• 생명과학회지
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• 제20권12호
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• pp.1872-1881
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• 2010

본 연구에서는 대두(FS)와 아가콩의 발효추출물(FYA)의 항암활성 기전을 확인하기 위해 AGS 인체위암세포의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. AGS 세포에서 FS 및 FYA 처리로 인하여 암세포의 증식이 처리 농도 의존적으로 강하게 억제하였고, apoptosis 유발을 의미하는 세포의 전반적인 형태 및 핵의 변형 또한 동반하였다. 또한 세포주기 분석을 통하여 이 현상이 apoptosis 유도에 의한 것임을 확인하였다. AGS 세포에 처리된 FS 및 FYA는 pro-apoptotic factor인 Bax의 발현 증가를 통한 intrinsic pathway나, death receptor 관련 유전자의 발현 증가를 통한 extrinsic pathway를 활성화시키며, 더 나아가서 IAP family인자의 발현 억제 및 caspases의 활성 증가를 일으켜 apoptosis를 유발시키는 것을 유추할 수 있었는데, 이러한 효과들은 FS보다 FYA에서 더욱더 탁월하였다. 이는 향후 아가콩 발효추출물이 항암치료를 위한 적용 가능성이 매우 우수함을 제시하여 주는 결과이다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제25권3호
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• pp.171-177
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• 2010

Plasminogen activators (PAs) are serine proteases that convert plasminogen to plasmin. The PA/plasmin system has been associated with a number of physiological processes such as fibrinolysis, ovulation and fertilization. Although correlations have been reported between reactive oxygen species (ROS) and oocyte maturation, the relationship between PA activity and ROS is unknown. The present study was undertaken to determine the effects of cumulus cells on PA activity in matured porcine oocytes under xanthine (X)-xanthine oxidase (XO) system. When oocytes were matured under the X-XO system, the proportion of oocytes remaining GV stage was higher (p<0.05) in oocytes without cumulus cells. The incidence of degenerated oocytes was higher (p<0.05) in the X+XO ($11.1{\pm}6.1$ and $21.6{\pm}3.4%$) than in the control group ($2.9{\pm}1.8$ and $4.0{\pm}1.6%$). The proportion of TUNEL-positive oocytes and activity of caspase-3 were higher (p<0.05) in cumulus-free oocytes and oocytes exposed to ROS. Tissue-type plasminogen activator-plasminogen activator inhibitor (tPA-PAI) and tissue-type plasminogen activator (tPA) activity were detected in oocytes that were separated from cumulus-oocytes complexs (COCs) at 44 h of maturation culture, and only tPA was produced in oocytes that were denuded before the onset of maturation culture. On the other hand, the activities of PA were increased (p<0.05) when oocytes were cultured under the X-XO system. The higher activity of tPA was observed in denuded oocytes (DOs) underwent apoptotic changes by oxidative stress. In COCs, however, tPA-PAI as well as tPA activity was detected and apoptotic changes such as DNA cleavage or caspase-3 activation were not observed. These results suggest that tP A may be relevant to apoptotic cell death in porcine oocytes by oxidative stress.

• Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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• 제13권2호
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• pp.129-136
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• 1991

