Choi, Eun jung;Ko, Suk kyung;Jo, Sung ae;Park, Young ae;Jung, Sam ju;Hong, Sung cho;Cho, Seok ju;Jung, Ji hyun;Park, Ju sung
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.53
no.3
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pp.162-169
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2022
This study investigated the mycotoxins (aflatoxin B1, B2, G1, G2, fumonisin B1, B2, ochratoxin A and zearalenone) contained in edible and medicinal plants in Seoul Yangnyeong market during 2020-2021. We analyzed contamination of mycotoxins using LC-MS/MS and evaluated risk assessment. The method was validated by assessing matrix effects, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification(LOQ) and recovery. Matrix-matched standard calibration was used for calibration curves showed good linearity (r2>0.999). The LOD, LOQ and recovery were 0.01-0.23 ㎍/kg, 0.04-0.71 ㎍/kg and 75.5-117.9% respectively. Mycotoxins were detected in 22 of 171 samples; aflatoxin B1 (6.66 ㎍/kg), fumonisin (7.54-64.68 ㎍/kg), ochratoxin A (4.21-10.56 ㎍/kg) and zearalenone (7.31-60.76 ㎍/kg). In the risk assessment, the MOE (Margine of Exposure) of aflatoxin B1 and ochratoxin A were in the range of 1.48×103-2.36×105. No items exceeded 100% in %TDI (Tolerable Daily Intake) of fumonisin (B1+B2) and zearalenone.
Gene disruption by homologous recombination is widely used to investigate and analyze the function of genes in Fusarium fujikuroi, a fungus that causes bakanae disease and root rot symptoms in rice. To generate gene deletion constructs, the use of conventional cloning methods, which rely on restriction enzymes and ligases, has had limited success due to a lack of unique restriction enzyme sites. Although strategies that avoid the use of restriction enzymes have been employed to overcome this issue, these methods require complicated PCR steps or are frequently inefficient. Here, we introduce a cloning system that utilizes multi-fragment assembly by In-Fusion to generate a gene disruption construct. This method utilizes DNA fragment fusion and requires only one PCR step and one reaction for construction. Using this strategy, a gene disruption construct for Fusarium cyclin C1 (FCC1), which is associated with fumonisin B1 bio-synthesis, was successfully created and used for fungal transformation. In vivo and in vitro experiments using confirmed fcc1 mutants suggest that fumonisin production is closely related to disease symptoms exhibited by F. fujikuroi strain B14. Taken together, this multi-fragment assembly method represents a simpler and a more convenient process for targeted gene disruption in fungi.
FBs, secondary metabolites of several species of Fusaria, especially Fusarium moniliforme and F proliferatum, are commonly contaminated in com and other food grains throughout the world. Only recently identified, these mycotoxins have been associated field outbreaks of ELEM in horses and PPE in pigs. Currently, naturally or experimentally induced FB toxicosis has been studied in poultry, ruminants and rabbits. Poultry fed FB showed decreased growth rate, performance, and immune competence, as well as embryopathic, and embryocidal effects, and ricktes. Ruminants seem to be relatively less susceptible to FBs than other doestic animal. FB toxicosis reveals that liver is a target organ in all species, although other organs are affected in a species specific manner. Recently, the main target organs for $FB_1$ toxicity in rabbits was shown to be the kidney. Even low concentrations of FBs are likely to be a problem for animal health. A current study being conducted showed that feed containing low level of $FB_1$ reduces the ability of pulmonary intravascular macrophages in pig to clear blood-borne particles which would increase the susceptibility of animals to bacterial disease. The mechanism of FB toxicity remains unknown, but may be related to altered sphingolipid biosynthesis by inhibiting sphinganine N-acyltransferase. Elevations of serum and tissue SA:SO ratio have been observed in horse, pig, chicken, turkey, and rabbit, which could could serve as in effective biomarker for consumption of FB-containing feeds. There is limited information detailing dose-effect relationships either from field cases or in the laboratory. More research on the factors, including the prevalence and tolerance levels of FBs in feedstuffs that cause domestic animal disease associated with FBs, is urgently needed.
