Mammalian reproduction is regulated by a feedback circuit of the key reproductive hormones such as GnRH, gonadotropin and sex steroids on the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. In particular, the onset of female puberty is triggered by gain of a pulsatile pattern and increment of GnRH secretion from hypothalamus. Previous studies including our own clearly demonstrated that genistein (GS), a phytoestrogenic isoflavone, altered the timing of puberty onset in female rats. However, the brain-specific actions of GS in female rats has not been explored yet. The present study was performed to examine the changes in the activities of GnRH neurons and their neural circuits by GS in female rats. Concerning the drug delivery route, intracerebroventricular (ICV) injection technique was employed to eliminate the unwanted actions on the extrabrain tissues which can be occurred if the testing drug is systemically administered. Adult female rats (PND 100, 210-230 g BW) were anaesthetized, treated with single dose of GS ($3.4{\mu}g$/animal), and sacrificed at 3 hrs post-injection. To determine the transcriptional changes of reproductive hormone-related genes in hypothalamus, total RNAs were extracted and applied to the semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). ICV infusion of GS significantly raised the transcriptional activities of enhanced at puberty1 (EAP-1, p<0.05), glutamic acid decarboxylase (GAD67, p<0.01) which are known to modulate GnRH secretion in the hypothalamus. However, GS infusion could not change the mRNA level of nitric oxide synthase 2 (NOS-2). GS administration significantly increased the mRNA levels of KiSS-1 (p<0.001), GPR54 (p<0.001), and GnRH (p<0.01) in the hypothalami, but decreased the mRNA levels of LH-$\beta$ (p<0.01) and FSH-$\beta$ (p<0.05) in the pituitaries. Taken together, the present study indicated that the acute exposure to GS could directly activate the hypothalamic GnRH modulating system, suggesting the GS's disrupting effects such as the early onset of puberty in immature female rats might be derived from premature activation of key reproduction related genes in hypothalamus-pituitary neuroendocrine circuit.
Park, Woo-Dong;Ko, Hye-Yeon;Kim, Dae-Jung;Lee, Cheul-Ho;Sohn, Young-Chang
한국양식학회지
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제20권3호
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pp.154-159
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2007
Manchurian trout (Brachymystax lenok) is an endangered fish species in East Asia including the Korean peninsula. To establish a method for artificial propagation and to improve our understanding of the reproduction in the species, we have produced recombinant gonadotropins, follicle-stimulating hormone (r-mtFSH) and luteinizing hormone (r-mtLH), which may play central roles in reproductive activities. In the present study, the biological activities of the recombinant hormones were analyzed by gonadosomatic index (GSI), ovarian follicle diameter, and sex steroid levels in mature rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). In the 6th day post-injection, FSH-injected fish were slightly decreased in the GSI value, although there were no significant differences among those of control, r-mtFSH, and r-mtLH treatments. Injection of the r-mtFSH increased follicle diameters significantly as compared with those of control- and r-mtLH-injected fish. The plasma steroid levels showed wide differences in the groups at 1, 3, or 6th day post-injection. Despite the variable steroid levels, three individuals receiving either r-mtFSH or r-mtLH showed a great increase in a maturation-inducing steroid, $17{\alpha},20{beta}$-dihydroxy-4-pregnen-3-one, at 3 and 6 days. Taken together, these results suggest that biological efficacies of the recombinant FSH and LH should be further studied in the Manchurian trout.
In many fish species, including Nile tilapia (Oreochromis niloticus), gonadal development occurs at the expense of stored energy and nutrients. Therefore, reproductive systems are inhibited by limited food supply. It has been well established that reproductive function is highly sensitive to both metabolic status and energy balance. Nothing is known about the possible mediated connection between energy balance and reproduction. Kisspeptin, a neuropeptide product of the Kiss gene has emerged as an essential gatekeeper of reproduction and may be possibly be linked to energy balance and reproduction in non-mammalians. Thus, in this study, the effect of fasting (10 days) on the expression of kisspeptin and the gonadotropin-releasing hormone (GnRH) gene were assessed in Nile tilapia (male and female) using qRT-PCR. In addition, plasma levels of estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$) and 11-ketotestosterone (11-KT) in adult tilapia were measured by ELISA. In male tilapia, fasting reduced Kiss2 and GnRH I mRNA expression in the brain and 11-KT level in comparison with the fed tilapia (p < 0.05). In females, however, there were no significant differences in GnRH I mRNA expression and $E_2$ between fish subjected to fasting and those fed (p > 0.05). These data indicate the impact of nutritional states on kisspeptin as a potential regulatory mechanism for the control of reproduction in male Nile tilapia.
