To characterize cytosolic $Ca^{2+}$ fluctuations under metabolic inhibition, rat ventricular myocytes were exposed to $200{\mu}M$ 2,4-dinitrophenol (DNP), and mitochondrial $Ca^{2+}$, mitochondrial membrane potential (${\Delta}{\Psi}m$), and cytosolic $Ca^{2+}$ were measured, using Rhod-2 AM, TMRE, and Fluo-4 AM fluorescent dyes, respectively, by Laser Scanning Confocal Microscopy (LSCM). Furthermore, the role of sarcolemmal $Na^+$/$Ca^{2+}$ exchange (NCX) in cytosolic $Ca^{2+}$ efflux was studied in KB-R7943 and $Na^+$-free normal Tyrode's solution (143 mM LiCl ). When DNP was applied to cells loaded with Fluo-4 AM, Fluo-4 AM fluorescence intensity initially increased by $70{\pm}10$% within $70{\pm}10$ s, and later by $400{\pm}200$% at $850{\pm}45$ s. Fluorescence intensity of both Rhod-2 AM and TMRE were initially decreased by DNP, coincident with the initial increase of Fluo-4 AM fluorescence intensity. When sarcoplasmic reticulum (SR) $Ca^{2+}$ was depleted by $1{\mu}M thapsigargin plus $10{\mu}M ryanodine, the initial increase of Fluo-4 AM fluorescence intensity was unaffected, however, the subsequent progressive increase was abolished. KB-R7943 delayed both the first and the second phases of cytosolic $Ca^{2+}$ overload, while $Na^+$-free solution accelerated the second. The above results suggest that: 1) the initial rise in cytosolic $Ca^{2+}$ under DNP results from mitochondrial depolarization; 2) the secondary increase is caused by progressive $Ca^{2+}$ release from SR; 3) NCX plays an important role in transient cytosolic $Ca^{2+}$ shifts under metabolic inhibition with DNP.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.30
no.2
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pp.251-257
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2013
The influences of Methotrexate as fluorophor, scatterer, absorber in turbid material by light scattering were interpreted for the scattered fluorescence intensity and wavelength, it has been studied the molecular properties by laser induced fluorescence spectroscopy. It has been found that the effects of optical properties in scattering media by the optical parameters((${\mu}_s$, ${\mu}_a$, ${\mu}_t$). The value of scattering coefficient ${\mu}_s$ is large by means of the increasing particles of L-${\alpha}$-Phosphatidylcholine, it has been found that the slope decays exponentially as a function of depth from laser source to detector. It may also aid in designing the best model for oil chemistry, laser medicine and application of medical engineering.
Vsing the phosphorylated thylakoid membrane induced by 5-35kLux of light intensities, we investigated the chlorophyll nuorescence quenching of PSII and the phosphorylation of LHCPII i in relation to the chlorophyll-bleaching of Panax ginseng C.A. Meyer. In the Presence of DCMU, both of the fluorescence yield of non-phosphorylated thylakoid and the rate of fluorescence quencing dependent on the Phosphorylation were high p. ginseng more then Glyine max L. And at the high light F intensity (above 25 kLux) the fluorescence quenching rate of p. ginseng compared with that of G. max reached nearly to 2 times. The LHCPII of P. ginseng was composed of 3 major Polypeptides (24.5, 26 and 27kD) and 3 minor polypeptides (24, 25.3 and 28.3kD) in the region of 24-29kD and differed, from G. max in both of the number and quantity of polypeptides. Among these polypeptides, the phosphorylated polypeptide dependent on the light intensity was 24kD in P. ginseng.
Cha, Gi Won;Park, Gwang Won;Ha, Yeong Gu;Kim, Ha Seok
Journal of the Korean Chemical Society
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v.38
no.9
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pp.653-659
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1994
The fluorescence intensities of europium and samarium can be greatly enhanced in the presence 2-thenoyltrifluoroacetone(TTA), n-octanol and Triton X-100 in aqueous solution of pH 7. It was also found that the fluorescence intensity can be greatly increased by the addition of excess of $La^{3+}$. The excitation and emission wavelengths of europium and samarium were 345 nm, 380 nm and 617 nm, 567 nm, respectively. The fluorescence intensity was a linear function of the concentration of europium and samarium in the range TEX>$1{\times}10^{-7}∼1{\tiems}10^{-9}\;M,\;1{\tiems}10^{-5}∼1{\times}10^{-7}\;M$, respectively, and the detection limits were 1$1{\times}10^{-11}\;M$ for europium and $1{\times}10^{-8}\;M$ for samarium and the luminescence mechanism of the system is discussed.
