• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제16권3호
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• pp.1235-1239
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• 2015

Background: Fragile histidine triad (FHIT) gene is a tumor suppressor gene which involved in breast cancer pathogenesis. Epigenetics alterations in FHIT contributes to tumorigenesis of breast cancer. Objective: Our objective was to study FHIT promoter region hypermethylation in Egyptian breast cancer patients and its association with clinicopathological features. Materials and Methods: Methylation-specific polymerase chain reaction was performed to study the hypermethylation of FHIT promoter region in 20 benign breast tissues and 30 breast cancer tissues. Results: The frequency of hypermethylation of FHIT promoter region was significantly increased in breast cancer patients compared to bengin breast disease patients. The Odd's ratio (95%CI) of development of breast cancer in individuals with FHIT promoter hypermethylation (MM) was 11.0 (1.22-250.8). There were also significant associations between FHIT promoter hypermethylation and estrogen, progesterone receptors negativity, tumor stage and nodal involvment in breast cancer pateints. Conclusions: Our results support an association between FHIT promotor hypermethylation and development of breast cancer in Egyptian breast cancer patients. FHIT promoter hypermethylation is associated with some poor prognostic features of breast cancer.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제16권18호
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• pp.8197-8201
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• 2016

Background: To investigate the expression of the fragile histidine triad (FHIT) gene in acute lymphoblastic leukemia and its clinical significance. Materials and Methods: The level of expressed FHIT mRNA in peripheral blood from 50 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and in 50 peripheral blood samples from healthy volunteers was measured via RT-PCR. Correlation analyses between FHIT gene expression and clinical characteristics (gender, age, white blood count, immunophenotype of acute lymphoblastic leukemia and percentage of blast cells) of the patients were performed. Results: The FHIT gene was expressed at $2.49{\pm}7.37$ of ALL patients against $14.4{\pm}17.9$ in the healthy volunteers. The difference in the expression levels between ALL patients and healthy volunteers was statistically significant. The rate of gene expression did not significantly vary with immunophenotype subtypes. Gene expression was also found to be correlated with increase of total leukocyte and decrease in platelets, but not with age, gender, immunophenotyping or percentage of blast cells. Conclusions: FHIT gene expression is low in acute lymphoblastic leukemia and could be a useful marker to monitor minimal residual disease. This gene is also a candidate target for the immunotherapy of acute lymphoblastic leukemia.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제56권5호
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• pp.450-464
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• 2004

연구배경 : FHIT 유전자의 homozygous deletion과 이와 관련된 mRNA 발현 이상, 단백질의 발현 결손은 폐암에서 매우 높은 빈도로 관찰되고 있다. 일부 연구에 의하면 FHIT 유전자를 폐암 세포 내에 이입시켰을 때 apoptosis가 유발되었고, 세포 주기의 이상 소견이 관찰되었으며, 종양형성 능력이 억제됨이 관찰되었다. 하지만 아직까지 FHIT 단백질의 기능에 대한 지식은 미진한 상태이다. 본 연구에서는 FHIT 유전자를 폐암 세포에 이입시켰을 때 유발되는 apoptosis의 기전을 규명하고자 하였다. 방 법 : FHIT 유전자가 결손된 NCI-H358 세포주에 FHIT 유전자를 stable transfection 시킨 후, cisplatin 혹은 paclitaxel을 가하고 apoptosis가 항진되어 나타나는가를 DAPI staining과 flow cytometry로 관찰해 보았다. 또한 이 과정에서 나타나는 caspase system의 변화와 Bcl-2 family의 변화를 Western blotting으로 조사해 보았다. 결 과 : FHIT를 발현시킨 세포에서는 cisplatin 혹은 paclitaxel을 투여하였을 때 유의하게 생존율이 감소하였으며, 이는 apoptosis 증가에 의한 것으로 확인 되었다. 이 과정에서 FHIT가 발현된 세포는 caspase-3, caspase-7의 활성화가 유의하게 증가되었으며, Bcl-2와 Bcl-xL 발현은 유의하게 감소하고 Bax와 Bad 발현은 유의하게 증가하였다. 결 론 : FHIT가 발현된 폐암 세포에 항암제를 투여하였을 때 유의하게 증가한 apoptosis는 caspase system과 Bcl-2 family의 활성화와 관련되어 있다.

