Ya-Jen Chiu;Yu-Shan Teng;Chiung-Mei Chen;Ying-Chieh Sun;Hsiu Mei Hsieh-Li;Kuo-Hsuan Chang;Guey-Jen Lee-Chen
Biomolecules & Therapeutics
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제31권3호
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pp.285-297
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2023
Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease with progressive memory loss and the cognitive decline. AD is mainly caused by abnormal accumulation of misfolded amyloid β (Aβ), which leads to neurodegeneration via a number of possible mechanisms such as down-regulation of brain-derived neurotrophic factor-tropomyosin-related kinase B (BDNF-TRKB) signaling pathway. 7,8-Dihydroxyflavone (7,8-DHF), a TRKB agonist, has demonstrated potential to enhance BDNF-TRKB pathway in various neurodegenerative diseases. To expand the capacity of flavones as TRKB agonists, two natural flavones quercetin and apigenin, were evaluated. With tryptophan fluorescence quenching assay, we illustrated the direct interaction between quercetin/apigenin and TRKB extracellular domain. Employing Aβ folding reporter SH-SY5Y cells, we showed that quercetin and apigenin reduced Aβ-aggregation, oxidative stress, caspase-1 and acetylcholinesterase activities, as well as improved the neurite outgrowth. Treatments with quercetin and apigenin increased TRKB Tyr516 and Tyr817 and downstream cAMP-response-element binding protein (CREB) Ser133 to activate transcription of BDNF and BCL2 apoptosis regulator (BCL2), as well as reduced the expression of pro-apoptotic BCL2 associated X protein (BAX). Knockdown of TRKB counteracted the improvement of neurite outgrowth by quercetin and apigenin. Our results demonstrate that quercetin and apigenin are to work likely as a direct agonist on TRKB for their neuroprotective action, strengthening the therapeutic potential of quercetin and apigenin in treating AD.
본 연구는 일부 시판 구강양치액의 화학적 특성을 조사하고, 구강양치액이 치아에 무기질 소실에 영향을 미치는지 확인하고자 하였다. 국내 3대 대형마트에서 공통으로 시판되는 구강양치액 5개 제품을 선정하였다(페리오토탈7 스트롱후레쉬[PS], 가그린 오리지널[GO], 가그린 제로[GZ], 리스테린 시트러스[LC], 리스테린 쿨민트[LM]). 구강양치액의 구성 성분과 pH와 적정산도를 조사하였다. 각 구강양치액 군별로 6개의 우치시편을 제작하였다. 각 구강양치액 30ml에 우치 시편 6개씩을 1분, 30분, 90분, 120분간 침적하였으며, 이때 $36.5^{\circ}C$ 교반 배양기에 위치하였다. 이후 치아의 무기질 소실 정도는 QLF-D를 이용하여 정상치아 대비구강양치액 노출 부위의 무기질 소실 정도(${\Delta}F$)를 분석하였다. 구강양치액군 간의 ${\Delta}F$의 차이를 Kruskal-Wallis H검정을 시행하여 알아보았다(${\alpha}=0.05$). 구강양치액의 성분은 리스테린 제품과 그 외 제품별로 차이가 있었으며, pH는 4.09~6.75의 범위를 보였다. 적정산도는 PS 제품이 평균 0.63 ml로 가장 적었으며 LM은 9.25 ml로 조사 제품 중 가장 높은 적정산도 값을 보였다. 리스테린 제품, LC와 LM에 90분 이상 치아 시편을 침적하였을 때 매우 적은 무기질 소실이 확인되었으나 통계적으로는 무기질 소실이 일어나지 않은 군과 유의한 차이가 확인되지 않았다(p>0.05). 결론적으로 시판 구강양치액 5종 모두 치아의 법랑질에는 위해가 없음을 확인하였다.
