• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제30권4호
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• pp.333-340
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• 2003

Objective: This study was performed to examine the maturation and the development to the blastocyst stage of immature oocytes collected from patients with high risk of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS). Materials and Methods: Cumulus-oocyte complexes (COCs) were collected following only HCGpriming for non stimulated IVF-ET cycles of the patients. At the time of oocyte collection, COCs were classified into three groups in accordance with their appearance (Group I: oocytes with dispersed cumulus cells; Group II: oocytes with compacted cumulus cells; Group III: oocytes with sparse cumulus cells). The in vitro maturation and blastocyst development rates of the COCs were compared among these groups. From August 2001 to June 2002, 48 IVM/IVF-ET cycles from 42 patients (mean age: $32.4{\pm}3.8$ years) were performed. To prevent the occurrence of OHSS, the patients were primed with 10, 000 IU HCG alone 36 h before oocyte collection without gonadotropin stimulation. Oocytes were aspirated on cycle days from 7 to 13. The normal COCs were classified into three groups according to their appearance. The aspirated immature oocytes were cultured in YS maturation medium containing 30% (v/v) human follicular fluid (HFF), 1 IU/ml FSH, 10 IU/ml HCG and 10 ng/ml rhEGF. Fertilization was induced by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). All zygotes were co-cultured with cumulus cells in $10{\mu}l$ YS medium containing 10% HFF until day 7 after oocyte collection. Blastocyst transfer was performed on day 5 after ICSI. Results: Th e mean number of oocytes cultured in the IVM/IVF cycles was $24.7{\pm}10.6$. Of 1185 COCs, those assigned to Group I, II and III were 470 (39.7%), 414 (35.0%) and 301 (25.4%), respectively. The maturation rate (94.5%, 444/470, p<0.05) in Group I was significantly higher than those of Group II (62.8%, 260/414) and Group III (73.1%, 220/301). Especially, 30.9% of COCs in Group I (145/470) was matured on the day of oocyte aspiration. There were no differences in the rates of fertilization and cleavage among the three groups. The development rate to the blastocyst stage in Group I (54.6%, 206/377, p<0.05) was also significantly higher than those in Group II (33.0%, 68/206) and Group III (30.1%, 52/173). Twenty-four clinical pregnancies (50.0%) was obtained and 22 pregnancies (45.8%) are ongoing. Implantation rate in the present study was 24.6%. Conclusion: These results suggest that there is a positive correlation between the appearance of COCs and the developmental competence of the immature oocytes in non stimulated IVM/IVF cycles.

• Weed & Turfgrass Science
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• 제3권4호
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• pp.342-346
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• 2014

본 연구에서는 골프장 잔디재배 토양에 축적되어 과습을 유발하여 잔디뿌리의 호흡작용을 방해하고 각종 병의 서식처가 되는 토양대취의 분해여부를 조사하기 위해 2012년부터 2년간 토양온도가 높은 기간인 6월부터 10월까지 인천시 중구 소재 스카이72 골프크럽 하늘코스 2홀 페어웨이에서 배양미생물과 가축분뇨액비를 혼용 처리하여 토양화학성, 잔디품질 및 토양 중의 대취분해여부에 대해 조사하였다. 공시 배양미생물은 연구소자체 선발하여 예비실험에서 대취분해 효과가 있었던 6종의 혼합미생물을 1톤 규모로 대량 배양하여 시험에 사용하였으며, 배양미생물에는 가축분뇨액비와 배양미생물의 토양 중 먹이역할을 하는 탄소화합물함유 아미노산액을 혼용하여 처리하였다. 시험결과, 처리구별 토양의 화학성과 미량원소 함유량은 큰 차이는 보이지 않았으나 엽색지수와 엽록소지수 및 잔디뿌리길이는 거의 동일하게 나타났다. 또한 토양 중 대취함량은 무처리보다 배양미생물과 가축분뇨액비를 혼용한 처리구에서 대취분해정도가 더 높게 나타났다. 따라서 한지형잔디로 식재된 골프코스 페어웨이 관리 시에 잔디품질 유지와 토양 중 대취분해를 위해서는 배양미생물과 가축분뇨액비의 혼합한 시비가 관행적인 화학비료시비보다 더 유리하다고 사료된다.