• Journal of Gastric Cancer
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• 제3권1호
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• pp.26-32
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• 2003

Purpose: Genomic alterations and abnormal expression of the fragile histidine triad (FHIT) gene in gastric cancer were examined to determine whether the FHIT gene is actually a frequent target for alteration during gastric carcinogenesis. Materials and Methods: To correlate DNA and RNA lesions of the FHIT gene with the effect on FHIT protein expression, in 40 gastric cancers, we investigated the FHIT gene for loss of heterozygisity (LOH), aberrant transcripts, and protein expression. Results: Allelic loss at D3S1300 was detected in 7 of 38 ($19\%$) informative cases. Aberrant transcripts were observed in 20 of 40 ($50\%$) cases. Significant reduction of FHIT protein expression was observed in 22 of 40 ($55\%$) cases. Aberrant FHIT transcription was shown to be associated with loss of FHIT protein expression. However, aberrent FHIT transcripts themselves were not associated with any clinicopathological parameters, such as age, sex, tumor site, or clinical stage. Moreover, there was no association between the presence of LOH at D3S1300 and the expression of aberrant FHIT transcripts. Conclusion: The high frequency of aberrant FHIT transcripts, the significant rate of LOH at D3S1300, and the altered expression of the FHIT protein indicate that alterations of the FHIT gene can play an important role in gastric carcinogenesis.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제54권6호
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• pp.610-620
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• 2003

연구배경 : 폐암에서 가장 흔한 염색체 결손부위인 3p14.2 결손에 따른 FHIT 자체 기능 즉 암억제 기능의 소실이 폐암의 형성과정에 중요한 기능이 있으리라 생각된다. 흡연 여부, 병리조직학적, TNM 병기 진행에 따른 FHIT 소실여부를 확인하고, 또 흡연및 생존률과의 관계, FHIT의 기능 특히 암 세포의 세포고사, 세포분열에 미치는 영향을 확인하였다. 방 법 : 원발성 비소세포 폐암으로 근치적 절제술을 시행 받은 83례의 paraffin 보관 병리 조직을 절편하여 면역조직화학염색법으로 FHIT의 소실 여부를 확인한 후, 여러 임상적 인자들과의 관계를 파악하고, 유식세포 분석법에 의해, sub-G1 peak로서 세포고사의 정도를, S-phase fraction과 G1-phase fraction으로서 세포분열주기에 미치는 영향을 확인하였다. 결 과 : 전체 83례 중 36례(43%)에서 FHIT가 소실되었고, FHIT 소실율이 편평상피암 52%, 선암 22%; TNM I병기 30%, II병기 48%, III 병기 69%; 흡연경험자 54%, 비흡연자 22%로서, 선암보다는 편평상피암에서, TNM 병기가 진행할수록, 흡연의 경험이 있을수록 FHIT 소실율이 높았다. FHIT 소실군과 발현군의 중간 생존기간은 24개월, 25개월, 2년 생존율은 44%, 51%로서 FHIT 소실여부에 따른 생존율의 차이는 없었다. 세포고사율은 FHIT 소실군과 발현군에서 각각 50.72(${\pm}13.93$)%, 59.38(${\pm}14.33$)%로서 유의한 차이가 있었으며, FHIT 소실군과 발현군에서의 S-phase fraction은 각각 13.93(${\pm}7.35$)%, 15.65(${\pm}6.59$)% G1-phase fraction은 각각 51.50(${\pm}23.15$)%, 54.16(${\pm}20.25$)%로서 각 군간의 유의한 차이는 없었다. 결 론 : FHIT는 인체의 비소세포 폐암의 43%에서 소실되었고, 흡연의 경험이 있을수록, 선암보다는 편평상피암일수록, TNM 병기가 진행할수록 유의하게 FHIT 소실이 높았고, FHIT 소실여부에 따른 생존율의 차이는 없었다. FHIT 소실군에서 발현군보다 세포고사율이 유의하게 낮았으며, S 및 $G_1$ phase fraction의 차이는 없었다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제45권5호
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• pp.984-991
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• 1998

