Park, In-Seok;Kim, Hyung-Bae;Son, Jin-Kee;Kim, Dong-Soo
Korean Journal of Ichthyology
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v.6
no.1
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pp.71-78
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1994
Fertilized eggs of red seabream, Pagrus major were subjected to cold shock with various initial treatment times and durations. Cold shocks at $3^{\circ}C$ for 20 minutes and 30 minutes at 6 minutes after fertilization yielded the highest triploid incidence with 100%. Triploidy was confirmed by erythrocyte measurements and chromosome counts. Diploid ad 48 acrocentric chromosomes. while triploid had 72 acrocentrics. Triploids revealed increased erythrocyte size compared to their diploids and early growth rates of triploids from 10 days to 34 days after hatching were slightly lower than that of their controls.
A series of experiments was conducted to identify the potential of five phytoplankton species as standard test species for marine ecotoxicological tests. The candidate phytoplankton species are Skeletonema costatum, Heterosigma akashiwo, Prorocentrum micans, Isochrysis galbana, and Tetraselmis suecica. Salinity tolerance and sensitivity on potassium dichromate as a reference material were identified. Toxicity of eleven ocean dumped sewage sludges and four red tide expellent extracts were estimated by the inhibition of population growth rates (PGR) of marine diatom S. costatum, While most species revealed relatively weak tolerance on salinity, T. suecica demonstrated the highest salinity tolerance ranged from $5\~35$ psu and the others $15\~35$ psu. H. akashiwo revealed the highest sensitivity as 72h $IC_{50}$=0.76mg/L and T. suecica the lowest as 72h $IC_{50}$=8.89mg/L on potassium dichromate. Sludge extracts from industrial waste, domestic sewage and livestock farm waste sludge showed high toxicity as 72h $IC_{50}$<$2\%$ and lowest toxicity from filtration bed sludge as 72h $IC_{50}$=$30.50\%$ NOEC (No Observed Effective Concentration) of sludge extract ranged from <$0.4\%$ to $1.6\%$ and this indicated high phytotoxicity of ocean dumped sewage sludge. The test sensitivity of phytoplankton PGR inhibition was much higher than those of marine rotifer Brachionus plicatilis mortality test and bioluminescent inhibition test by marine bacteria Vibrio fischeri, and comparable with the sea urchin (Strongylocentrotus intermedius) fertilization test. As a result the phytotoxicity test using phytoplankton PGR inhibition ($IC_{50}$) must be a useful tool for marine phyto-toxicological evaluation of ocean dumped materials.
Park, Chun-Young;Uhm, Sang-Jun;Song, Sang-Jin;Kim, Kwag-Sung;Hong, Seung-Bum;Chung, Kil-Saeng;Lee, Hoon-Taek
Proceedings of the KSAR Conference
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2003.06a
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pp.26-26
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2003
Hyaluronic acid (HA)-binding sites have been shown the diagnostic potential fur assessment of sperm maturity, which is related to male fertility. This study was designed to evaluate chromosomal patterns in porcine embryos produced by in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) with non- or HA-binding sperm (HABS). For binding of sperm with HA, sperm incubated in 10 ${mu}ell$ drop containing HA (0.8 mg/ml)-agarose (0.8%) mixture for 15 min. IVF and ICSI with non- or HA-bound sperm examined with matured oocytes at 44 hr after in vitro maturation. Embryos were cultured in 50 ${mu}ell$ of NCSU 23 containing 0.5% BSA for 5 days and then in 50 ${mu}ell$ of NCSU 23 containing 10% FBS for 2 days. For the evaluation of chromosomal aneuploidies, chromosome 1 sub-metacentric specific probe was used in sperm and embryos by fluorescence in situ hybridization (FISH). The frequency of aneuploidy sperm for chromosome 1 was 6.25%. The significant differences following IVF and ICSI with non- or HA-bound sperm were not observed in blastocyst formation rates (18.6, 23.5, and 23.8%) and cell number (61.8 $\pm$ 12.5, 55.5 $\pm$ 7.3, and 59.3 $\pm$ 9.6). Moreover, the percentage of diploidy in 4-cell stage embryos was 57.1% (IVF), 68.8% (ICSI), and 76.3% (ICSI-HABS). These results suggest that HA-binding sites may be a material for selection of normal sperm for ICSI. Therefore HA selection of normal sperm may be reduce the loss to embryonic mortality prior to embryo transfer in pig.