• 원예과학기술지
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• 제35권4호
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• pp.431-438
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• 2017

This study investigated the effect of pre-planting nitrogen (N) fertilization levels added to a soilless root medium on the growth of 'Dotaerang Dia' tomato seedlings. The N levels were varied for a total of 7 treatments: 0, 100, 250, 500, 750, 1,000, or $1,500mg{\cdot}L^{-1}$. The pH of the root media gradually rose in all treatments as the seedlings grew; however, the differences in the pH were not significant among the treatments. The electrical conductivity (EC) of the root media was significantly different among the treatments from sowing to week three, then drastically decreased after week four, which diminished the differences in the EC among the treatments. At week six, plant height, leaf length, leaf width, number of leaves, and fresh and dry weights of the shoot were highest for the treatment with $500mg{\cdot}L^{-1}N$. In contrast, the treatment with $1,500mg{\cdot}L^{-1}N$ had the lowest results for all growth measurements. The fresh weight was 67% heavier in the $500mg{\cdot}L^{-1}N$ treatment compared to the $1,500mg{\cdot}L^{-1}N$ treatment. The total N content in the tissues was lowest in the treatment with $0mg{\cdot}L^{-1}N$ and highest in the treatment with $1,000mg{\cdot}L^{-1}N$. The contents of calcium (Ca), magnesium (Mg), and metal micronutrients in the tissues were highest in the $250mg{\cdot}L^{-1}N$ treatment. A previous study demonstrated that adjusting the fertilization level to promote growth to over 90% of the maximum growth is a good strategy for lowering production costs and preventing damage due to excessive fertilizer absorption by crops. Our results indicated that the optimal pre-planting N fertilization level for tomato plug seedlings should be lower than $500mg{\cdot}L^{-1}$ and the optimum tissue N contents should be around 3.21% to 4.60%.

• 식물조직배양학회지
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• 제22권5호
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• pp.261-266
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• 1995

감귤류 속간교잡에 의하여 왜성화되고 내한성이 강한 신품종 개발에 대한 연구로서 황금유자와 탱자, 유자와 탱자의 정역교잡 및 잡종종자의 미숙배주 배양을 하였던 바 그 결과는 다음과 같다. 미숙배주의 callus형성은 탱자 < 유자 < 황금유자 $\times$ 탱자 < 황금유자 순서로 양호했는데, 1 ~ 3 mg/L + zeatin 0.5 mg/L 처리구에서 제일 좋았다. 황금유자와 탱자의 정역속간교잡 20주 후 기내에서의 발아율은 황금유자 $\times$ 탱자의 잡종이 41.3%, 탱자 $\times$ 황금유자의 잡종에서는 37.7%를 보였다. 황금유자 $\times$ 탱자의 F$_1$ 잡종 95%와 탱자 $\times$ 황금유자의 F$_1$ 잡종 100%는 탱자를 닮았다. 황금유자 $\times$ 탱자의 수분 후 3시간이면 화분은 계두상에서 발아하고, 24~28시간이면 화분관이 주공에 진입하며, 2일이면 극핵과 수정하며, 3일이면 난세포와 수정한다. 속간교잡의 결과율은 황금유자 $\times$ 탱자가 14.0%, 탱자 $\times$ 황금유자가 17.5%이었다. 황금유자와 탱자의 인공자가수정 결과율은 각각 45.4%, 27.5%이었으며 인공 타가수정 결과율은 34.2%, 39.5% 이었고, 단위결과율은 3.1%, 1.4%이였다. 또한 자연상 태에서의 결과율은 각각 13.0%, 3.0% 이었다. 황금유자, 유자, 탱자의 체세포와 생식세포 염색체수는 모두 2n=18, n=9 이었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제20권2호
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• pp.127-134
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• 1996