Fibrin Sealants 는 과거 간, 비장, 신장등의 일반외과 수술에서 단순한 외과적 봉합으로는 해결하지 못하는 넓은 면적의 조직의 유착을 위하여 1940 년경 부터 개발되기 시작한 것으로 악안면 영역에서는 1970 년대 중반부터 미세신경접합술과 피부이식을 위하여 사용되기 시작한 후, 현재, 골이식후의 골세편의 고정, 혈관봉합술, 연조직에서 조직들의 유착과 지혈, 그리고 혈관종의 치유등을 목적으로도 광범위하게 연구되고 사용되고 있다. 이것은 인체에서 채취한 혈액응고인자 XIII 을 포함하는 Fibrinogen 성분과, 소에서 추출한 Thrombin 의 두가지 주요 성분으로 구성되며, Fibrinogen 용해제인 Aprotinin 액과 Thrombin 용해제인 염화칼슘액과 함께 네부분으로 구성된다. 각제품에 따라 그리고 사용된 농도에 따라 차이는 있으나, 대개 수분후에 조직이 응고되어 달라붙기 시작하고, 수시간후에 최대접착효과에 도달하며, 응고된 접착효과는 12 일에서 15 일간 유지되고 그후 정상적인 섬유소분해작용과 식세포활동에 의하여 분해된다. 저자는최근 6 개월간 서울대학교병원 구강악안면외과에서 28 명의 각종 질환 및 기형 환자에서 미세신경봉합술, 피부이식, 악교정성형술과 구개파열 또는 하악골 재건을 요하는 환자의 골이식후의 골세편의 고정, 경부곽청술이나 종양제거술후 각종 피부판 또는 근피판을 이용한 연조직의 적합, 혈관종의 처치, 후이개접근 법에 의한 악관절수술후의 외이도의 접합등 다양한 목적을 위하여 적용된 Fibrin Sealants 를 사용하여 양호한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

• 한국임상수의학회지
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• 제32권1호
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• pp.5-8
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• 2015

D-dimer란 섬유소분해산물로 응고혈액이 섬유소용해 후에 혈액 내에 보이는 작은 단백질 파편이다. D-dimer의 농도는 혈전증과 혈전색전증을 결정하기 위해서 널리 사용되고 있다. 인의에서 혈전색전증의 주요 원인 중 하나는 울혈성 심부전이기 때문에, 금번 연구에서 만성 이첨판 폐쇄부전증에 의한 울혈성 심부전의 다양한 심각도를 가진 개들에서 혈전색전증의 정도와 위험성을 조사하였다. 혈장 d-dimer의 농도는 건강한 개 20마리와 만성 이첨판 폐쇄부전증에 의해 울혈성 심부전에 이환된 다양한 중등도의 30마리 개에서 평가되었다. D-dimer의 농도는 상품화 된 키트로 측정하였다. 혈장 D-dimer의 농도는 건강한 개체 집단과 만성 이첨판 폐쇄부전증에 이환된 집단 사이에 유의적인 차이는 존재하지 않았다. 게다가, d-dimer의 농도는 심초음파 인덱스 중 대동맥대 좌심방비, 대동맥대 좌심실 이완말기 직경비와 연관성이 보이지 않았고, 이번 연구 집단의 심부전의 심각도와도 연관성이 존재하지 않았다. 따라서 금번 연구는 심부전을 가진 개에서 혈전색전증의 정도가 심하지 않거나 혈장 d-dimer의 농도 검사 자체가 개의 혈전색전증을 발견하는데 신뢰하지 못하다는 점을 암시하고 있다.

• 대한의생명과학회지
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• 제3권2호
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• pp.83-88
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• 1997

범발성 혈관내 응고증은 패혈증 환자들에 있어 빈번히 발생하며 여러 가지 위급한 질병 상태에 관계하는 병리학적 상황이다. 범발성 혈관내 응고증은 기존의 복잡한 임상 상황을 더욱 어렵게 만들어서 높은 사망률의 원인이 된다. 그럼에도 불구하고 그것의 병인적 기전들은 완전히 규명되지 않았다. 본 연구는 범발성 혈관내 응고증의 발생에 관여하는 병인적 기전들의 이해를 위해 전향적으로 계획되었다. 15마리의 쥐를 대상으로 해서 연구목적에 따라 세 군으로 나누었다：I 군은 대조군으로서 내독소를 투여하지 않은 쥐들이고 (n=5), II 군은 내독소 투여 후 12시간이 경과한 쥐들이며 (n=5), III군은 내독소 투여 후 24시간이 경과한 쥐들이었다 (n=5). 실험적 범발성 혈관내 응고증은 일정량의 내 독소를 한번에 투여하여 유도하였다 (1mg/kg, E. coli serotype 055:B5). 실험대상 쥐들의 심장으로부터 직접 채혈하여 혈소판수, 섬유소원 농도, plasminogen 농도, 항트롬빈 III 농도, D-dimer, 보체성분 (C3 및 C4)을 측정하였다. 내독소를 투여한 II 군과 III 군에 있어 혈소판수, 섬유소원 (III 군의 경우는 오히려 증가), plasminogen, 항트롬빈 III, 그리고 C3등의 혈중 농도들이 대체로 감소하였고 D-dimer 농도는 증가함으로써 명백한 범발성 혈관내 응고증이 관찰되었다. 본 연구 결과들은 내독소에 의해 응고계, 섬유소용해계, 그리고 보체계와 같은 여러경로의 활성화가 유도될 수 있으며, 이로해서 범발성 혈관내 응고증 및 이차적인 중복 장기기능 부전이 발생하리라는 점을 시사하고 있다. 결국, 이와같은 실험적인 내독소 유도 범발성 혈관내 응고증에 있어 응고계 및 섬유소 용해계의 활성을 일으키는 다양한 기전에 관한 축척된 지식들은 그와 같은 질병의 예방 혹은 치료방법을 제공해 줄 것이다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제6권1호
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• pp.43-51
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• 2006