Genetic changes from improving female's reproductive rate through in vitro fertilization of large number of oocytes were studied. The breeding scheme employed was multiple ovulation and embryo transfer of juveniles and adults. Both balanced and unbalanced matings were examined for the four closed progeny population sizes, 10$^3$, 10$^4$, 105, 106. In balanced matings, all selected sires and dams were mated to each other(cross-classified mating) while unbalanced matings allowed selected dams and sires mated partially, eg. unbalanced matings allowed averages of .5 and .25 progeny per each mating. Various numbers of selected sires and dams were also examined in both balanced and unbalanced matings. In all mating schemes, selection of males and females was restricted to he one from each fullsib family to reduce the rate of inbreeding. The model calculations were deterministic and accounted for the effects of selection and inbreeding on loss of the genetic variation in succeeding generations. Balanced rectangular mating schemes, where more donors were selected than sires, resulted in larger selection responses than balanced square mating schemes, where equal numbers of sires and donors were selected, and unbalanced rectangular mating. The first round selection responses from the balanced rectangular matings of juvenile MOET, eg. number of progeny per mating equals 2 with 10 sires selected, were 1.192, 1.406, 1.580 and 1.735 times larger than the first round selection responses from the balanced square mating schemes for the given four progeny population sizes, 10$^3$, 10$^4$, 105 and 106, respectively. Similar results were obtained in adult MOET breeding schemes. However, balanced square matings gave greater selection responses than the unbalanced rectangular matings.
Using tracer technique of Zn-65, a pot experiment has been carried out in order to evaluate the efficiency of zinc fertilization on two paddy soils; an acidic from Kimpo and an alkaline from Yeongweol. The sources of zinc were zinc sulfate, zinc carbonate, zinc chloride and zinc oxide. Two rates of zinc were applied to the soils and control treatment was also included for this study. The methods of zinc application were uniform mixing throughout the soil, applying to the soil surface and irrigation water, and root dipping with zinc oxide at transplanting. In general, Yeongweol soil had higher efficiency of zinc fertilizers than Kimpo soil. The results showed that zinc fertilizer application should be required to improve the rice growing conditions in Yeongweol soil especially at early stage of growth after transplanting. As to the application method of zinc fertilizers, mixing treatment appeared to be most superior to any other methods in both soils. In addition, it is found that root dipping in the zinc oxide suspension would be a rather effective method of zinc application. In aspect of fertilizer efficiency there was no superiority or inferiority among the zinc sources used in this experiment.
Kim, Tae-Shin;Yang, Cao;Lee, Young-Seung;Park, Soo-Bong;Park, Chun-Keun;Lee, Dong-Seok
Reproductive and Developmental Biology
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v.32
no.2
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pp.81-87
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2008
Production of transgenic animals for studying specific gene has been limited due to a low efficiency, lack of skilled researchers and the need for expensive equipment. Currently, the boar spermatozoa as a vector to deliver exogenous DNA into the oocyte were used to improve the efficiency of transfection rate. In this study, we revealed that the optimal conditions for DNA uptake in spermatozoa by liposome were to 90 min of incubation, $17^{\circ}C$, $10^5$ spermatozoa, 4 ng/ml of exogenous DNA and 0.5% (v/v) liposome, without damage to fertility. In addition, the developmental rate to the blastocyst stage of embryo in control group was significantly higher than those embryos with exogenous DNA and liposome, whereas there were no significant differences in embryo development between the liposome and type of DNA. The transfection rates of embryo using treated spermatozoa with both liposome and circular DNA were higher than those using linear DNA. These findings raise the possibility thattreated spermatozoa with liposome/DNA complexes could be used in in vitro fertilization, and the exogenous DNA transferred into the oocytes. Taken together, we demonstrated that liposome a vector for the uptake of exogenous DNA in boar spermatozoa could improve the efficiency of sperm-mediated gene transfer in creating transgenic pig and the other domestic transgenic animals.
A field study was conducted to determine the runoff loss of N and P in small scale of red pepper field plots (10% slope), consisting of three different plots with black polyethylene vinyl mulching (mulching), ridge without mulching (ridge), and flat without ridge and mulching (flat). Composted manure and urea as a basal application were applied at rates of $20MT\;ha^{-1}$ and $93kg\;N\;ha^{-1}$, respectively. Urea at $189kg\;N\;ha^{-1}$ and fused phosphate at $67kg\;P_2O_5\;ha^{-1}$ were additionally applied on June 25 with different fertilization methods, broadcast application in flat plot and hole injection in ridge and mulching plots. Plant uptake of N and P was positively correlated with their respective concentrations in surface soil: mulching > ridge > flat plots. The runoff loss by soil erosion was higher in flat plot than ridge and mulching plot with contour line. Nitrate loss by the runoff water had no significant differences among three surface management practices, but the higher average value in ridge and mulching plots than flat plot. Especially, the flat plot had no phosphate loss during summer season. This is probably due to low labile P content in surface soil of flat plot. In the summation of soil and water loss, flat plot was higher in N and P loss than ridge and mulching plot with contour line. Nevertheless, the nitrate and phosphate loss by runoff water could be more important for non-point source management because the water could meet the river easier than eroded soil because of re-deposition around slope land.