본 연구는 epidermal growth factor(EGF)가 처리된 돼지 체외성숙란의 수정능력을 조사하기 위하여 실시하였다. 돼지 미성숙란의 성숙을 위해서 배양액내에 EGF(10ng/ml)와 FSH(10$\mu\textrm{g}$/ml) 또는 FBS(10%)를 단독 혹은 공동 첨가함으로서 4처리군으로 처리하였다(1:무처리군, 2:EGF 단독 처리군, 3: FSH와 FBS 공동 처리군, 4: EGF와 FSH 그리고 FBS 공동 처리군). 그 결과 2, 3, 4 처리군의 핵성숙율은 무처리군보다 현저하게 높았다(P<0.001). 수정율에 있어서 EGF 단독 처리군의 경우 3과 4 처리군보다 낮았지만, 무처리군보다는 현저하게 높았다(P<0.05). 더욱이 EGF와 FSH 그리고 FBS의 공동 처리군의 경우 다른 모든 처리군에 비하여 정자 침입뿐만 아니라 웅성 전핵 형성율이 높았다(P<0.05). 따라서 돼지 난포란의 체외성숙시 EGF 단독 처리만으로는 핵성숙에 수반된 세포질 성숙률은 낮았지만, EGF와 FSH 및 FBS를 공동 처리했을 때 돼지 체외성숙란의 세포질 성숙도 효과적으로 유도된다는 것을 알 수 있다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제10권2호
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• pp.121-129
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• 1995

To examine the critical effect of oxygen concentration on embryonic development, in vitro fertilized embryos were cultured in media(TCM199 vs. SOF) supplemented sera(1O% FCS vs. 10% HS) with and without bovine oviduct epithelial cells under two gas atmosphere (5% $CO_2$ in air vs. 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 90% $N_2$). Oocytes, obtained from abattoir ovaries, were matured in EGF containing TCM199 medium co-cultured with BOEC for 24 hours, followed by exposure to frozen-thawed, heparin4reated spermatozoa in TALP for 30 hours. And then early embryos(1~2 cell) were cultured in both TCM199 and SOF supplemented with 10% FCS or 10% RS under 5% $CO_2$ in air or 5% COi, 5% $O_2$, 90% $N_2$. Development to morulae and blastocysts was recorded on days 7, after the start of in vitro fertilization. The developmental rates of in vitro fertilized embryos to morulae and blastocysts cultured in SOF with BOEC under 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 90% $N_2$(24.4%) were significantly(p<0.05) higher than cultured in SOF with BOEC under 5% $CO_2$ in air(14.1%) at seven days after in vitro fertilization. When early bovine embryos were cultured in TCM 199 and SOF under two different gas atmosphere, there were no significant differences in the developmental rates to morulae and blastocysts between supplements of 10% FCS and 10% HS. The rates of development to morulae and blastocysts were significantly(p<0.01) higher in TCM 199 with BOEC(24.7%) than TCM199 without BOEC(10.9%) under 5% $CO_2$ in air, otherwise SOF without BOEC(36.4%) were significantly (p<0.05) higher than in SOF with BOEC (24.4%) under 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 90% $N_2$. In summary, these experiments have proved that the culture system in SOF supplemented 10% ES is effective on in vitro development of early bovine embryos under 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 90% $N_2$. In addition, it is effective to development of bovine embryos that TCM 199 should be co-cultured with BOEC and SOF should be cultured without somatic cells under two different gas atmosphere.

• 한국자원식물학회지
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• 제25권2호
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• pp.285-292
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• 2012

본 연구는 사과의 자가불화합성 현상에 효과적인 저해제와 활력제를 탐색하기 위해 여러 종류의 물질을 조사하였다. 후지 사과의 화주조직에서 분비되는 S RNase에 대한 저해효과를 조사하기 위해 $In$ $vitro$ 상에서 효소 저해제를 넣어 효소활성을 측정한 결과, Iron(II) Sulfate에서 현저하게 활성이 24.3% 감소되어 저해효과가 뛰어난 것으로 나타났다. $In$ $vitro$ 상에서 후지 사과의 화분관 신장 억제 효과를 분석한 결과, 후지 사과의 화분은 2% Sucrose 신장배지 보다 10% Sucrose 신장배지에서 약 90% 이상의 높은 발아율을 나타났다. 또한 저해제와 첨가제 처리에 의한 안동지역과 영주지역의 Field에서 후지 사과 착과율 조사 결과, 안동지역에서는 $A^+$+V6 2회 처리가 86.1%로 중심화착과율이 가장 높았으며, 영주지역에서는 $A^+$+V1 1회 처리가 91.9%로 중심화 착과율이 가장 높은 것으로 나타났다.