Background: The DR-$70^{TM}$ immunoassay is a newly developed cancer diagnostic test which quantifies the serum fibrin degradation products (FDP), produced during fibrinolysis, by antibody reaction. The purpose of this study was to evaluate the potential of DR-$70^{TM}$ Immunoassay in screening malignant tumor. Methods: Sample subjects were 4,169 adults, both male and female, who visited the health promotion center of a general hospital from March 2004 to April 2005 and underwent the DR-$70^{TM}$ immunoassay test and other tests for cancer diagnosis. The patient group was defined as 42 adults out of the sample subjects who were newly diagnosed with cancer during the same time period when the DR-$70^{TM}$ immunoassay test was performed. Final confirmation of a malignant tumor was made by pathological analysis. Results: The mean DR-$70^{TM}$ level was $0.83{\pm}0.65{\mu}g/ml$ (range: 0.00 (0.0001)${\sim}7.42{\mu}g/ml)$ in the control group (n=4,127) as opposed to $2.70{\pm}2.33{\mu}g/ml$ (range: $0.12{\sim}9.30{\mu}g/ml)$ in the cancer group (n=42), and statistical significance was established (p<0.0001, Student t-test). When categorized by the type of malignant tumor, all cancer patients with the exception of the subgroups of colon and rectal cancer showed significantly higher mean DR-$70^{TM}$ levels compared with the control group (p<0.0001, Kruscal-Wallis test). The receiver operating characteristic (ROC) curve analysis revealed ${\geq}1.091{\mu}g/ml$ as the best cut-off value. Using this cut-off value, the DR-$70^{TM}$ immunoassay produced a sensitivity of 71.4%, a specificity of 70.1%, a positive predictability of 69.4%, and a negative predictability of 69.2% (1). Conclusion: A significant increase in the mean DR-$70^{TM}$ value was observed in the cancer group (thyroidal, gastric, breast, hepatic and ovarian) com pared with the control group. In particular, the specificity and sensitivity of the DR-$70^{TM}$ immunoassay was relatively high in the subgroups of breast, gastric, and thyroidal cancer patients. There is need for further studies on a large number of malignant tumor patients to see how the DR-$70^{TM}$ level might be changed according to the differentiation grade and postoperative prognosis of the malignant tumor.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제38권4호
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• pp.379-384
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• 2010

수집한 전통 장류에서 세포외효소(amylase, protease, cellulase, lipase and fibrinolytic enzyme) 분비능이 우수한 미생물을 분리한 후, 16S rRNA 유전자분석과 생리활성 특성을 조사하였다. amylase와 cellulase 분비능은 모든 선발균주에서 표준균주인 Bacillus subtilis KACC 10114보다 높게 나타났다. Protease 분비능은 D2-14균주를 제외한 모든 선발균주에서 활성이 있었으며, lipase 분비능은 D8-8과 K4-1을 제외한 균주에서 활성이 나타났다. 혈전용해 활성은 D8-2를 제외한 모든 선발균주에서 활성이 나타났으며, D8-8과 K4-1이 가장 높은 활성을 나타냈다. 선발균주인 K3-2, K4-1, K11-1-4, K11-1-6, K11-7, K12-3 와K14-9은 그람 양성세균과 그람 음성세균 그리고 효모에서도 높은 항균활성을 나타내었다. 간장 및 된장에서 분리한 균주들을 동정하기 위해 분자수준에서 16S rRNA 유전자 염기서열을 분석한 결과, 거의 Bacillius sp.로 나타났다. 발효과정에서 세포외효소 분비능과 생리활성이 우수한 미생물을 분리, 확보함으로써 전통 장류의 고급화 및 품질향상과 제조공정의 표준화가 가능할 것으로 여겨진다