Objective: There is increasing evidence for the expression of rat in gene in several extrapituitary sites including testis and ovary. We also have demonstrated that the local LH expression in the rat epididymis and uterus, the major accessory sex organs in male and female reproductive system, respectively. Design: The present study was undertaken to elucidate whether the gene for LH receptor is expressed in rat uterus and whether the expressions of uterine LH and its receptor are differentially regulated during estrous cycle. Presence of the transcripts for rat LH receptor in the rat uterine tissue were confirmed by touchdown reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: In $LH{\beta}$ semi-quantitative RT-PCR, the highest expression level was shown in estrus stage. The level of ill receptor transcripts was also fluctuated during estrous cycle. In ovariectomized rats (OVX + Oil), the expressions of both uterine LH and LH-R were markedly reduced when compared to those from normal rats. Supplement with estradiol $17{\beta}$ to the ovariectomized rats (OVX + $E_2$) restored the expression levels of LH and its receptor to the levels in uteri from normal rats. Conclusion: Our findings indicated that 1) LH and its receptor gene are expressed in the rat uterus from cycling rats, 2) the expression of uterine LH and its receptor is mainly, if not all, under the control of ovarian sex steroid(s). These results suggested that the uterine LH may act as a local regulator with auto and/or paracrine manner, though the posibility that the pituitary LH may act directly on the regulation of uterine functions could not be discarded.
Leptin, the product of the ob gene, is a small peptide molecule synthesized by white adipocytes with an important role in the regulation of body fat and food intake. Based on the evidence that synthesis of leptin is regulated by female sex hormone, estrogen, this present study was investigated whether sex hormone precursor DHEA, can regulate obese gene expression in lean and genetically obese (ob/ob) mice. Antiobesity activity of DHEA was evaluated by determining body weight, food consumption, epididymal fat weight and serum levels of cholesterol and triglyceride in ICR, C57BL/6J, and ob/ob mice. The treatment of C57BL/6J lean and obese mice with a diet containing 0.3% and 0.6% DHEA resulted in lowered rates of weight gain in comparison to non-treated mice, although much greater response was found in the obese mice. All other concentrations of DHEA (0.015%, 0.06%, 0.15%, 0.3%) except the highest one(0.6%) showed no significant effects on weight gain in ICR mice. Food consumption was significantly decreased in all mice treated with 0.6% DHEA, whereas it was not decreased in ICR mice at lower concentrations than 0.6% DHEA. DHEA decreased significantly epididymal adipose tissue weight and serum triglyceride levels dose dependently in lean and obese mice. However serum cholesterol levels were decreased at lower concentrations than 0.15% DHEA and increased at concentrations of 0.3% and 0.6% DHEA in lean and obese mice. These increases in serum cholestrol levels at high concentrations of DHEA might result from the fact that DHEA has a cholesterol moiety thereby interfered the assay system. As an approach to elucidate the mechanism for antiobesity activity of DHEA, we examined mRNA levels of obese gene in the adipocyte and obese gene product (leptin) in the serum. The results showed that DHEA did not affect obese gene expression in ICR and C57BL/6J mice. Therefore, we concluded that antiobesity activity of DHEA was not modulated by obese gene expression.
