• 한국동물학회지
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• 제33권4호
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• pp.446-453
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• 1990

본 실험은 레티노익산에 의해 F9 Teratocarcinoma Stem Cell의 분화를 유도하고 이분화과정에서 세포형태의 변화와 라미닌유전자의 발현을 조사 하였다. 분화되지 않은 F9 Stem Cell은 지속적으로 증식을 하며 세포간의 간격을 구분하기 어령루 뿐만 아니라 불규칙적인 모양을 하고 있으나,레티노익산과 dibutyryl cyclic AMP처리후의 분화된 F9세포는 둥글고 평평한 모양을 나타내며 세포성장은 중지되었다. Northern blot분석에 의하여 레티노익산과 cyclic AMP처리 후의 F9세포내에서 라미닌 유전자의 발현은 현저하게 증가하였다. 즉, 라미닌 B1유전자 발현은 분화과정 동안 최소한 30배, 라미닌 B2 유전자의 발현은 약 20배 증가하였다. 또한 라미닌 항체를 이용한 면역형광 분석결과는 Northern 분석결과와 일치하게 분화 후에 라미닌 단백질 합성이 크게 증가되었으며, 생성된 라미닌 단백질은 거의 세포표면에 분포된 것으로 나타났다. 이러한 결과로부터, 레티노익산에 의해 F9 Stem Cell의 분화가 유도되며 이 분화과정에서의 형태적인 변화와 진행은 라미닌의 생성과 밀접한 관련이 있다고 추측된다.

• BMB Reports
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• 제29권1호
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• pp.68-72
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• 1996

Ursodeoxycholic acid (UDCA) and lithocholic acid (LCA), secondary bile acids, have been shown to have a cell differentiation activity in mouse F9 teratocarcinoma stem cells. Treatment with bile acids induced morphological changes, including cytoplasmic and nuclear membrane blebbing, aggregation of organelles, and chromatin condensation, corresponding to apoptosis. Moreover, the bile acids induced intemucleosomal DNA fragmentation, a hallmark of apoptosis. In addition, the expression of c-jun was increased, but that of c-myc and laminin was decreased during apoptosis induced by the bile acids in F9 cells. These results suggest that the bile acids can induce apoptosis in F9 cells. Furthermore, the c-jun expression may be related to the apoptosis induced by UDCA or LCA in F9 cells.

• Journal of Ginseng Research
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• 제21권3호
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• pp.147-152
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• 1997

Ginsenosides $Rh_1$ and $Rh_2$ Induced the differentiation of F9 teratocarcinoma stem cells. These agents are structurally similar to the steroid hormones, therefore, we speculated that the steroid receptor (s) or novel nuclear receptor (s) could be involved in the differentiation process induces by them. Based on this speculation, we tried to alone new nuclear receptors with reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) method by isolating RNA from F9 teratocarcinoma cells induced by ginsenosides. By using RT-PCR with degenerated primers from highly conserved DNA binding domain of nuclear receptors, we identified several nuclear receptors. In northern blot analysis we found that these clones are transcriptionally regulated by ginsenoside Rhl or Rh2 treatment. Further characterizations of these clones are needed to identify the mechanism of gene expression, which has an important role in the differentiation of F9 cells induced by ginsenosides.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권6호
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• pp.998-1001
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• 2002

Potential antitumor activity of Lactobacillus plantarum cytoplasm was examined using F9 teratocarcinoma-bearing BALB/C mice. The cytoplasmic fraction of L. plantarum was separated by sonication followed by ultracentrifugation. The fraction at a dose of 100 or 200 mg/kg/day was orally administered for 7 consecutive days before or after tumor inoculation to 16 mice. As a control, heat-killed whole cell was used at a dose of 100 mg/kg/day. Upon oral administrations of both the cytoplasm and heat-killed whole cell, when performed after and before tumor inoculation, the survival of F9-bearing mice prolonged more effectively. Administration of the cytoplasm after tumor inoculation extended the average survival days by 30 and $40\%$ at daily dosages of 100 and 200 mg/kg/day, respectively. This result suggests that the cytoplasmic fraction of L. plantarum has strong antitumor activity against mouse F9 teratocarcinoma in vivo.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권3호
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• pp.628-630
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• 2004