• 화훼연구
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• 제19권4호
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• pp.231-237
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• 2011

본 연구는 알스트로메리아 두 개의 교배계통을 정역교배한 후 배주배양을 수행하였으며, RAPD 마커분석을 통하여 유전적 분배를 조사하였다. 수분 후 경과 14일에 수확하여 sucrose $60g{\cdot}L^{-1}$와 gelrite $2.2g{\cdot}L^{-1}$를 첨가한 MS배지에 half-ovule 배양이 가장 좋았다. 배양 6주후부터 배발생을 시작하여 4개월 후에 완전한 유식물체를 생성하였다. 7개의 프라이머를 사용하여 교배계통과 교배자손의 RAPD 분석을 수행하여 89개의 밴드 중 59개의 다형성 밴드를 얻었다. 정역교배에서 얻은 7개의 교배자손은 $X^2$ 분석 결과 부모본으로부터 1 : 1비율로 분배되는 것을 확인하였으며, 교배자손이 교배계통에서 얻은 것을 확신할 수 있었다. 알스트로메리아의 정역교배에서 교배조합에 따라 교배자손의 수가 다른 것은 주두 또는 화사와 화분의 불친화성을 가지는 수정 전 장벽이 있는 것으로 생각된다. 앞으로 알스트로메리아 육종을 위하여 수정 후 장벽과 함께 수정 전 장벽 또한 극복해야 할 것이다.

• Journal of Veterinary Science
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• 제24권1호
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• pp.4.1-4.16
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• 2023

Background: In vitro culture of preantral follicles is a promising technology for fertility preservation. Objectives: This study aims to investigate an optimized three-dimensional (3D) fetal bovine serum (FBS)-free preantral follicle culture system having a simple and easy operation. Methods: The isolated follicles from mouse ovaries were randomly divided in an ultra-low attachment 96-well plates supplement with FBS or bovine serum albumin (BSA) culture or encapsulated with an alginate supplement with FBS or BSA culture. Meanwhile, estradiol (E₂) concentration was assessed through enzyme-linked immunosorbent assay of culture supernatants. The diameter of follicular growth was measured, and the lumen of the follicle was photographed. Spindle microtubules of oocytes were detected via immunofluorescence. The ability of oocytes to fertilize was assessed using in vitro fertilization. Results: The diameters were larger for the growing secondary follicles cultured in ultra-low attachment 96-well plates than in the alginate gel on days 6, 8, and 10 (p < 0.05). Meanwhile, the E2 concentration in the BSA-supplemented medium was significantly higher in the alginate gel than in the other three groups on days 6 and 8 (p < 0.05), and the oocytes in the FBS-free system could complete meiosis and fertilization in vitro. Conclusions: The present study furnishes insights into the mature oocytes obtained from the 3D culture of the preantral follicle by using ultra-low attachment 96-well plate with an FBS-free system in vitro and supports the clinical practices to achieve competent, mature oocytes for in vitro fertilization.

• 한국수정란이식학회지
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• 제16권3호
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• pp.163-172
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• 2001

본 연구는 돼지 난포란의 체외성숙에 적합한 배양액을 조사하고, 아울러 산소농도가 돼지 난포란을 이용한 체외수정란의 생산에 미치는 영향을 구명하고자 실시하였다. 본 연구에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. NCSU-23과 TCM-199 배양액에 10% PFF를 첨가하여 5% 및 20% 산소조건하에서 체외성숙을 유기한 결과, 배양액 및 산소조건에 따른 난핵붕괴률 및 핵성숙률에는 유의적 (P>0.05)인 차이가 없었다. 2. NCSU-23이 TCM-199 배양액보다 다정자침입률 및 평균정자침입률에 있어서 유의적으로 낮은 결과를 나타냈고 (P>0.05), 5% 및 20% 산소농도에 따른 차이는 인정되지 않았다. 3. 체외수정을 실시한 후, 5% 및 20% 산소조건하에서 NCSU-23 배양액에서 배양하여 배발달에 미치는 영향을 조사한 결과, 배달달 2일째 배반포형성에 있어서는 NCSU-23 처리구가 TCM-199 처리구에 비해서 유의적 (P<0.05)으로 높은 결과를 나타냈다. 또한, 처리구별 배반포기의 총세포수를 조사한 결과 5% 및 20% 산소농도 사이에는 유의적인 차이가 인정되지 않았다. 따라서, 효과적으로 돼지 난포란을 이용하여 체외발달을 유기하기 위한 체외성숙조건은 20% 산소조건하의 NCSU-23 배양액이 적합한 것으로 사료된다.