In chicken, exogenous genes introduced into germinal crescent region (GCR) of the early developmental stage, where primordial germ cells (PGCs) were concentrated, were successfully transferred to the gonads via PGCs. The foreign genes were also confirmed to be successfully incorporated into F1 and F2 generations. We tried to incorporate the exogenous genes into PGCs by lipofection, then the DNA mixture was injected into GCR at stage 3-5 or 9-11 of embryonic development (Hamburger and Hamilton, 1951). The manipulated eggs were incubated, and hatched chicks were reared until sexual maturation. F1 generation was obtained from the DNA-treated chicken (DNA-chicken) mated with normal birds. Furthermore, F2 generation was also obtained from the F1 chicken mated with normal birds. The transfer of introduced foreign genes were confirmed by marker gene detection methods and PCR analysis in the hatched chicks, F1 and F2 generations. However, in our experiments, DNA-chickens showed abnormal characteristics such as low egg production rate, abnormal appearance and decreased number of spermatozoa. In the case of F1 chicken, low egg production and the deterioration of sperm capacity for insemination in male chicken were observed.
본 논문은 효과적인 검사 패턴 발생 방법을 제안한다. 기존의 검사 패턴 발생 방법 들은 고장 $F_{i+l}$에 대한 검사 패턴 발생을 고장 F1,F2....,Fi들에 대한 검사 패턴 발생시 행한 계산과는 독립적으로 행하게 된다. 제안된 방법에서는 고장 Fi에 대한 검사벡터를 전수받아 고장$F_{i+l}$에 대한 검사벡터를 발생한다. 전수받은 값을 점차로 바꾸어 나가 면서 새로운 검사벡터가 발생된다. 전수받은 값은 부분적으로 고장 신호를 활성화하고 이 고장 신호를 전파시키기도 한다. 보통 이들은 다음 탈식과정에서 결정단계의 수와 회귀 의 수를 감소 시킨다. 잘로서 알려진 벤치마크 회로에 대한 실험 결과는 낮은 회귀한계 에서 매우 효과적임을 보여주고, 다른 알고리즘과 병합시키면 임의의 회귀한계에서도 매우 효과적임음을 보여 준다.
형질전환 동물의 유선에서 특이적으로 인간 TPO가 발현되도록 고안된 pBT-L 외래유전자가 삽입되어 한 계통으로 확립된 형질전환 생쥐에서 이 유전자가 장기 세대까지 안정적으로 전이되고, 또한 발현 수준도 지속적으로 유지되는지를 조사 하였다 이를 위해 제 5세대의 수컷 pBT-L 형질전환 생쥐를 실험에 공시하였고, 제 10세대까지의 전이율과 인간 TPO의 발현수준을 분석하였다. 제 8세대 생쥐의 계대 번식에 의한 자손 중 51.3$\pm$18.98%가 형질전환 생쥐로 판명되었다. 또한 제9세대에서 외래 유전자의 전이율은 43.8$\pm$18.98%이었고, 제 10세대에서는 71.4$\pm$26.98%의 전이율을 나타내었다. 이러한 결과로 pBT-L 형질전환 생쥐는 그 외래유전자의 유전적 손상이 없이 장기 세대까지 안정적으로 전이되는 것으로 판단된다. 제 9세대외 10세대의 3마리의 암컷 형질전환 생쥐로 부터 유즙내 인간 TPO의 발현 수준을 분석하였을때, 그 농도는 모두 평균 1.1 mg/ml의 수준에서 측정되었다. 이러한 수준은 제 2세대의 것과 유사한 결과로 pBT-L 형질전환 생쥐에서 인간 TPO 유전자의 발현은 최소한 10세대까지 지속적으로 유지된다는 것을 알 수 있었고, 더 긴 장기 세대까지도 발현 수준이 유지될 것으로 추정된다. 이러한 연구결과는 계통으로 확립된 형질전환동물에 부여된 새로운 유전형질은 장기 세대까지 유전될 수 있음을 보여주는 것이다.