Purpose: Recently, totally laparoscopic gastrectomy has been gradually accepted by surgeons worldwide for gastric cancer treatment. Complete dissection of the lymph nodes and the establishment of the surgical margin are the most important considerations for curative gastric cancer surgery. Previous studies have demonstrated that indocyanine green (ICG)-traced laparoscopic gastrectomy significantly improves the completeness of lymph node dissection. However, it remains difficult to identify the tumor location intraoperatively for gastric cancers that are staged ≤T3. Here, we investigated the feasibility of ICG fluorescence for lymph node mapping and tumor localization during totally laparoscopic distal gastrectomy. Materials and Methods: Preoperative and perioperative data from consecutive patients with gastric cancer who underwent a totally laparoscopic distal gastrectomy were collected and analyzed. The patients were categorized into the ICG (n=61) or the non-ICG (n=75) group based on whether preoperative endoscopic mucosal ICG injection was performed. Results: The ICG group had a shorter operation time and less intraoperative blood loss. Moreover, significantly more lymph nodes were harvested in the ICG group than the non-ICG group. No pathologically positive margin was found and there was no significant difference in either the proximal or distal surgical margins between the 2 groups. Conclusions: Near-infrared fluorescence imaging with ICG can be successfully used in totally laparoscopic distal gastrectomy, and it contributes to both the completeness of D2 lymph node dissection and confirmation of the gastric transection line. Well-designed prospective randomized studies are needed in the future to fully validate our findings.
고선량 감마선 조사에 의한 계란의 저장 중 품질 변화를 측정하기 위해 신선란을 $^{60}Co$를 이용하여 조사선량을 0, 1, 5, 10, 30 kGy로 하여 조사한 후 30일간 저장 실험을 수행하였다. 조사된 계란의 품질 변화는 난황계수, 난황 색깔, 난백 pH, 난백 점도, 계란 중량, 난백 단백질의 SDS-PAGE 패턴, circular dichroism(CD), fluorescence spectroscopy 등을 측정함으로써 살펴보았다. 저장기간 중 난황계수는 감마선 조사된 계란과 대조구 모두 감소하는 경향을 보였는데 선량이 증가할수록 난황계수는 감소하였고 10 kGy와 30 kGy 등 고선량으로 조사된 계란에서 난황계수가 일시적으로 증가하는 현상을 보였다. 난황 색깔은 선량이 증가함에 따라 밝은 노란색을 나타냈으나 저장 기간 동안 큰 차이는 나타나지 않았다. 난백 점도는 선량이 증가할수록 감소하였고 저장 중 점도가 감소하는 현상을 보였으며 조사된 계란의 난백 pH가 대조구에 비해 높았고 저장 중 pH는 증가를 보였다. 저장 중 난중 감소율은 증가하였고 선량별 뚜렷한 차이는 보이지 않았다. 난백 단백질의 SDS-PAGE 패턴은 조사 선량이 증가할수록 단백질의 변화가 켰는데 10 kGy 이상 고선량 조사에서는 저분자화 뿐만 아니라 고분자화 패턴도 보였다. CD와 fluorescence spectroscopy 결과 또한 감마선조사에 의한 단백질의 2차, 3차구조 변화를 보였다. 본 연구의 결과는 계란의 감마선조사에 있어 품질 유지를 위해서는 선량 범위에 있어 보다 신중을 기해야 한다는 것을 시사한다.
