuOH and $H_2O$ successively. The four layers were tested their disease contron efficacies against 6 plant diseases such as rice blast (RCB), rice sheath blight (RSB), tomato grey mold (TGM), tomato late blight (TLB), wheat leaf rust (WLR), and barley powdery mildew (BPM). The EtOAc fraction was highly active showing over 80% control against RCB, TGM, TLB, and BPM. By using silica gel chromatography, preparative TLC and HPLC, six compounds that were expected to have antifungal activity were separated. Their chemical structures were identified as ethanone, hydroxytyrosol, epicatechin, procyanidin B2, dimethoxy daizein and formononetin by ESI-MS, $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, and 2D-NMR spectroscopic analyses. The chemicals except epicatechin were first reported in S. suberectus. Study on in vitro and in vivo antifungal activities of the isolated compounds is in progress.
Fludioxonil is derived from the antifungal compound pyrrolnitrin produced by Pseudomonas pyrrocinia and classified as a reduced-risk fungicide by the US EPA. The efficacy of fludioxonil for the control of lettuce gray mold caused by Botrytis cinerea was evaluated under several conditions such as growth stages of host, inoculum concentrations, and amounts of potato dextrose broth (PDB) included in spore suspension of B. cinerea. At 4-leaf stage of lettuce plants, fludioxonil applied at 2 ${\mu}g$/ml was more effective for the control of gray mold than at 5- and 6-leaf stages. However, fludioxonil at more than 10 ${\mu}g$/ml provided similar control activity in all growth stages of lettuce tested. The fungicide (10 and 50 ${\mu}g$/ml) also gave excellent control of gray mold on lettuce seedlings inoculated with spore suspensions of B. cinerea ($2.5{\times}10^5$ to $2{\times}10^6$ spores/ml). But, control efficacy of fludioxonil (2 ${\mu}g$/ml) was negatively correlated with inoculum concentration. Addition of PDB in spore suspension of B. cinerea resulted in higher disease severity than non-treated control. By inoculating spore suspension including 0.5% PDB, the fungicide gave the most control activity on the disease, followed by 1% and 2% PDB. The results suggest that fludioxonil has potential to control gray mold of lettuce, but the fungicide at a concentration having moderate activity may represent low control efficacy on the disease under some conditions.
This study was conducted from 1991 to 1993 to develop a fungicidal spray program for the apples exportable to the United States of America, in which quarantine and pesticide residue in agricultural products are strictly regulated. In 1991, 2 spray schedules were applied to an orchard, in one of which the 7 fungicides registered for apple both in Korea and U.S. were used, and in the other of which the Bordeaux mixture for which the tolerance was exempted in U.S. was used 2 times along with those 7 fungicides. The apple white rot and fruit infection by Alternaria mali were not effectively controlled by the 7 fungicides alone; however, the control efficacy was raised by adding the Bordeaux mixture to the spray schedule. In 1992, 4 spray schedules were applied in which the kinds of fungicides and spray intervals were different one another. The results suggested that an effective spray program can be developed by adopting the Bordeaux mixture for 3 times or adopting the imminoctadine-triacetate which has not tolerance level in U.S. for same times in the vulnerable stage of apple white rot and alternaria blotch. In spite of the high efficacies against major apple diseases, the Bordeaux mixture could not be recommended to the apple growers due to the various defects such as restrictions in compatibility with insecticides and acaricides, troublesomeness in preparation and spray, especially the harmful effect on the finish of Fuji apples. In 1993, a spray program adopting 3 times of imminoctadine-triacetate during the growing season of apple was developed, which not only can effectively control the major apple diseases but also avoid the pesticide residue problems if it was sprayed 2 or 3 times after bagging. On the basis of the 3 years results, a basic fungicide spray program was formulated in which 1~3 times of imminoctadine-triacetate and 1~2 times of bitertanol were adopted in addition of the 7 common fungicides registered in both countries. In the results of application of the spray schedule to the actual farming in the 4 areas of Kyungpook Province in 1994, no noticeable defects were detected at the first year trial. However, this spray program will be continuously evaluated and modified to obtain better control efficacies against major apple diseases.