The present study demonstrates the changes in body weight (BW) and plasma sex steroid hormone profiles during artificial maturation induced by human chorionic gonadotropin (HCG) or salmon pituitary extract (SPE) injections in cultured eel, Anguilla japonica, kept in seawater for 3 months. In the weekly SPE-injected female group, BW was relatively stable during vitellogenesis. Following induction of vitellogenesis, females exhibited a rapid increase of BW, and the oocytes were observed to be in the migratory nucleus stage at the end of the experiment. Plasma testosterone (T) and $estradiol-17{\beta}$ ($E_2$) levels increased slightly during vitellogenesis and peaked at an average of 5.82 ng/mL and 4.76 ng/mL, respectively, at the end of the experiment. In the weekly control and HCG-injected female groups, BW slowly decreased during the experimental period, and the oocytes of the two groups were observed to be at the primary yolk globule stage. In the weekly HCG-injected female group, plasma T and $E_2$ levels increased slightly during vitellogenesis and decreased afterward. In the control female group, however, plasma T and $E_2$ levels were not altered during the experimental period. Furthermore, plasma $17{\alpha},20{\beta}-dihydroxy-4-pregnen-3-one$ (DHP) was not detected in all experimental groups. Fertility and hatching rates of SPE-injected females were significantly higher in those that ovulated 15 h after DHP injection than 18 h. These results indicate that long rearing in seawater increases responsiveness to SPE in ovarian maturation of the Japanese eel, resulting in shortened period from completion of vitellogenesis by sex steroid hormone production.
Objective: During stimulated IVF cycles, up to 15% of oocytes are recovered as immature. The purpose of this study was to investigate the trend of oocyte maturity in repeated ovarian stimulation for IVF. Methods: One hundred forty-eight patients were selected who underwent two consecutive IVF cycles using same stimulation protocol during 2008 to 2010. Ovarian stimulation was performed with FSH and human menopausal gonadotropin and flexible GnRH antagonist protocol in both cycles. Oocyte maturity was assessed according to presence of germinal vesicle (GV) and the first polar body. Immature oocyte was defined as GV stage or metaphase I oocyte (GV breakdown with no visible polar body) and cultured up to 48 hours. If matured, they were fertilized with ICSI. Results: Percentages of immature oocytes were 30.8% and 32.9% ($p$=0.466) and IVM rates of immature oocytes were 36.2% and 25.7% ($p$=0.077), respectively. A significant correlation was noted between percentage of immature oocytes in the two cycles (R=0.178, $p$=0.03). Women with >40% immaturity in both cycles (n=21) showed lower fertilization rate of $in$$vivo$ matured oocytes (56.4% vs. 72.0%, $p$=0.005) and lower pregnancy rate (19.0% vs. 27.1%, $p$=0.454) after the second cycle when compared with women with <40% immaturity (n=70). In both groups, female age, number of total retrieved oocyte and embryos transferred were similar. Conclusion: In repeated ovarian stimulation cycles for IVF, the immature oocyte tended to be retrieved repetitively in consecutive IVF cycles.
Keane, Kevin N;Ye, Yun;Hinchliffe, Peter M;Regan, Sheena LP;Dhaliwal, Satvinder S;Yovich, John L
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.46
no.4
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pp.178-188
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2019
Objective: To determine the clinical pregnancy (CP) and live birth (LB) rates arising from frozen embryo transfers (FETs) that had been generated under the influence of in vitro fertilization (IVF) adjuvants given to women categorized as poor-prognosis. Methods: A registered, single-center, retrospective study. A total of 1,119 patients with first FETs cycle include 310 patients with poor prognosis (109 treated with growth hormone [GH], (+)GH group vs. 201 treated with dehydroepiandrosterone, (-)GH group) and 809 patients with good prognosis (as control, (-)Adj (Good) group). Results: The poor-prognosis women were significantly older, with a lower ovarian reserve than the (-)Adj (Good) group, and demonstrated lower chances of CP (p< 0.005) and LB (p< 0.005). After adjusting for confounders, the chances of both CP and LB in the (+)GH group were not significantly different from those in the (-)Adj (Good) group, indicating that the poor-prognosis patients given GH had similar outcomes to those with a good prognosis. Furthermore, the likelihood of LB was significantly higher for poor-prognosis women given GH than for those who did not receive GH (p< 0.028). This was further confirmed in age-matched analyses. Conclusion: The embryos cryopreserved from fresh IVF cycles in which adjuvant GH had been administered to women classified as poor-prognosis showed a significant 2.7-fold higher LB rate in subsequent FET cycles than a matched poor-prognosis group. The women with a poor prognosis who were treated with GH had LB outcomes equivalent to those with a good prognosis. We therefore postulate that GH improves some aspect of oocyte quality that confers improved competency for implantation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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