Yang, Yongshik;Lee, Hyang Hee;Kim, Ae Gyeong;Ryu, Keun Young;Choi, Su Yeon;Seo, Doo Ri;Seo, Kye Won;Cho, Bae Sik
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.34
no.2
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pp.205-211
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2019
This study surveyed mycotoxin contamination in grains and grain products, which were purchased from supermarkets and traditional markets from October 2017 to September 2018 in Gwangju (Metropolitan City). A total of 127 samples including adlay, sorghum, millet, rice, oats, barley, buckwheat, corn as grains, and rice flour, buckwheat flour, roasted barley and corn, as grain products were surveyed. The tested mycotoxins were aflatoxin ($AFB_1$, $AFB_2$, $AFG_1$, $AFG_2$), fumonisin ($FUB_1$, $FUB_2$), ochratoxin A (OTA), and zearalenone (ZON). Mycotoxins were analyzed simultaneously with a UPLC-tandem mass spectrometry method. Fumonisin ($B_1+B_2$) was detected at the range of $4.8{\sim}738.5{\mu}g/kg$ in 35 samples and zearalenone at $8.4{\sim}507.6{\mu}g/kg$ in 20 samples, respectively. No other mycotoxins were detected. Risk assessment was evaluated by using estimated daily intake (EDI) and provisional maximum tolerable daily intake (PMTDI) in accordance with the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA). When the hazard index (HI) was expressed as $(EDI/PMTDI){\times}100$, the HI (%) showed in the range of 0.0019~1.9526%. Based on these results, mycotoxin concentrations in the grains and grain products were within safe levels.
F. moniliforme MRC 826, a common fungal contaminant of com, has been known to produce a group of mycotoxins, the fumonisins. By thin layer chromatography, fumonisin $B_{1}$ was detected in the F. moniliforme MRC 826 com culture material(CM) extracts. This study was performed to compare the toxicity and carcinogenicity of F. moniliforme MRC 826 CM with those of aflatoxin $B_1(AFB_1)$ in rats. The toxicity was tested over a period of 7 days in ten female Sprague-Dawley (SD) rats. Treatment group were fed a 1 : 1 mixture(wt/wt) of ground CM and basal diet in powder form, while other negative control group were given basal diet alone. The principal pathological changes in rats treated with 50% CM were hepatocellular hydropic degeneration and renal tubular necrosis. The cancer-promoting activity of CM was evaluated in the rat liver diethylnitrosamine-two thirds partial hepatectomy(DEN-PH) model for carcinogenesis. 70 male SO rats(ca. 170 g) were randomized into 5 groups. Group I served as the positive controls and received the basal diet containing 2 ppm $AFB_{1}$ group 2 received 5% CM, group 3 received 2.5% CM, group 4 received 5% normal com and group 5 received 2.5% normal com. 5% treated group showed cancer promoting activity in rat liver using DEN as initiator and the induction of glutathione S-transferase placental form positive foci as an end point after 6 weeks of promotion.
Kim, Soohee;Kim, Kwang-Nam;Kim, Hyobi;Song, Jae-Young;Park, Sung-Won
Korean Journal of Poultry Science
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v.43
no.2
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pp.111-118
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2016
Mycotoxins are secondary metabolites produced by molds, such as Aspergillus, Fusarium and Penicillium, that have adverse effects on animals and humans. Aflatoxin, ochratoxin, zearalenone, fumonisin and deoxynivalenol are the mycotoxins of greatest agro-economic importance and cause acute disease called mycotoxicoses. Mycotoxicosis in poultry birds results in decreased meat/egg production, immunosuppressant, and hepatotoxicosis. Some of toxins or their metabolites may be retained in animal or human tissues and induce health problems. This study was designed to develop a sensitive liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the simultaneous detection and quantification of mycotoxins, such as aflatoxin $B_1$, aflatoxin $M_1$, ochratoxin A, zearalenone, fumonisin B and deoxynivalenol, in chicken liver and kidney tissues. The mycotoxins were extracted and purified using modified QUECHERS methods, separated by LC and detected by an electrospray ionisation interface (ESI) and tandem MS. Good precision and linearity were observed for most of six mycotoxins. The recovery test for each mycotoxin in liver and kidney tissues mostly indicated good average recovery rates between 80.94% and 98.10% and the coefficient of variation mostly under 13.78%, except for aflatoxin $M_1$ and fumonisin $B_1$. The limit of detection (LOD) for six mycotoxins was $7.6{\sim}145.79{\mu}g/kg$ in liver tissues and $6.07{\sim}197.20{\mu}g/kg$ in kidney tissues. The quantification limits (LOQ) for 6 mycotoxins were in the range $23.04{\sim}441.78{\mu}g/kg$ in liver tissues and $18.40{\sim}597.59{\mu}g/kg$ in kidney tissues, respectively. The developed multi-mycotoxin method in this study permits simultaneous, simple, and rapid determination of several co-existing mycotoxins in chicken liver and kidney tissues.