T-DNA가 표지된 집단에서 AlaAT 유전자가 깨어진 돌연변이체(alaat)를 분리하고, AlaAt1 특이 프라이머를 이용하여 유전자형을 결정하였다. Alaat의 표현형은 대조구와 비교해서 생장의 감소를 보였고, 종자 역시 작고 생산성의 감소를 보였다. 돌연변이체의 AlaAT 활성은 거의 검출되지 않았다. 고염 스트레스 하에서 alaat의 반응을 엽록소 형광과 항산화 효소들의 활성 및 RT-PCR을 이용하여 대조구와 비교하였다. 고염, 건조 및 저온과 같은 모든 비생물적 스트레스에 대한 Fv/Fm은 대조구와 alaat 둘 다 감소를 보였으며, 비생물적 스트레스에 대한 엽록소 형광은 거의 유사하였다. 항산화 효소인 peroxidase (POX)의 활성은 고염 스트레스에 의해 대조구는 증가하나 alaat에서는 오히려 감소하였다. RT-PCR에 의한 cAPX, POX 및 AlaAT mRNA의 수준을 분석한 결과, 효소 활성과 마찬가지로 AlaAt mRNA는 alaat에서 나타나지 않았고, POX2 mRNA는 대조구는 약간의 증가를 보이나 alaat는 거의 검출할 수 없었다. cAPX mRNA는 대조구와 alaat 모두 고염 스트레스에 의해 크게 증가하였다. 이 같은 결과는 AlaAT 유전자 기능의 상실은 염 스트레스 하에서 벼 식물의 생장에 대해 광합성능 보다는 항산화 효소, 특히 POX 활성 및 합성을 변화시킬 수 있음을 제안한다.
이번 연구의 목적은 pH, 적정산도, 형광소실도(△F)를 이용하여 혼합주의 부식위험성과 부식능에 대해 평가하고자 하였다. 실험군은 다음과 같이 분류하였다: 소주, 깔라만시+소주, 요구르트+소주, 콜라+소주, 에너지드링크+소주. 혼합주는 소주와 음료수를 7:3의 비율로 혼합하였다. pH와 적정산도(TA5.5, TA7.0; 음료의 pH를 5.5와 7.0까지 끌어 올리는데 필요한 1M NaOH의 양)는 교반하면서 pH미터기를 이용하여 측정하였다. 혼합주의 부식능은 우치를 1, 2, 4, 6시간 동안 침적하였다가 각 시간마다 꺼내어 quantitative light-induced fluorescence (QLF-D)를 이용하여 촬영, 분석하였다. 연구 결과, 혼합주는 평균 pH는 3.17 ± 0.50, 소주의 pH는 8.6 ± 0.01를 나타내었다. TA5.5와 TA7.0는 각각 0.5~18, 0.5~23.5의 분포를 나타내었다. 요구르트 혼합주를 제외한 나머지 혼합주의 △F는 시간이 지남에 따라 증가하였으며, 요구르트 혼합주에서는 부식이 나타나지 않았다. 결론적으로, 깔라만시 혼합주가 가장 강한 산성과 부식능을 보였으며, 요구르트가 가장 약한 부식능을 나타냈다. 혼합주는 치아 법랑질에 강한 부식위험성을 가지고 있으므로, 이에 대한 주의와 교육이 필요할 것으로 사료된다.
Czochralski법에 의해 alexandrite단길정을 육성 하였다. 결함과 인상속도, 회전속도, Beo의 순도 및 BeO와 Cr3+/Al3+ 치환비의 증발 손실보상 등 결정육성 요소의 관계를 규명하였다. 결과로서 1) 결정육성 원료로서 BeO의 순도는 99.99f) 이상의 고순도이어야 하고, 2) 증발손실 보상은 고품위의 결정을 육성하 기 위한 필수조건으로서 인상속도와 Cr3+/Al3+ 치환 비에 의존되며, 3) 적당한 인상 및 회전속도는 0. 5 ∼1.0mm/hr과 20∼25rpm으로 나타났다. 육성된 결정 은 (001) 방향으로 성장되었으며, 편광현미경으로 여러가지 형태의 결함을 관찰하였고 그 제거 방법을 논의 하였다. 또한 실온에서 흡수 및 형광방출 스펙트럼을 측정·비교하였다.