Oyster (Crassostrea gigas) is a marine bivalve mollusk widely distributed in coastal areas, and have been long widely used in industrial resources. Several studies demonstrated that fermented oyster (FO) extract attribute to bone health, but whether administration of FO play as an endocrine disruptor has not been studied. Therefore, in the present study, we investigated the effect of FO on the endocrine system in vitro and in vivo. As the results of the competitive estrogen receptor (ER) and androgen receptor (AR) binding affinities, FO was not combined with ER-α, ER-β, and AR. However, 17β-estradiol and testosterone, used as positive control, were interacted with ER and AR, respectively. Meanwhile, oral administration of 100 mg/kg and 200 mg/kg of FO doesn't have any harmful effect on the body weight, androgen-dependent sex accessory organs, estrogen-dependent-sex accessory organs, kidney, and liver in immature rats. In addition, FO supplementation has no effect on the serum levels of luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH), testosterone, and 17β-estradiol. However, the relative weight of androgen- and estrogen-dependent organs were significantly increased by subcutaneously injection of 4.0 mg/kg of testosterone propionate (TP) and by orally administration of 1.0 ㎍ of 17α-ethynyl estradiol (EE) in immature male and female rats, respectively. Furthermore, TP and EE administration markedly decreased the serum LH and FSH levels, which are similar those of mature Sprague-Dawley (SD) rat. Furthermore, the testosterone and 17β-estradiol levels were significantly enhanced in TP and EE-treated immature rats. Taken together, our findings showed that FO does not interact with ER and AR, suggesting consequentially FO does not play as a ligand for ER and AR. Furthermore, oral administration of FO did not act as an endocrine disruptor including androgenic activity, estrogenic activity, and abnormal levels of sex hormone, indicating FO may ensure the safety on endocrine system to develop dietary supplement for bone health.
Ikram, Muhammad Maulana Malikul;Esyanti, Rizkita Rachmi;Dwivany, Fenny Martha
Journal of Plant Biotechnology
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제44권3호
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pp.229-234
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2017
Photoperiod is one of the factors affecting productivity of cucumber plant by inducing ethylene hormone production and so triggering flower sex differentiation into female flower. However, only few studies have been perfomed in order to reveal the effect of photoperiod in molecular level in relation to the flower differentiation. Therefore, in this study, Mercy cultivar of cucumber (andromonoecious) was treated with photoperiod of 8, 12, 16 hours of light, while control received no treatment of additional light. Photoperiod of 8 hours was achieved by blocking the sunlight with shade net and 16 hours by giving longer light exposure using white LEDs. Cucumber's flowers were quantified and the apical and lateral shoots were extracted to evaluate the gene profile related to the photoperiod, ethylene production, and female flower differentiation, which were CsACS2, CsETR1, CsCaN, and CsPIF4 using PCR method. Photoperiod of 8 hours affected the production of female flower with average number of 6.7 flowers in main stem and 8.0 flowers in lateral stem, compared to photoperiod of 12 and 16 hours which produced 3.7 and 2.0 flowers in main stem with 7.0 and 11.3 in lateral stem, respectively. In silico studies in this experiment resulted in proposed model of signal transduction that showed the connection between ethylene production and flower differentiation. PCR analysis confirmed the expression of CsACS2, CsETR1, and CsCaN, that was positively correlated with numbers of female flowers in cucumber, but the expression of CsPIF4 that represent photoperiod haven't been confirmed correlated with the ethylene production and flower differentiation.
Kim, Jinsup;Yang, Aram;Jang, Ja-Hyun;Cho, Sung Yoon;Jin, Dong-Kyu
Journal of mucopolysaccharidosis and rare diseases
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제3권1호
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pp.28-32
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2017
Lipoid congenital adrenal hyperplasia (LCAH) is the severe form of congenital adrenal hyperplasia and is characterized by adrenal insufficiency with hyperpigmentation and female external genitalia irrespective of genetic sex. The steroidogenic acute regulatory protein (StAR) is required for the transport of cholesterol into the mitochondria for steroidogenesis, and defects in the StAR gene account for the majority of LCAH cases. In this report, we present a two-day-old hyperpigmented infant with phenotypical female genitalia. With consideration of the clinical and laboratory findings, the infant was suspected of having adrenal insufficiency due to LCAH and treated with glucocorticoid, mineralocorticoid, and sodium chloride. Karyotyping revealed 46, XY. Upon pelvis ultrasonography, adrenal hyperplasia with abdominal masses (thought to be the testicles) was reported. Molecular analysis with targeted exome sequencing revealed the homozygote mutation of c.772C>T ($p.Q258^*$) in exon 7 of the StAR gene. The early detection and treatment of adrenal insufficiency in infants with hyperpigmentation can prevent clinically apparent adrenal crises. During follow-up, the patient had a good clinical condition and maintained normal electrolyte and adrenocorticotropic hormone levels with medication.