For this study, we surveyed concentrations of 8 mycotoxins (aflatoxin B1, B2, G1, G2, ochratoxin A, fumonisin B1, B2 and zearalenone) in agricultural products used for food and medicine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and conducted a risk assessment. Samples were collected at the Yangnyeong Market in Seoul, Korea, between January and November 2019. Mycotoxins were extracted from these samples by adding 0.1% formic acid in 50% acetonitrile and cleaned up by using an ISOLUTE Myco cartridge. The method was validated by assessing its matrix effects, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), recovery and precision using four representative matrices. Matrix-matched standard calibration was used for quantification and the calibration curves of all analytes showed good linearity (r2>0.9999). LODs and LOQs were in the range of 0.02-0.11 ㎍/kg and 0.06-0.26 ㎍/kg, respectively. Sample recoveries were from 81.2 to 118.7% and relative standard deviations lower than 8.90%. The method developed in this study was applied to analyze a total of 187 samples, and aflatoxin B1 was detected at the range of 1.18-7.29 ㎍/kg (below the maximum allowable limit set by the Ministry of Food and Drug Safety, MFDS), whereas aflatoxin B2, G1 and G2 were not detected. Mycotoxins that are not regulated presently in Korea were also detected: fumonisin (0.84-14.25 ㎍/kg), ochratoxin A (0.76-17.42 ㎍/kg), and zearalenone (1.73-15.96 ㎍/kg). Risk assessment was evaluated by using estimated daily intake (EDI) and specific guideline values. These results indicate that the overall exposure level of Koreans to mycotoxins due to the intake of agricultural products used for food and medicine is unlikely to be a major risk factor for their health.
Choi, Yoon Hwa;Ahn, Woo Seok;Kim, Ji Eun;Kim, Doo Hwan
Korean Journal of Veterinary Service
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v.45
no.3
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pp.237-242
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2022
The simultaneous analysis of mycotoxins using LC-MS/MS, a food official analysis method, was applied with compound feed for pets with high consumer preferences. In this study, the linearity of all calibration curves showed good linearity of 0.99 or more. and both the accuracy (recovery rate) and precision (repeatability) criteria of the concentration range for each mycotoxin in the National Agricultural Products Quality Management Service's Validation and Verification Guidelines were met. And as a result of analyzing FAPAS QCM in the same way, it was assesed that the z-scores of Aflatoxin B1, Ochratoxin A, Zearalenone, and Fumonisin B1, were within ±2 range. This study showed that the application of the food official analysis method to compound feed for pets is suitable.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.31
no.4
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pp.451-462
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2011
The purpose of this study was to investigate fungi and mycotoxin contamination of the rice straw bale silage in Korean. It was tested the 33 samples of rice straw round bale silage with various condition which fed cattle in the farm. The level of fungal contamination was $2.1{\times}10^6\;cfu\;g^{-1}$ in the average and $9.2{\times}10^8\;cfu\;g^{-1}$ in the maximum. The fungal contamination was detected in the all of normal samples which good condition of rice straw bale silage. When the fungi was isolate and identify, it was found 28 species and mycotoxin producing fungi were 8 species as following as Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Fusarium culmorum, Fusarium verticillioides, Penicillium carneum, Penicillium paneum, Penicillium roqueforti, Penicillium viridicatum. Specially, Penicillium paneum was found 42% of samples and Aspergillus sp. (A. flavus, A. fumigatus) are 21% of samples. In case of mycotoxin contamination, the 42% of samples are detected more than one kind of mycotoxin. Some samples are contaminated three kinds of mycotoxin. This study was not found aflatoxin ($B_1$, $B_2$, $G_1$, $G_2$) and fumonisin ($B_1$, $B_2$), but were detected the contamination of ochratoxin A (1.0~5.8 ug/kg), deoxynivalenol (DON, 156.0~776.7 ug/kg) and zearalenone (ZON, 38.0~750.0 ug/kg). Therefore, the above results show that rice straw round bale silage expose on hazard factors as mycotoxigenic fungi and mycotoxin contamination, and than need more research about mycotoxin in animal feed to protect animal and human healthy.
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