Objectives : Although herbal medicines containing flavonoids have been reported to exert anti-tumor activities, it has not been explored whether Hwang-Jeong (Polygonati sibirici Rhizoma, PsR) exerts anti-tumor activity in human glioma. The present study was therefore undertaken to examine the effect of PsR on cell viability and to determine its underlying mechanism in A172 human glioma cells. Methods : Cell viability was estimated by MTT assay. Reactive oxygen species generation and mitochondrial membrane potential were measured by the fluorescence dyes. The phosphorylation of kinases was evaluated by western blot analysis and caspase activity was estimated using colorimetric assay kit. Results : PsR resulted in loss of cell viability in a dose- and time-dependent manner. PsR did not increase reactive oxygen species (ROS) generation and the PsR-induced cell death was also not affected by antioxidants, suggesting that ROS generation is not involved in loss of cell viability. Western blot analysis showed that PsR treatment caused rapid reduction in phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) without changes in p38 and Jun-NH2-terminal kinase (JNK). U0126, an inhibitor of ERK, increased the PsR-induced cell death, but inhibitors of p38 and JNK did not affect the cell death. PsR induced depolarization of mitochondrial membrane potential. Caspase activity was not stimulated by PsR and caspase inhibitors did not prevent the PsR-induced cell death. Conclusion : Taken together, these findings suggest that PsR results in human glioma cell death through caspaseindependent mechanisms involving down-regulation of ERK.
GAM-1 and GAM-2, two themostable glucoamylases from Aspergillus niger B-30, possess different molecular masses, glycosylation, and thermal stability. In the present study, the effects of additives on the thermal inactivation of GAM-1 and GAM-2 were investigated. The half-lives of GAM-1 and GAM-2 at 70℃ were 45 and 216 min, respectively. Data obtained from fluorescence spectroscopy, circular dichroism spectroscopy, UV absorption spectroscopy, and dynamic light scattering demonstrated that during the thermal inactivation progress, combined with the loss of the helical structure and a majority of the tertiary structure, tryptophan residues were partially exposed and further led to glucoamylases aggregating. The thermal stability of GAM-1 and GAM-2 was largely improved in the presence of sorbitol and trehalose. Results from spectroscopy and Native-PAGE confirmed that sorbitol and trehalose maintained the native state of glucoamylases and prevented their thermal aggregation. The loss of hydrophobic bonding and helical structure was responsible for the decrease of glucoamylase activity. Additionally, sorbitol and trehalose significantly increased the substrate affinity and catalytic efficiency of the two glucoamylases. Our results display an insight into the thermal inactivation of glucoamylases and provide an important base for industrial applications of the thermally stable glucoamylases.
This study was undertaken to investigate whether honokiol could enhance the pentobarbitalinduced sleeping behaviors through $\gamma$-aminobutyric acid (GABA) receptor $Cl^-$ channel activation. Thirty minutes after the oral administration of honokiol, mice were received sodium pentobarbital (42 mg/kg, i.p.). The time elapsed from pentobarbital injection to the loss of the righting reflex was taken as sleeping latency. The time elapsed between the loss and voluntary recovery of the righting reflex was considered as the total sleeping time. Western blot technique and $Cl^-$ sensitive fluorescence probe were used to detect the expression of $GABA_A$ receptor subunits and $Cl^-$ influx in the primary cultured cerebellar granule cells. Honokiol (0.1 and 0.2 mg/kg) prolonged the sleeping time induced by pentobarbital (42 mg/kg) in a dosage-dependent manner. Honokiol (20 and 50 ${\mu}M$) increased $Cl^-$ influx in primary cultured cerebellar granule cells, and selectively increased the $GABA_A$ receptor $\alpha$-subunit expression, but had no effect on the abundance of $\beta$ or $\gamma$-subunits. Chronic treatment with 20 ${\mu}M$ honokiol in primary cultured cerebellar neurons did not affect the abundance of GAD65/67. The results suggested that honokiol could potentiate pentobarbital-induced sleeping through $GABA_A$ receptor $Cl^-$ channel activation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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