During our on-going studies to identify bioactive compounds in medicinal herbs, we found that saucerneol F (SF), a naturally occurring sesquilignan isolated from Saururus chinensis (S. chinensis), showed in vitro anti-inflammatory activity. In this study, we examined the effects of SF on the generation of 5-lipoxygenase (5-LO) dependent leukotriene $C_4$ ($LTC_4$), cyclooxygenase-2 (COX-2) dependent prostaglandin $D_2$ ($PGD_2$), and on phospholipase $C{\gamma}1$ ($PLC{\gamma}1$)-mediated degranulation in SCF-induced mouse bone marrow-derived mast cells (BMMCs). SF inhibited eicosanoid ($PGD_2$ and $LTC_4$) generation and degranulation dose-dependently. To identify the molecular mechanisms underlying the inhibition of eicosanoid generation and degranulation by SF, we examined the effects of SF on the phosphorylation of $PLC{\gamma}1$, intracellular $Ca^{2+}$ influx, the translocation of cytosolic phospholipase $A_2$ ($cPLA_2$) and 5-LO, and on the phosphorylation of MAP kinases (MAPKs). SF was found to reduce intracellular $Ca^{2+}$ influx by inhibiting $PLC{\gamma}1$ phosphorylation and suppressing the nuclear translocations of $cPLA_2$ and 5-LO via the phosphorylations of MAPKs, including extracellular signal-regulated protein kinase-1/2 (ERK1/2), c-Jun N-terminal kinase (JNK), and p38. Taken together, these results suggest that SF may be useful for regulating mast cell-mediated inflammatory responses by inhibiting degranulation and eicosanoid generation.
본 연구는 growth hormone receptor(GHR) gene의 동물생리에 미치는 영향을 연구하기 위해 metallothionein promoter와 GHR gene을 이용하여 생쥐의 1-cell 수정란에 DNA 미세주입법에 의해 형질전환생쥐를 생산하였다. 세마리의 형질전환생쥐가 생산되었는데 DNA 분석결과 4~8 copy의 GHR 유전자를 지닌 것으로 확인되었다 이들 세 마리의 GHR 형질전환생쥐를 정상 형질전환생쥐와 교미시켜 F$_1$과 F$_2$ 새끼를 생산하였는데 이들의 전달율은 F$_1$에서 20~50%였고 F$_2$에서는 약 50%를 나타내어 모자익형태로 유전자가 정착되었음을 확인할 수 있었다. 3주령까지의 사망률은 Fl과 F2 새끼에서 약 10~30%를 나타내어 GHR유전자의 발현이형질전환생쥐의 초기 사망에 영향을 미치는 것으로 나타났다.
본 연구의 목적은 키토산올리고당의 쥐 간조직 독성여부를 관찰하고자 하였다. 건강한 Wistar계 쥐를 사용하였다. 실험군은 Group 1. 일반식이를 섭취한 대조군, Group 2 0.1%(1mg/ml)키토산올리고당 수용액을 30일 간 음용수를 통해 자유자재로 섭취시킨 후 교미시켜 태어난 $F_1$ 세대, Group 3 $F_1$ 세대의 쥐에게 0.1%(1 mg/ml) 키토산올리고당 수용액을 30일간 음용수를 통해 자유자재로 섭취한 후 교미시켜 태어난 $F_2$ 세대, Group 40.1% (1 mg/ml) 키토산올리고당 수용액을 90일간 음용수를 통해 자유자재로 섭취시킨 군, Group 50.1% (1 mg/ml) 키토산올리고당 수용액을 365일간 음용수를 통해 자유자재로 섭취시킨 군의 쥐 등으로 각 실험군 당 쥐 10마리를 사용하였고, 다음과 같은 결과를 얻었다. Group 4의 경우 약간의 소포체 팽창을 관찰하였을뿐, 다른 실험군에서는 대조군과 비교하여 특별한 간 조직의 미세구조 변화를 관찰하지 못하였다. 결론적으로 키토산올리고당은 무독성 물질로서 안전성이 있다고 사료된다.