Rust causes significant losses in the yield and quality of various crops. The development of new effective and environmentally benign agents against the pathogen is of great interest. In the course of searching a natural antifungal compound from medicinal plants, we found that the methanol extract of Angelica gigas roots had a potent control efficacy against wheat leaf rust (WLR) caused by Puccinia recondita. The antifungal substance was isolated from the methanol extract by silica gel column chromatography, alumina column chromatography and $C_{18}$ preparative HPLC. It was identified as decursinol angelate by EI-MS and $^1H$-NMR data. In in vivo test, decursinol angelate effectively suppressed the development of WLR and red pepper anthracnose (RPA) among the 6 plant diseases tested. In addition, the wettable powder-type formulation of ethyl acetate extract of A. gigas roots significantly suppressed the development of WLR. The crude extract containing decursinol angelate and the chemical appear to be a potential candidate for control of WLR. In addition, this is the first report on the in vivo antifungal activity of decursinol angelate against WLR as well as RPA.
Smoke rods were prepared for 2 insecticides and 5 fungicides using powdered rice chaff as a combustible carrier, and their burning characteristics were investigated. The distribution of active ingredient was investigated after the application of the granular smoke generator containing fenarimol in the connected vinyl plastic house growing cucumber. The protective effects of fungicide smoke generators were evaluated against cucumber gray mold (Botrytis cinerea) and tomato late blight (Phytophthora infestans), and compared with commercial wettable powders. Smoke rods containing powdered rice chaff showed high smoking rates of AI that were higher than commercial smoke pellets. The deposition of fenarimol on the ground of vinyl plastic house was $26.2{\pm}7.7\;ng/cm^2$ when averaged from 9 sites, and application uniformity was found. Also, the protective effects of 5 fungicidal smoke rods against plant diseases were so similar to the commercial wettable powders with no phytotoxicity that smoke rod formulations containing rice chaff as a combustible carrier could be used as an effective formulation for pesticides.
The antifungal activity of polygodial, which was isolated from Polygonum hydropiper used as a hot spice in Japan, was investigated through measuring its MICs and against food-contaminants including 4 strains of Saccharomyces cerevisiae, 3 strains of Zygosaccharomyces species, and 5 strains of Aspergillus species. All yeast-like fungi exhibited strong antifungal susceptivilities with MICs and MFCs below 3.13${\mu}g$/ml. Strains of Aspergillu species showed moderate with MIC of 25-50${\mu}g$/ml and MFC of 50-100${\mu}g$/ml. However these strains to sorbic acid, as already known, revealed very weak with MICs of 200-800${\mu}g$/ml and MFCs above 1600${\mu}g$/ml. In addition, effects of various pHs and temperatures on the antifungal activity of polygodial were tested against S. cerevisiae. At $4^{\circ}C$, the fungicidal activity of polygodial gradually increased with incubation time and reached the maximum(MFC of 3. 13${\mu}g$/ml) in 5 hours. At temperatures in the range of 30-$45^{\circ}C$, the activity of polygodial increased in proportion to temperature rise and in particular at $45^{\circ}C$ was possible with the concentration of 0.1${\mu}g$/ml. mOn the other hand, medium pH was also identified to affect the antifungal activity of polygodial. Namely, compared to neutral (pH7), acidic(pH 3) and basic(pH 9) medium synergized its activity (MIC and MFC) to 8- and 2- fold, respectively.
Oudemansiella mucida, an edible and medicinal mushrooms belonging to Tricholomataceae of Basidiomycota, has been known to produce antifungal substances to inhibit the mycelial growth and spore germination of the plant pathogenic fungi. To produce good amount of antifungal substances from culture media, the optimal culture conditions of O. mucida were investigated. The most favorable conditions for the mycelial growth were $25^{\circ}C$ and pH 5 in potato dextrose agar. The most favorable carbon and nitrogen sources promoting mycelial growth were maltose and calcium nitrate, respectively. The optimum C/N ratio was about 20 : 1 in case that 3% glucose was supplemented to the basal medium as a carbon source. The optimal mycelial growth of O. mucida was found in the Hennerberg medium. The crude extract from submerged culture of potato dextrose broth exhibited inhibition of mycelial growth of Colletotrichum acutatum, Botrytis cinerea and Pyricularia oryzae but, fungicidal activity is not good enough to compared with commercially available fungicides tested. Therefore, the antifungal substances extracted from submerged culture of O. mucida might have a potential to be used for biocontrol agent of fungal diseases of plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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