• 한국생명과학회:학술대회논문집
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• 한국생명과학회 2001년도 제32회 학술심포지움
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• pp.67-86
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• 2001

A strain producing strongly fibrinolytic enzyme was isolated from soil and was identified to be Bacillus subtilis by biochemical and physiological characterization. The optimal culture conditions for the production of fibrinolytic enzyme was determined to be 1.0% tryptone, 1.5% soluble starch, 0.5% Peptone, 0.5% NaCl, $(NH_{4})_{3}PO_4.3H_{2}O, and MgSO_{4}.7H_{2}O.$ Initial pH and temperature were pH 8.0 and $30^{\circ}C$ , respectively, The highest enzyme production was observed at 30 hours of cultivation at $30^{\circ}C$ The fibrinolytic enzyme was purified to homogeneity by DEAE Sephadex A-50 ion exchange column chromatography, 70% ammonium sulfate precipitation, Sephadex G-200 and G-75 gel filtration column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was 28,000 as determined by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. A gene encoding the fibrinolytic enzyme was cloned into a plasmid vector pBluescript, transforming E.coli XL-1 Blue. The clone was able to degrade fibrin, This indicated that the gene could encode a fibrinolytic enzyme. The nucleotide sequence of the 2.7 kb insert was determined in both direction. One open reading frame composed of 1023 nucleotides was found to be a potential protein coding region. There was the putative Shine-Dalgano sequence and TATA box upstream of the open reading frame. The homology search data in the genome database showed that both the 2.7 kb insert and 1 kb open reading frame carried no significance in the nucleotide sequence of known fibrinolytic enzyme from Bacillus serovars. The recombinant cell harboring the novel gene involved in fibrinolysis was subjected to protein purification. The molecular mass of the purified fibrinolytic enzyme was determined to be 31864 Dalton, which was highly in accordance with the molecular mass(33 kDa) of the fibrinolytic gene deduced from the insert. The fibrinolytic enzyme was Purified 50.5 folds to homogeneity in overall yield of 10.7% by DEAE Sephadex A-50 ion exchange, 85% ammonium sulfate precipitation, Sephadex G-50, Superdex 75 HR FPLC gel filtration. In conclusion, a novel fibrinolytic gene from Bacillus subtilis was identified and characterized by cloning a genomic library of Bacillus subtilis into pBleuscript. For the soybean fermented by this strain, it is found that there increased assistant protein about 20% compared to the soybean not fermented and increased about 30% according to amino acid analysis and, in particular, essential amino acid increased about 40%. When keeping this fermented soybean powder at room temperature for about 70days, it showed very high stability maintaining almost perfect activity and, therefore, it gave us great suggestion its possibility of development as a new functional food.

• 생명과학회지
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• 제18권4호
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• pp.427-434
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• 2008

대퇴골두무혈성괴사증은 다원적인 질병으로 특정 집단의 경우 더 많은 위험성을 내포하고 있다. 특히 스테로이드의 과용과 알코올 남용 등으로 인한 지질대사의 변화는 골괴사증의 주요 원인 중 하나이다. 본 연구는 골괴사 환자와 대조군 사이에서 HMG-CoA reductase 유전자의 다형성과 질환발생과의 연관성에 대해 알아보았다. 24명의 한국인을 대상으로 HMG-CoA reductase 유전자를 시퀀싱하여 5곳의 유전자 다형성을 확인하였다. 349명의 남성 환자와 300명의 남성 대조군을 대상으로 네 곳(-6933C>T, -6045T>G, +12673G>A, +18128C>T)의 유전자다형성의 빈도를 비교하였다. 그 결과 HMG-CoA reductase 유전자의 다형성과 질환발생 및 혈장 지질농도와는 어떠한 상관관계도 보이지 않았다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제31권10호
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• pp.952-963
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• 1998