Zneng, Z. Y.;B. H. Sohn;K. B. Oh;W. J. Shin;Y. M. Han;Lee, K. K.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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pp.46-46
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2003
Interleukin-10 (IL-10) is a homodimeric protein with a wide spectrum of anti-inflammatory and immune activities. It inhibits cytokine production and expression of immune surface molecules in various cell types. The transgenic mice carrying the human IL-10 gene in conjunction with the bovine $\beta$-casein promoter produced the human IL-10 in milk during lactation. Transgenic mice were generated using a standard method as described previously. To screen transgenic mice, PCR was carried out using chromosomal DNA extracted from tail or toe tissues with a primer set. In this study, stability of germ line transmission and expression of IL-10 gene integrated into host chromosome were monitored up to generation F15 of a transgenic line. When female mouse of generation F9 was crossbred with normal male, generation F9 to F15 mice showed similar transmission rates (66.0$\pm$20.13%, 61.5$\pm$16.66%, 41.1$\pm$8.40%, 40.7$\pm$20.34%, 61.3$\pm$10.75%, 49.2$\pm$18.82%, and 43.8$\pm$25.91%, respectively), implying that the IL-10 gene can be transmitted stably up to long term generation in the transgenic mice. For ELISA analysis, IL-10 expression levels were determined with an hIL-10 ELISA and a mIL-10 ELISA kit in accordance with the supplier's protocol. Expression levels of human IL-10 from milk of generation F9 to F13 mice were 3.6$\pm$1.20 mg/ml, 4.2$\pm$0.93 mg/ml, 5.7$\pm$1.46 mg/ml, 6.3$\pm$3.46 mg/ml, and 6.8$\pm$4.52 mg/ml, respectively. These expression levels are higher than in generation F1 (1.6 mg/ml) mice. We concluded that transgenic mice faithfully passed the transgene on their progeny and successively secreted target proteins into their milk through several generations, although there was a little fluctuation in the transmission frequency and expression level between the generations.
(1) 과거시험에서 권장되고 있는 복교잡종을 수량적으로 능가하였거나 대등한 결과를 나타낸 $F_1$ 품종간교잡의 $F_2$ 및 $F_3$의 생산성을 평가검정할 목적으로 11개의 황색종 품종간교잡과 5개의 백색종 품종간교잡종 및 이들의 $F_2$와 $F_3$와 더불어 각 양친품종 및 표준복교잡종 등을 1963년 우기와 1963-1964 년 건기에 걸쳐 생산력검정을 하였다. 다만 전자시험은 몹시 강한 태풍의 피해 때문에 유효한 성적을 얻지 못하였다. (2) 품종간 교잡종의 $F_1$에서 Heterosis는 아주 현저하여 양친의 평균치에 비하여 39.9%의 증수를 나타내었고 $F_2$의 수량감소는 평균 30.3%였으며 $F_3$는 평균 27.2%이었다. (3) $F_2$와 $F_3$ 세대에서는 상당한 정도의 감수가 나타나서 평균하면 $F_2$는 17.6% 그리고 $F_3$는 20.7%의 감수를 보여주었다. 이 두 세대에서의 Heterosis강세는 2수준으로 표현되었는데 4개의 조합에서는 10.9%, 그리고 나머지 12개조합에서는 22.0%이었다. 1개황색종조합 Cuban Yellow Flint${\times}$Hawaiian Flinty Dent와 3개백색종조합 Bicol White Flint${\times}$Eto Blanco, College White Flint${\times}$Eto Blanco 및 Bicol WHite Flint${\times}$Narino 33b 등은 각각 표준복교잡종인 Philippine Hybrid No. 1 및 Philippine Hybrid No. 4와 비슷한 수량성을 나타내었다. (4) Hardy-Weinberg 법칙이 명시하는바와 같이 Panmixis의 경우 유적적평형(Genetic equilibrium)이 $F_2$에서 이루어지는 것은 명확한 것으로서 $F_2$와 $F_3$의 수량사이에는 어떠한 유의성도 발견되지 않았다. (5) 이전시험에서와 같이 Hawaiian Flinty Dent는 현 장려복교잡종인 Philippine Hybrid No.1과 거의 동일한 수량을 보여 주었으므로 장차 육종사업에 좋은 자료가 될 것으로 믿는 바이다.
It is generally known that the automotive road wheel involves the non-proportional multiaxial loading condition, therefore the measuring dynamic stress and strain in driving state is very important to predict an endurance characteristic of the automotive road wheel. In this study, the ultimate driving test using F1 circuit with respect to 2 kinds of velocity conditions have been carried out in order to measure dynamic stress, strain of the wheel and acceleration of a vehicle. Based on the measured results, the characteristics of dynamic stress generation have been analyzed, and factors which have effect on the dynamic stress generation have been studied.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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