연구배경: 폐암을 포함한 여러 종양에서 3p의 allelic loss가 매우 흔하게 관찰된다는 것은 널리 알려진 사실이다. 따라서 이 구역에 암억제유전자가 존재할 가능성이 높다고 생각되어 과거부터 이에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 하지만 현재까지는 몇몇 후보 유전자들이 밝혀져 있을 뿐, 확실한 암억제유전자를 규명해내지는 못하고 있는 실정이다. FHIT(Fragile Histidine Triad) 유전자는 최근 주목을 받고 있는 후보 암억제유전자로서 3p14.2에 위치하고 있으며 식도, 위, 두경부암 등의 여러 종양에서 이 위치의 homozygous deletion이 보고된 바 있다. 서열 분석상 이 유전자는 human genome 중 손상에 가장 취약한 곳중 하나인 FRA3B fragile site와 신세포암에서 잘 발견되는 t(3;8) chromosomal translocation의 breakpoint를 포함하고 있다. 이러한 구조적 특정과 함께 폐암에서 3p의 allelic loss가 특히 높은 빈도로 나타난다는 점에 주목하여, 연자들은 폐암 세포주를 대상으로 FHIT 유전자의 발현 이상을 살펴봄으로써 암억제유전자로서의 가능성을 평가하고자 하였다. 방 법: 총 21개 세포주(비소세포폐암 : 16, 소세포폐암 : 5)를 배양하여 RNA를 분리하였고 reverse transcription을 시행하여 single-strand cDNA를 합성하였다. 이후 FHIT 유전자의 exon 5에서 exon 9에 해당하는 coding region을 PCR로 증폭하였다. 이 PCR product를 ethidium bromide로 염색된 1.5 % agarose gel에서 전기영동시킨 후 band를 관찰하였다. 결 과: 총 21개 폐암 세포주중 12개(57%) 세포주에서 비정상적인 band가 관찰되거나(3개), band가 관찰되지 않았다(9개). 16개의 비소세포폐암 세포주중 7개 (44%)에서 비정상적인 band가 관찰되거나(2개), band가 관찰되지 않았다(5개). 5개의 소세포폐암 세포주에서는 5개(100%) 모두에서 비정상적인 band가 관찰되거나(1개), band가 관찰되지 않았다 (4개). 결 론: 이러한 결과를 살펴볼 때, FHIT 유전자의 발현 이상은 폐암, 특히 소세포폐암에서 높은 빈도로 관찰되었으며, 이는 FHIT 유전자가 폐암 발생에 있어서 중요한 암억제유전자일 것이라는 가설을 뒷받침하는 소견이라 생각된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제14권1호
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• pp.165-171
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• 2013

The aim of the present study was to analyze the expression of FHIT and WWOX in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and correlations with clinical pathologic features. mRNA expression of the FHIT and WWOX was assessed by real-time fluorescent relatively quantitative PCR in 61 NPC tissues and 45 non-cancerous nasopharyngeal tissues. As a result, mRNA expression levels of both FHIT and WWOX were significantly lower in NPC patients than in control samples (P=0.049 and 0.045, respectively). Moreover, the mRNA expression of both had an inverse relation with larger invasive range (P=0.035 and 0.048, respectively), poor histologic differentiation (P=0.012 and 0.016) and advanced clinical stage (P=0.026 and 0.038). Consistency was found between expression of FHIT and WWOX in the same NPC tissues (r=0.681, P=0.00). In conclusion, synergy between FHIT and WWOX may exist in the development of NPC so that the two factors may be considered as important genetic markers. Detecting the expression of FHIT and WWOX should provide clinically significant information relevatn to tumor diagnosis, progression and treatment modalities for NPC.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제49권4호
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• pp.453-465
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• 2000

연구배경 : 폐암의 발생과정은 다양한 유전자 이상과 여러 가지경로 이상을 포함한 다단계 과정이다. 암유전자의 활성화나 종양억제유전자의 불활성화, 그리고 결과적인 유전적 불안정성의 증가는 폐암의 발암과정에서 일어나는 주요한 사건이며 임상적으로 폐암이 진단되기까지 10내지 20여 가지의 유전적 변화가 축적되는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서 저자들은 비소세포폐암에서 종양억제유전자인 p53과 FHIT의 돌연변이, FHIT 유전자의 전사체 이상 여부를 확인하고 종양억제유전자부근에 위치하는 극소위성의 유전적 변화를 관찰하였다. 대상 및 방법 : 비소세포폐암으로 진단된 후 외과적 적출술을 시행받은 환자 29명의 생검조직과 그에 대응하는 동일인의 정상조직을 대상으로 하였다. p53과 FHIT의 돌연변이 여부는 PCR-SSCP, DNA 염기분석으로 확인하였고 D3S1285, D9S171, TP53에서 극소위성 불안정성과 이형접합성 상실은 PCR로 확인하였다. FHIT 유전자의 전사체 이상 여부 확인을 위해서는 RT-PCR을 사용하였다. 결과 : 1) p53 유전자의 2예에서 관찰되었고 모두 exon 5에서 1개의 염기가 치환되는 점돌연변이였다. 2) 극소위성 불안정성은 D3S1285와 D9S171에서 각각 2예, 1예, 이형접합성 상실은 D3S1285, D9S171, TP53에서 각각 3예, 4예, 7예가 관찰되었다. 3) FHIT 유전자의 변이는 11예에서 관찰되었으며 이중 6예는 exon 8의 codon 98에서 염기서열이 CAT가 CAC로 바뀌는 잠재적 치환이었다. 4) FHIT 유전자의 전사체 이상은 $\beta$-actin이 제대로 발현되는 15예중 4예에서 관찰되었으며 exon 6-9의 결실로 확인되었다. 결론 : 이상으로 비소세포폐암 발생에 p53, FHIT 유전자의 변이, 극소위성 불안정성과 이형접합성 상실 등 다양한 분자유전학적 기전이 복합적으로 작용할 것으로 생각되며 이번 연구에서 조사된 유전적 이상의 빈도는 앞서 발표된 서양의 연구결과와 대체적으로 일치한다. 특히 극소위성의 분석은 편평세포암에서 종양표지자로서의 역할이 기대된다. 이런 발암과정에 대한 이해는 예방, 진단 및 치료적 접근을 발전시키는데 도움을 줄 수 있을 것이고 향후 이들에 관한 가능적 연구들이 수행되어야 할 것이다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권21호
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• pp.9313-9317
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• 2014

