A formalized bacterin(FKC) of Edwardsiella tarda, conjugated with/without Freund's complete adjuvant(FCA), Freund's incomplete adjuvant(FIA) and potassium aluminium sulfate(PAS), was administered by intraperitoneal injection to tilapia respectively. The tilapia were reared under indoor recirculating filter system. There were agglutinin titer increment in the tilapia which were administered not only FKC bacterin but also adjuvanted vaccines. But the producing time of the highest level of antibody in the immunized tilapia was different among vaccine preparation, i. e. FKC+FCA group and PAS+FKC group are between the 2nd and the 4th week, and FKC alone group is the 2nd week. In the challenge experiment with $2.5{\times}10^7\;CFU/ml$ or $2.5{\times}10^8\;CFU/ml$ of E. tarda T1123 to the tilapia immunized with vaccines, RPS above sixty was recorded both challenge dose in the tilapia which were 3 weeks after immunization with FKC+FCA, PAS+FKC and FKC alone, and the former dose 8 weeks after immunization with FCA+FKC and PAS+FKC. There were some resistance enhancement against E. tarda in the tilapia which were injected with adjuvant alone than that of control. As the results, the FCA or PAS adjuvanted vaccine is effective to sustain the defensible period against edwardsiellosis.
Ryu, Jong Hyuk;Lee, Jeong Ah;Ko, Jae Young;Hwang, Jae Sung
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.48
no.1
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pp.11-24
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2022
It has been reported that the ethanolic extract of the root of Piper methysticum (P. methysticum) inhibits melanogenesis in melanocyte stimulating hormone (MSH)-activated B16 melanoma cells. Flavokawain B (FKB) and Flavokawain C (FKC) isolated from this extract have been found to inhibit melanin production based on anti-melanogenesis activity. This study was designed to find out the inhibition and its process of FKB and FKC on melanin synthesis in melan-a melanocytes. FKB and FKC inhibited melanogenesis at 10 μM, 5 μM respectively in melan-a melanocytes. However, they did not inhibit extracellular tyrosinase activity from melan-a melanocytes. FKB reduced the protein level of tyrosinase (Tyr), tyrosinase-related protein 1 (TRP-1), tyrosinase-related protein 2 (TRP-2), microphthalmia-associated transcription factor (MITF) and the mRNA level of Tyr and TRP-1. FKC reduced the protein level of TRP-2 and MITF and the mRNA level of TRP-1 and Tyr. The reduced expression of Tyr and TRP-1 might be resulted from the decreased MITF which regulates major melanogenic proteins. However, since the mRNA expression of MITF did not change by FKB and FKC treatment, the effects of FKB and FKC on extracellular signal regulating kinase (ERK)/AKT phosphorylation, known to regulate the degradation of MITF, were confirmed. FKB and FKC significantly increased the phosphorylation of ERK1/2, not in AKT. These results suggest that FKB and FKC may be helpful as a potential depigmenting agent for various hyper-pigmentary disorders.
To study the supplementaing effects of kugija, Lycium chinense, in commercial diet on the immune response of nile tilapia, Oreochromis niloticus, nonspecific immune responses were investigated. The activities of complement and lysozyme were higher in sera of the fish fed diet with kugija than control diet. The effects of kugija on vaccination of fish to Edwardsiella tarda were compared in three different vaccination methods after feeding kugija for ten weeks. Intraperitoneal injection and bath administration with formalin killed cells (FKC) and bath with extracellular products (ECP) after injection of FKC showed differences in immune responses of vaccinated fish. Bath administration with ECP after injection of FKC was more stimulated than any other methods in each of nonspecific and specific responses such as the activities of complement and lysozyme, antibody production and rosette forming cells. Moreover, cumulative mortality was significantly lower in the fish vaccinated with combination FKC and ECP after injection challenge with live E. tarda.