Yao, Fei;Sun, Yang;Tan, Chunlei;Wei, Song;Zhang, Xiaojuan;Hu, Xiaoyun;Fan, Jun
Journal of the Korean Chemical Society
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v.55
no.6
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pp.932-935
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2011
Using tetrabutyl titanate as precursor, $Eu^{3+}$ doped $TiO_2$ nano-powder was prepared by sol-gel method, the nature of luminescence of nano-powder was studied. The interaction of chlorpyrifos with $Eu^{3+}$ doped $TiO_2$ was studied by absorption and fluorescence spectroscopy. The results indicated the fluorescence intensity of $Eu^{3+}$ doped $TiO_2$ was quenched by chlorpyrifos and the quenching rate constant ($k_q$) was $1.24{\times}10^{11}\;L/mol{\cdot}s$ according to the Stern-Volmer equation. The dynamics of photoinduced electron transfer from chlorpyrifos to conduction band of $TiO_2$ nanoparticle was observed and the mechanism of electron transfer had been confirmed by the calculation of free energy change (${\Delta}G_{et}$) by applying Rehm-Weller equation as well as energy level diagram. A new rapid method for detection of chlorpyrifos was established according to the fluorescence intensity of $Eu^{3+}$ doped $TiO_2$ was proportional to chlorpyrifos concentration. The range of detection was $5.0{\times}10^{-10}-2.5{\times}10^{-7}mol/L$ and the election limit ($3{\sigma}$) was $3.2{\times}10^{-11}$ mol/L.
As cool-season plant, Panax ginseng C. A. Meyer is planted under shade-installation with tall front and low rear. However, at different planting positions, distinct differences come out because ginseng grows at the same position within 3~5 years and the growth circumstance changes a lot by the shade-installation. So, in this study, changes of temperature, photosynthesis and chlorophyll fluorescence with varieties of shading material and planting position were investigated. Light transmittances by polyethylene shade net and silver-coated shading plate as planting materials were measured according to different planting positions. Photosynthetic rate and chlorophyll fluorescence were measured by LI-6400-40 (Li-Cor). According to different planting positions, light intensity was higher in silver-coated shading plate than in polyethylene shade net, and higher at front than rear. Also, photosynthetic rate showed the same tendency, which had a positive correlation to light intensity. But this treatment caused a lower Fo compared with polyethylene shade net because of the stress by light and temperature. Also, Fv/Fm and ETR were higher in silver-coated shading plate. Fo was similar at front and rear according to silver-coated shading plate and ETR was higher at front.
In this work, water-soluble and blue-emitting carbon nanodots (CDs) were synthesized from apple peels for the first time via one-step hydrothermal method. The synthetic route is facile, green, economical and viable. The as-prepared CDs were characterized thoroughly by transmission electron microscopy (TEM), X-ray diffraction (XRD), Raman, Fourier transform infrared (FT-IR), X-ray photoelectron (XPS), fluorescence and UV-Vis absorption spectroscopy in terms of their morphology, surface functional groups and optical properties. The results show that these CDs possessed ultrasmall size, good dispersivity, and high tolerance to pH, ionic strength and continuous UV irradiation. Significantly, the CDs had fast and reversible response towards temperature, and the accurate linear relationship between fluorescence intensity and temperature was used to design a novel nanothermometer in a broad temperature range from 5 to $65^{\circ}C$ facilely. In addition, the fluorescence intensity of CDs was observed to be quenched immediately by Cr(VI) ions based on the inner filter effect. A low-cost Cr(VI) ions sensor was proposed employing CDs as fluorescent probe, and it displayed a wide linear range from 0.5 to $200{\mu}M$ with a detection limit of $0.73{\mu}M$. The practicability of the developed Cr(VI) sensor for real water sample assay was also validated with satisfactory recoveries.