연구배경 : 체외 순환으로 인한 지혈 기전의 심각한 손상은 술후 과다 출혈을 일으켜 환자의 생명을 위협하고, 대량 수혈에 따른 부작용과 재수술의 우려마저 증가시킬 수 있다. 특히, 심장 수술동안 섬유소 용해계의 활성화와 혈소판의 숫적, 기능적 변화가 술후 상당 시간동안 출혈의 원인이 된다고 보고하고 있다 대상 및 방법 : 본 연구는 체외 순환 동안 및 그 후에 있어, 체외 순환에 의한 섬유소 용해계의 활성화를 포함한 다양한 혈액학적 변화를 조사하고, 이러한 변화들이 술후 비외과적 출혈의 정도와 어떤 상관성이 있는가를 규명하기위해 체외 순환을 실시할 성인 환자 20명을 대상으로 전향적으로 계획되었다. 혈소판 수, 섬유소원 및 plasminogen 농도, FDP, D-dimer, BT, aPTT, PT와 같은 혈액학적 변수의 측정을 위해 수술동안 또는 술후 시기에 혈액을 연속적으로 채취하였다. 출혈량은 흉부 삽관을 통한 배출량을 술후 3, 6, 12, 24, 48시간의 양과 총혈액량을 각각 측정하였다. 결과 : 연구 결과를 요약하면 다음과 같다:혈소판 수는 체외 순환으로 인해 급격히 감소되었다 (p<0.01). 총 체외 순환 시간이 길수록 혈소판 수의 감소률은 더 높았으며 (r=0.55, p=0.01) 술후 7일이 되어서야 비로소 술전치에 근접하였다. 체외 순환동안 FDP와 D-dimer의 농도가 의미있게 증가하였고 (p<0.0001), 섬유소원 및 plasminogen 농도 둘 다 서로간에 상관성을 보이면서 감소하였다 (r=0.57, p<0.01). 술후 2hr-BT, 2hr-PT, 2hr-aPTT 모두 술전치에 비해 유의하게 연장되었다(각각 p<0.05, p<0.0001, p<0.0001). 술후 총 출혈량과 환자의 연령, 대동맥 차단 시간, 체외 순환 시간은 각각 양의 상관관계 (positive correlation)가 있었다. 술전 기준치 혈소판 수와 술후 3시간 출혈량, 체외 순환 종료시의 혈소판 수와 술후 3시간, 6시간 및 총 출혈량 그리고 술후 1일의 혈소판 수와 48시간 출혈량 사이에는 각각 음의 상관관계 (negative correlation)가 있었다. 술후 2hr-aPTT는 술후 6시간 및 48시간대의 출혈량에 상관성이 있었고 (r=0.53, p=0.02) 술후 2hr-PT는 48시간 출혈량과 각각 양의 상관성이 있었으나 (r=0.43, p=0.05). 이 두가지 변수와 총 출혈량 간에는 상관성이 없었고, 술후 2hr-BT와 술후 출혈량 사이에도 유의한 상관성을 발견하지 못하였다. 결론 : 이상의 관찰 결과들은 체외 순환이 섬유소 용해계의 활성화와 혈소판 수의 심한 감소를 포함한 다양한 혈액학적 변화를 유도하고 환자의 연령, 혈소판 수, 대동맥 차단 시간, 체외 순환 시간, 술후 PT 및 aPTT와 같은 다인적 상황들이 술후 출혈에 영향을 미친다는 점들을 시사하고 있다. 본 연구 결과들은 체외 순환에 따른 지혈적 손상에 관한 이해와 술후 출혈을 감소시키기 위한 기초 자료로 활용 가능하리라 사료된다.