The immunogenicity of Edwardsiella tarda was surveyed under two different culture conditions. In SDS-PAGE patterns of the outer membrane proteins (OMPs) extracts of E. tarda, grown under Trypic soy broth (TSB) and TSB supplemented iron chelate 2,2‘-dipyridyl iron-restricted condition, were examined. The results showed that the iron-regulated outer membrane protein (IROMPs) with molecular masses of 68 and 73 kDa were expressed by bacteria grown in iron-chelate TSB.The pathogenicity was examined by intraperitoneal injection with live E. tarda grown under TSB, iron-chelate TSB and iron-supplemented TSB. The result of pathogenicity test showed significantly high mortality in the group of live E. tarda grown under iron-chelate TSB.The effect of formalin killed cell (FKC) of TSB cultured bacteria and 2,2'-dipyridyl FKC (DP-FKC) of cultured bacteria on the iron-chelate TSB on the development of protective immunity in olive flounder was studied. The level of immune response was evaluated with immunized fish at 1, 2, 3 and 4 weeks after immunization. The numbers of specific antibody secreting cells (SASCs) showed significantly increased level at 2 week after immunization in each group. The agglutination titre of immunized fish was significantly high level at 3 weeks after immunization.The level of protection in olive flounder at 1, 2, 3 and 4 weeks after vaccination was examined by intraperitoneal challenge test with live E. tarda.
This study was carried out in order to investigate the immunosuppressive factor and immune response of color carp. The protection and serum antibody production of juvenile color carp aganist Aeromonas hydrophila were investigated on the effect of temperature differences and injected several aquatic drugs, i.e. Hydrocortisone, Oxytetracycline, Chloramphenicol and Ascorbic acid. The fish were injected intraperitoneally with 1mg/fish of HKC and FKC at three different temperature conditions as $16^{\circ}C$, $24^{\circ}C$, and $32^{\circ}C$ respectively. There were induced better protection and serum antibody production in the fish which had been kept at $24^{\circ}C$ than in the fish which had been kept at $16^{\circ}C$ and $32^{\circ}C$. The FKC immunized fish were followed 24 hrs later with intraperitoneal injection of 40mg/kg body weight of Hydrocortisone, 60mg/kg body weight of Oxytetracycline. 60mg/kg body weight of Chloramphenicol and 30mg/kg body weight of Ascorbic acid, respectively. The control fish were injected PBS only. The fish given the above aquatic drugs reduced serum antibody production level and protection rate when compared to control fish. As the results, immune response of juvenile color carp immunized FKC at $24^{\circ}C$ was more effective than $16^{\circ}C$ or $32^{\circ}C$ and immune response of juvenile color carp injected several aquatic drugs which was seemed to be immunosuppressive factor.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.42
no.4
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pp.311-320
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2016
Kava (Piper methysticum, P. methysticum) is used as traditional herbal medicine for urogenital diseases, rheumatisms, gastrointestinal problems, respiratory irritations, and pulmonary pains. We identified a flavokavain C (FKC) from P. methysticum, which showed anti-inflammatory activity on nuclear factor ${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$)-dependent nitric oxide (NO) production and expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW264.7 macrophages. FKC inhibited accumulation of reactive oxygen species (ROS), such as hydrogen peroxide, and was able to dose-dependently reduce the LPS-induced NO production and the expression of various inflammation-associated genes (iNOS, IL-$1{\beta}$, IL-6) through inhibition of NF-${\kappa}B$ and MAPKs (ERK and JNK). In conclusion, these results indicate that FKC may have the potential to prevent inflammation process including NF-${\kappa}B$ and MAPKs pathways, and it could be applicable to functional cosmetics for anti-inflammation and antioxidant properties.
Adjuvants are immune enhancers that are often used in vaccination to augment the immune response of a vaccine, thereby enhancing the protective immunity against the targeted disease. In the present study, we used the recombinant protein, such as rRbCC1, this protein was produced from rock bream CC chemokine 1. To verify the adjuvant effects of this recombinant protein, the immune responses of rock bream to Streptococcus iniae (S. iniae) FKC vaccination, which alone or in combination with recombinant protein was analyzed and then also performed experimental challenge with live S. iniae. The result of serum agglutination titres was showed relatively low levels however, the efficacy of FKC vaccine still conferred protection against S. iniae. Moreover, the adverse effects result showed that no statistically significant difference was revealed between high concentration injected and non-injected fish groups, generally. The relative percent survival (RPS) of FKC + recombinant vaccination group was significantly higher than that of vaccinated group with FKC alone. After experimental challenge to the rock bream by injection with live bacteria (S. iniae), the FKC + rRbCC1 vaccination group was showed 87.0% RPS, however, the RPS of FKC alone vaccination was 68.2%. The results indicated that the recombinant protein as an adjuvant had a clear synergism to injection vaccine of rock bream.