Enzymatic activities and fluorescence spectroscopic properties of the double mutant proteins P96L/F139W, P96L/F258W and a triple mutant protein P96L/F139W/F258W of tryptophan synthase $\alpha$ subunit from Escherichia coli was examined to study tertiary and local structure changes around the tryptophan residues. The enzymatic activities of P96l./F139W and P96L/F258W were similar, but P96L/F139W/F258W had lower activity, as compared to wild type. The fluorescence intensities of double mutant, P96L/F139W and P96L/F258W, were decreased but that of a triple mutant, P96L/F139W/F258W, was increased when compared to wild type. The sum of the maximum fluorescence intensity (fluorescence intensity at the λ$_{max}$) for the double mutant proteins was not equal to the intensity seen in the triple mutant protein. The enzymatic activity and fluorescence data indicate that the replacement of Pro$^{96}$ longrightarrowLeu might affect on the stability of helix 8 and the loop located between strand 4 and helix4. The result suggests that the tertiary structure of triple mutant (P96L/F139W/F258W), being different from wild type, might have more compact residual structure at the vicinity of 139 and 258.8.
The imidization and cure reaction of a thermosetting phenylethynyl-terminated amic acid (LaRC PETI-5) in film form have been monitored as a function of temperature by means of a steady-state fluorescence technique using a front-face illumination method. The variation of the fluorescence emission spectra of LaRC PETI-5 can be divided into four temperature regions; Region I: below 15$0^{\circ}C$, Region II: 150-25$0^{\circ}C$, Region III: 250-35$0^{\circ}C$, and Region IV: above 35$0^{\circ}C$. The fluorescence spectra in Region I are largely influenced by residual N-methyl-2pyrrolidinone in the polymer and also slightly by partial imidization of the polymer. There is a combined effect of imidization and solvent removal on the fluorescence behavior in Region II. The spectra in Regions III and IV are due significantly to the cure reaction of LaRC PETI-5 and to a post-cure effect of the polyimide, respectively. This spectroscopic evidence indicating the transformation of the amic acid imide oligomer into the corresponding polyimide via imidization and cure, agrees well with thermal analysis results obtained previously. The intermediate stage of cure in the range of 250-30$0^{\circ}C$ predominantly influences the change of the fluorescence intensity. The later stage above 30$0^{\circ}C$ significantly influences the position of the spectrum. This fluorescence study also supports the mechanism proposed in earlier work that the crosslinking reaction takes place at the reaction sites in the conjugated polyene and the phenylethynyl end group in the polyimide chain.
Objectives : We tried to observe the fluorescence anisotropy and intensity of ethidium ion in the intercalating binding interaction between DNA and ethidium ions in the presence of berberine, and then tried to explain the effect of berberine on the intercalating interaction of ethidium ion with DNA. Methods : DNA(calf thymus DNA), berberine and ethidium bromide(EtBr) were purchased from Sigma-Aldrich Co. Proper amount of each compound was dissolved in 20 mM sodium phosphate buffer(pH 7.0) containing 100 mM of NaCl to prepare stock solutions. Collections of the fluorescence anisotropy and intensity data were performed on JASCO FP-8300 spectrofluorometer equipped with a polarizer and a Peltier temperature controller. The excitation of ethidium ion was done at 550 nm and the emission data were collected at 600 nm. For Stern-Volmer plot, the fluorescence data were collected at $18^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$. Results : According to the results of this research, the weak competitive binding pattern between ethidium ion and berberine appeared in binding with DNA at low ratio of DNA to ethidium ion. But at high ratio of DNA to ethidium ion, this weak competition disappeared. Instead, berberine might bind to DNA by intercalating way. In other words, berberine could de-intercalate ethidium ion from DNA at low concentration of DNA relative to ethidium ion, but could not at high concentration of DNA relative to ethidium ion. In addition, the mechanism of fluorescence quenching of ethidium ion could also proceed differently, depending on the ratio of the amount of DNA to that of ethidium ion. Conclusions : The effect of berberine on the DNA-ethidium ion intercalating interaction could work differently, depending on the relative ratio of the amount of DNA to that of ethidium ion. This study also showed that fluorescence anisotropy analysis is very useful method to obtain detailed information for investigation of the complex binding interactions. In order to fully understand the mechanism of action of the pharmacological effect by berberine, studies on the effect of berberine on the action of proteins such as various enzymes closely related to berberine-induced medicinal effects should be continued.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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