Antitumor activities of a peptide fraction isolated from traditional Korean soy sauce (SSP) were investigated in vitro and in vivo using cancer cell lines and F9 teratocarcinoma-bearing BALB/c mice. SSP exerted a dose-dependent antiproliferative effect on P388D1 mouse lymphoma, F9 mouse teratocarcinoma, and DLD-l human colon cancer cells with $IC_{50}$ values of 11, 50, and $50\mug/ml$, respectively. Tumor growth in F9 teratocarcinoma-bearing BALB/c mice, orally administered with 80 and 200 mg/kg/day of SSPs, was inhibited 10.3% and 52.4%, respectively, and survival days increased by 11.9% and 22.1%, respectively, compared to the control group. The results of antitumor activities exerted by SSP in vitro and in vivo suggest the feasibility of using SSP as an antitumor agent.

• 약학회지
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• 제40권6호
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• pp.690-696
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• 1996

It has been known that many kinds of cancer are caused by continued proliferation or abnormal differentiation. Thus, recent approaches to anticancer therapy have been focused on developing drugs that induce differentiation of cancer cells to normal cells. A typical differentiation agent, all trans-retinoic acid, is unsuitable for anticancer drug because all trans-retinoic acid produces unfavorable side effects and cytotoxicity in normal cells. Therefore, we have screened some new differentiation-inducing compounds obtained from marine organisms using F9 teratocarcinoma stem cells as a model system. We observed that fatty acid. glycolipid, saponin, sphingosine and sterol compounds of marine organisms had differentiation-inducing activity in F9 cells, were determined by morphological changes and Northern blot analysis. The expression of differentiation marker genes, such as laminin B1, type IV collagen and retinoic acid receptor beta were induced by treatment with those compounds.

• 생명과학회지
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• 제8권1호
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• pp.51-59
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• 1998

Ursolic acid(UA)의 apoptosis 유도능을 F9 생쥐 기형암종세포를 대상으로 조사하였다. UA는 피부암화의 억제, tumor의 분화유도, tumor promotion의 억제 등의 항암 효과를 나타내는 pentacyclic triterpene acid로 물질로 알려져 있다. UA를 F9세포에 처리하였을 때 농도비례로 성장억제를 나타냈다. 또한 apoptosis과정에서 관찰되는 전형적인 DNA 분절을 관찰할 수 있었고, 전자현미경을 이용한 세포의 미세구조를 관찰한 결과, 역시 apoptosis과정에서 관찰되는 전형적인 형태인 염색질 응축, 핵의 분절들을 관찰할 수 있어, UA에 의한 항암 효과는 apoptosis에 의한 것임을 시사한다. UA에 의한 apoptosis는 단백질 합성저해제인 cycloheximide에 의해 저해됨을 관찰할 수 있었다. UA를 F4쎄포에 처리한 후 oncogene의 발현양상을 조사한 결과, c-myc과 laminin B1은 apoptosis과정동안 점점 감소하고 c-jun은 증가함을 관찰할 수 있었다. 이상의 결과로서 UA에 의한 F9 세포의 apoptosis에는 새로운 단백질의 합성이 요구되며, c-myc 및 laminin의 발현 감소와 c-jumd의 발현 증가가 관여하고 있음을 시사한다.

• 한국동물학회지
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• 제37권1호
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• pp.40-48
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• 1994

세포분화에 따른 Small GTP-binding protein의 역할을 밝히기 위하여 Retinoic acid(RA)와 dibutyryl cyclic AMP(dbcAMP)로 분화를 유도한 F9 기형암종세포의 형태적인 변화와 함께 Small GTP-binding protein의 분포를 조사하였다. RA와 dbcAMP를 처리한 세포는 분화유도 5일경(초기 분화 단계)에 분명한 세포의 경계를 보이기 시작하여 7일경(분화 후기 단계)에는 거의 모든 세포가 등근 분화된 형태로 전환되었다. 이 분화과정 동안 세포막에는 많은 microvilli와 lamellopodia 같은 구조물이 나타났다. 아울러 초기 분화 단계에 많은 량의 laminin이 발현되었으며 분화 후기에 microtubule의 재분포가 관찰되었다. 세종류의 Small GTP-binding protein(25 23, 21 KD)이 F9 세포의 막성분과 세포질에서 관찰되었으며 분화가 진행됨에 따라서 세단백질 모두 증가되는 양상을 보였다 이러한 결과는 Small GTP-binding protein이 F9 세포의 분화에 특별한 기능을 가지고 있음을 시사해 주고 있다.