프탈레이트 에스테르는 플라스틱 가소제로서 이용되며 또한 유제품과 같은 음식에서 미량으로 발견되고, 종종 내분비 교란물질로 의심되고 있다. 본 연구의 목적은 DBP, DINP 또는 DEHA의 주산기 노출이 랫트에 있어 성 성숙 후, 번식기능 특히 뇌의 성분화에 어떤 영향을 끼치는 지에 대해 조사하였다. 이를 수행하기 위해서, 어미에게 식물성 에스트로겐의 함유가 낮은 분말 사료에 다음과 같은 단계적 농도의 DBP (20, 200, 2000, 10000 ppm), DINP (40, 400, 4000, 20000 ppm), DEHA (480, 2400, 12000 ppm)를 혼합한 후, 임신 15일째부터 출생 후, 21일째 (이유기)까지 섭취 시켰고, 성 성숙 후, 혈청 성호르몬 및 성선자극호르몬의 레벨과 교배행동 및 성주기 회귀를 분석하였다. 그 결과, DBP, DINP 또는 DEHA의 주산기 노출에 의한 생후 20~21주째의 암수 랫트에 있어, 성호르몬 및 성선자극호르몬의 레벨뿐만 아니라 암컷의 성주기의 회귀에 대해 어떠한 영향을 주지 않았다. 이것은 시상하부-하수체-성선축의 내분비계를 제어하는 뇌의 성분화에는 이들 화학물질이 영향을 주지 않았다는 사실을 시사한다. 하지만, 수컷의 성행동 특히, 사정 (ejaculation)과 암컷의 로도시스 반응이 억제되는 것이 관찰되었다. 이러한 결과로부터 DBP, DINP 또는 DEHA의 주산기 노출은 성선자극 호르몬의 분비에는 영향을 주지 않지만, 성행동을 제어하는 시상하부의 어떤 영역에 직접적으로 작용할 가능성 즉, 뇌의 성분화에 영향을 끼쳐 성 성숙 후, 성 특이적 행동을 억제시킬 가능성을 시사한다.
Heo, You Jung;Ko, Jung Min;Lee, Young Ah;Shin, Choong Ho;Yang, Sei Won;Kim, Man Jin;Park, Sung Sub
Annals of Pediatric Endocrinology and Metabolism
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제23권4호
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pp.220-225
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2018
Androgen insensitivity syndrome (AIS) is a rare genetic disease caused by various abnormalities in the androgen receptor (AR). The AR is an essential steroid hormone receptor that plays a critical role in male sexual differentiation and development and preservation of the male phenotype. Mutations in the AR gene on the X chromosome cause malfunction of the AR so that a 46,XY karyotype male has some physical characteristics of a woman or a full female phenotype. Depending on the phenotype, AIS can be classified as complete, partial or mild. Here, we report 2 cases of complete AIS in young children who showed complete sex reversal from male to female as a result of AR mutations. They had palpable inguinal masses and normal female external genitalia, a blind-end vagina and absent $M{\ddot{u}}llerian$ duct derivatives. They were both 46,XY karyotype and AR gene analysis demonstrated pathologic mutations in both. Because AIS is inherited in an X-linked recessive manner, we performed genetic analysis of the female family members of each patient and found the same mutation in the mothers of both patients and in the female sibling of case 2. Gonadectomy was performed in both patients to avoid the risk of malignancy in the undescended testicles, and estrogen replacement therapy is planned for their adolescence. Individuals with complete AIS are usually raised as females and need appropriate care.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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