To study the immune responses of the japanese eel. Anguilla japonica, fish were injected intraperitoneally with several types of Edwardsiella tarda antigen, i. e., FKC(formalin killed cells), HKC(heat killed cells) or LPS(lipopolysaccharide), and the changes of immunocytes numbers, phagocytosis and agglutination titre in the peripheral blood of the fish were investigated. The number of lymphocytes in the peripheral blood of eels were decreased until 6 hours after injection, and then were turn to normal levels after 24 hours of injection. However, the level were slightly increased and were remained after 24 hours. The number of neutrophils of FKC, HKC or LPS injected fish were the highest at 12 hours after injection and were decreased slowly after that. Three weeks after the injections, the agglutination of antibody titre of all immunized groups were reached at 128 and were remained this level thereafter. However 6 weeks after the injections, that in HKC injected fish were dropped the level up to 4. Fish were injected with LPS and the blood from the fish were bled after 12 hours. Then the blood were incubated with E. tarda. Six hours after incubation, the phagocytic index was reached the highest level, 28.3. One week after the LPS injection, the blood were again bled and incubated with E. tarda. The phagocytic index at this time was 3.9. The phagocytic indexes of the fish injected with FKC and HKC, treted as same LPS injected fish as above, were 18.8 and 10.7, respectively. The phagocytic index of the control fish was 1.2. The antibacterial activities of normal antiserum against E. tarda were shown for both FKC and LPS injected fish, but not for HKC injected fish. The RPS(relative percentage of survival) of HKC, FKC and LPS injected fish in the challenge test were 10%, 20% and 30%, respectively. These results suggest that the effect of protection of the eel which were injected with antigen were varied with the method of preparation of the antigen.
Miamiensis avidus is a scuticociliate causing mortality in olive flounder Paralichthys olivaceus. To evaluate immune response of olive flounder against M. avidus, 2.6×106cells/fish of Formalin killed cell (FKC) was intraperitoneally (i.p.) injected, and 2.4 × 106cells/㎖ of sonicated FKC was immersion immunized to 14.9 cm (26.8g) fish. Fish were immunized 2 times with 2 weeks intervals. Antiserum from immunized fish caused agglutination and immobilization of the ciliate. In ELISA test, immunized group exhibited higher titers than control group. In addition, i.p. immunized fish showed higher phagocytic ratio, phahgocytic index and chemotaxic activity. To evaluate in vivo efficacy of FKC on fish, 1.43 × 105cells/fish was i.p.. injected, and 2.2 × 105 cells/㎖ of sonicated cell was immersed into 8.6cm (6.3g) fish. After 2 times immunization with 2 weeks intervals, fish were infected with 2.0 × 104 and 2.0 × 103 cells/ml of live ciliates by immersion. After 3 weeks, cumulative mortality was lower in the i.p. immunized group and mortality was delayed in immersion immunized group. In conclusion, specific immune response of oliver flounder against M. avidus was elevated after immunization and these immune response may prevent and/or delay for the M. avidus infection to olive flounder.
We investigated solar flare occurrence probability depending on sunspot group classification and its area change. For this study, we used the McIntosh sunspot group classification and then selected most flare-productive six sunspot groups : DKI, DKC, EKI, EKC, FKI and FKC. For each group, we classified it into three sub-groups according to the sunspot group area change : increase, steady and decrease. For sunspot data, we used the NOAA's active region information for 19 years (from 1992.01 to 2010.12). As a result, we found that the probabilities of the all "increase" sub-groups is noticeably higher than those of other sub-groups. In case of FKC McIntosh sunspot group, for example, the M-class flare occurrence probability of the "increase" sub-group is 65% while the "decrease" and "steady" sub-groups are 50% and 44%, respectively. In summary, when sunspot group area increases, the probability of solar flares noticeably increases. This is statistical evidence that magnetic flux emergence is an very important mechanism for triggering solar flares.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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