• 대한의생명과학회지
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• 제13권3호
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• pp.239-244
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• 2007

Hoxc8 is one of the homeotic developmental control genes regulating the expression of many downstream target genes, through which animal body pattern is established during embryonic development. In previous proteomics analysis, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) which is also known as cyclin, has been implied to be regulated by Hoxc8 in F9 murine embryonic teratocarcinoma cell. When the 5' upstream region of PCNA was analyzed, it turned out to contain 20 Hox core binding sites (ATTA) in about 1.17 kbp (kilo base pairs) region ($-520{\sim}-1690$). In order to test whether this region is responsible for Hoxc8 regulation, the upstream 2.3 kbp fragment of PCNA was amplified through PCR and then cloned into the pGL3 basic vector containing a luciferase gene as a reporter. When the luciferase activity was measured in the presence of effector plasmid (pcDNA : c8) expressing murine Hoxc8, the PCNA promoter driven reporter activity was reduced. To confirm whether this reduction is due to the Hoxc8 protein, the siRNA against Hoxc8 (5'-GUA UCA GAC CUU GGA ACU A-3' and 5'-UAG UUC CAA GGU CUG AUA C-3') was prepared. Interestingly enough, siRNA treatment up regulated the luciferase activity which was down regulated by Hoxc8, indicating that Hoxc8 indeed regulates the expression of PCNA, in particular, down regulation in NIN3T3 cells. These results altogether indicate that Hoxc8 might orchestrate the pattern formation by regulating PCNA which is one of the important proteins involved in several processes such as DNA replication and methylation, chromatin remodeling, cell cycle regulation, differentiation, as well as programmed cell death.

• 생명과학회지
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• 제25권6호
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• pp.703-708
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• 2015

Hox 유전자는 호메오도메인을 포함한 전사인자로써, 발생 과정 중 전후축을 따라 몸의 형태 형성을 조절하는 역할을 한다. 레티노산(RA)은 발생 과정에서 필수적인 형태형성인자이며 세포의 특성을 결정하는데 중요한 조절자이다. 특히, RA는 생쥐나 인간으로부터 만들어진 배아암종(EC)세포에서 Hox 유전자의 발현을 조절한다고 밝혀져 있다. 또한 RA에 의한 세포 분화와 유전자 조절 과정에 히스톤 변이가 중요한 역할을 하는 것으로 보고되어 있다. 히스톤 변이가 RA에 의해 유도되는 Hox 유전자의 발현에 특이적인 역할을 할 것으로 유추되기 때문에, 이 연구의 목적은 F9 생쥐배아 기형암종세포에서 RA에 의해 유도되는 Hoxc 유전자의 순차적인 발현이 히스톤 변이에 의해 일어나는 것인지를 조사하는 것이다. Hox 유전자의 발현 양상과 히스톤 변이는 semi-quantitative RT-PCR, RNA-sequencing과 chromatin immuno-precipitation (ChIP)-PCR 기법을 이용하여 관찰하였다. RA 처리 후(0일(D0), 1일(D1), 3일(D3)), Hoxc4 유전자의 발현(D1)은 Hoxc5부터 –c10 유전자(D3)보다 먼저 시작되었다. Hox가 발현하지 않는 D0 샘플은 전사 억제 마커인 H3K27me3이 모든 Hoxc 좌위에 강하게 표지 되어 있었으나 D1과 D3 샘플에서는 모든 좌위의 H3K27me3 표지가 확연히 줄어들어 있었다. 전사 발현 마커인 H3K4me3가 Hoxc 유전자의 순차적인 발현과 더 연관성이 있는 것으로 보이는데 D1에서 Hoxc4 발현과 함께 H3K4me3이 표지 되어 있었고, D3에서는 Hoxc 유전자 발현과 함께 모든 좌위에서 H3K4me3 마커가 존재했기 때문이다. 모든 결과를 종합해 보았을 때 F9 세포에서 RA에 의해 유도된 Hoxc 유전자의 순차적인 발현은 Hoxc 좌위에서 H3K27me3가 사라지고, H3K4me3가 표지 되는 히스톤 메틸화의 변이에 의해 결정되는 것으로 사료된다.