Fragile histidine triad (FHIT) is a suppressor gene related to cervical cancer through CpG island hypermethylation. Folate is a water-soluble B-vitamin and an important cofactor in one-carbon metabolism. It may play an essential role in cervical lesions through effects on DNA methylation. The purpose of this study was to observe effects of folate and FHIT methylation and HPV 16 on cervical cancer progression. In this study, DNA methylation of FHIT, serum folate level and HPV16 status were measured using methylation-specific polymerase chain reaction (MSP), radioimmunoassay (RIA) and polymerase chain reaction (PCR), respectively, in 310 women with a diagnosis of normal cervix (NC, n=109), cervical intraepithelial neoplasia (CIN, n=101) and squamous cell carcinoma of the cervix (SCC, n=101). There were significant differences in HPV16 status (${\chi}^2=36.64$, P<0.001), CpG island methylation of FHIT (${\chi}^2=71.31$, P<0.001) and serum folate level (F=4.57, P=0.011) across the cervical histologic groups. Interaction analysis showed that the ORs only with FHIT methylation (OR=11.47) or only with HPV 16 positive (OR=4.63) or with serum folate level lower than 3.19ng/ml (OR=1.68) in SCC group were all higher than the control status of HPV 16 negative and FHIT unmethylation and serum folate level more than 3.19ng/ml (OR=1). The ORs only with HPV 16 positive (OR=2.58) or with serum folate level lower than 3.19ng/ml (OR=1.28) in CIN group were all higher than the control status, but the OR only with FHIT methylation (OR=0.53) in CIN group was lower than the control status. HPV 16 positivity was associated with a 7.60-fold increased risk of SCC with folate deficiency and with a 1.84-fold increased risk of CIN. The patients with FHIT methylation and folate deficiency or with FHIT methylation and HPV 16 positive were SCC or CIN, and the patients with HPV 16 positive and FHIT methylation and folate deficiency were all SCC. In conclusion, HPV 16 infection, FHIT methylation and folate deficiency might promote cervical cancer progression. This suggests that FHIT may be an effective target for prevention and treatment of cervical cancer.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권10호
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• pp.4281-4287
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• 2014

Background: Methylation of tumor suppressor genes has been investigated in all kinds of cancer. Tumor specific epigenetic alterations can be used as a molecular markers of malignancy, which can lead to better diagnosis, prognosis and therapy. Therefore, the aim of this study was to evaluate the association between gene hypermethylation and expression of fragile histidine triad (FHIT), glutathione S-transferase P1 (GSTP1) and p16 genes and various clinicopathologic characteristics in primary non-small cell lung carcinomas (NSCLC). Materials and Methods: The study included 28 primary non-small cell lung carcinomas, where an additional 28 tissue samples taken from apparently normal safety margin surrounding the tumors served as controls. Methylation-specific polymerase chain reaction (MSP) was performed to analyze the methylation status of FHIT, GSTP1 and p16 while their mRNA expression levels were measured using a real-time PCR assay with SYBR Green I. Results: The methylation frequencies of the genes tested in NSCLC specimens were 53.6% for FHIT, 25% for GSTP1, and 0% for p16, and the risk of FHIT hypermethylation increased among patients with NSCLC by 2.88, while the risk of GSTP1 hypermethylation increased by 2.33. Hypermethylation of FHIT gene showed a highly significant correlation with pathologic stage (p<0.01) and a significant correlation with smoking habit and FHIT mRNA expression level (p<0.05). In contrast, no correlation was observed between the methylation of GSTP1 or p16 and smoking habit or any other parameter investigated (p>0.05). Conclusions: Results of the present study suggest that methylation of FHIT is a useful biomarker of biologically aggressive disease in patients with NSCLC. FHIT methylation may play a role in lung cancer later metastatic stages while GSTP1 methylation may rather play a role in the early pathogenesis.