The effects of Haematococcus pluvialis extracellular products on microbial growth and bacteriocin production were investigated to improve bacteriocin synthesis during the growth cycle of Lactobacilli. Lactobacillus pentosus KJ-108, L. plantarum KJ-10311, and L. sakei KJ-2008 were cultured in MRS and enriched medium (ERM) with or without supplement of the extracellular products obtained from a late exponential phase culture of Haematococcus pluvialis in modified Bold's basal medium (MBBM). In both MRS and ERM, the extracellular products strongly enhanced the growth as well as the bacteriocin production of all the lactic acid bacteria tested. The enhancing effect was observed in ERM with pH adjusted at 5 and 6. In addition, some difference in growth effects with the extracellular products of H. pluvialis was observed between pH 5 and 6 in ERM, but no effect was observed in the minimal medium. The final biomass and the final concentration of bacteriocin activity were associated with the cell growth that was promoted by the extracellular products of H. pluvialis, and the enhanced cell growth of the three lactic acid bacterial strains induced the increase of the specific bacteriocin production. Therefore, bacteriocin production and activity were influenced by the addition of the extracellular products of H. pluvialis in the culture medium.
Song, Minyu;Kim, Hyaekang;Kwak, Woori;Park, Won Seo;Yoo, Jayeon;Kang, Han Byul;Kim, Jin-Hyoung;Kang, Sun-Moon;Van Ba, Hoa;Kim, Bu-Min;Oh, Mi-Hwa;Kim, Heebal;Ham, Jun-Sang
한국축산식품학회지
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제39권4호
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pp.601-609
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2019
Bifidobacterium longum KACC 91563 secretes family 5 extracellular solute-binding protein via extracellular vesicle. In our previous work, it was demonstrated that the protein effectively alleviated food allergy symptoms via mast cell specific apoptosis, and it has revealed a therapeutic potential of this protein in allergy treatment. In the present study, we cloned the gene encoding extracellular solute-binding protein of the strain into the histidine-tagged pET-28a(+) vector and transformed the resulting plasmid into the Escherichia coli strain BL21 (DE3). The histidine-tagged extracellular solute-binding protein expressed in the transformed cells was purified using Ni-NTA affinity column. To enhance the efficiency of the protein purification, three parameters were optimized; the host bacterial strain, the culturing and induction temperature, and the purification protocol. After the process, two liters of transformed culture produced 7.15 mg of the recombinant proteins. This is the first study describing the production of extracellular solute-binding protein of probiotic bacteria. Establishment of large-scale production strategy for the protein will further contribute to the development of functional foods and potential alternative treatments for allergies.
The effects of environmental factors on the extracellular release of organic carbon by Scenedesmus qudricauda were studied. The PER (percentage extracellular release) was greater at high temperature and at high concentration of nitrogen and phosphate. The PER variation according to the change of M/P ratio showed high values at each extreme N/P ratio. This result suggested that the limitation of nitrogen or phosphorous resulted in the accumulation of carbohydrates as photosynthetic products, and the products in high concentration were excreted through algal cell membrane.
본 연구에서는 Vibrio harveyi의 주요 병원성 인자로 알려져 있는 ECPs를 분리하는 적정 조건을 제시하고자 하였다. 5 개의 분리균주 (FF8, FF10, FR1, FR2 and FT1 strain)와 2 개의 참조균주 (ATCC 35084 및 ATCC 14126)의 ECPs를 다양한 조건에서 분리해 본 결과, 1.5% NaCl 첨가 TSA 배지에서 25℃, 24 시간 배양하는 것이 가장 좋으며, ECPs 분리시의 buffer system은 pH 8.0이 적정한 것으로 나타났다. 나아가 우리 나라에서 분리한 5 개의 분리 균주들의 주요 ECPs 성분이 serine protease인 것으로 조사되었다.
Cyanobacteria havebeen identified as one of the most promising group producing novel biochemically active natural products. Cyanobacteria are a very old group of prokaryotic organisms that produce very diverse secondary metabolites, especially non-ribosomal peptide and polyketide structures. Though many useful natural products have been identified in cyanobacterial biomass, cyanobacteria produce also extracellular proteins related with NRPS/PKS. Detection of unknown secondary metabolites in medium was carried in the present study by a screening of 98 cyanobacterial strains. A degenerated PCR technique as molecular approaches was used for general screening of NRPS/PKS gene in cyanobacteria. A putative PKS gene was detected by DKF/DKR primer in 38 strains (38.8%) and PCR amplicons resulted from a presence of NRPS gene were showed by MTF2/MTR2 primer in 30 strains (30.6%) and by A3/A7 primer in 26 strains (26.5%). HPLC analysis for a detection of natural products was performed in extracts from medium in which cyanobacteria containing putative PKS or NRPS were cultivated. CBT57, CBT62, CBT590 and CBT632 strains were screened for a production of extracellular natural products. 5 pure substances were detected from medium of these cyanobacteria.
A microbial consortium, TMC7, was enriched for the degradation of natural lignocellulosic materials under high temperature. TMC7 degraded 79.7% of rice straw during 15 days of incubation at $65^{\circ}C$. Extracellular xylanase was effectively secreted and hemicellulose was mainly degraded in the early stage (first 3 days), whereas primary decomposition of cellulose was observed as of day 3. The optimal temperature and initial pH for extracellular xylanase activity and lignocellulose degradation were $65^{\circ}C$ and between 7.0 and 9.0, respectively. Extracellular xylanase activity was maintained above 80% and 85% over a wide range of temperature ($50-75^{\circ}C$) and pH values (6.0-11.0), respectively. Clostridium likely had the largest contribution to lignocellulose conversion in TMC7 initially, and Geobacillus, Aeribacillus, and Thermoanaerobacterium might have also been involved in the later phase. These results demonstrate the potential practical application of TMC7 for lignocellulosic biomass utilization in the biotechnological industry under hot and alkaline conditions.
Vial, Ludovic;Groleau, Marie-Christine;Dekimpe, Valerie;Deziel, Eric
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권9호
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pp.1407-1429
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2007
The Burkholderia genus consists of over 40 Gram-negative, ${\beta}$-proteobacteria species that occupy remarkably diverse ecological niches. This genus contains species pathogenic to human, animals, and plants, as well as species involved in promoting plant growth and biodegradation of pollutants. This is largely explained by the extraordinary versatility of Burkholderia, as reflected by the remarkable diversity of extracellular products released by these bacteria. We exhaustively surveyed the extracellular enzymes, siderophores, toxins, antimicrobials, and other secondary metabolites produced by the members of this very diverse genus. Available information on regulation, especially quorum sensing mechanisms, and secretion is highlighted.
목질 바이오매스(wood biomass)를 효율적으로 분해하는 최적 배양조건을 확립하기 위하여 국내 침엽수 4수종(소나무, 낙엽송, 잣나무, 리기다소나무)의 목질바이오매스를 혼합하여 목분의 적정입도, 배양기간, 기질첨가농도별 균주의 균체외효소 활성을 측정하였다. 연구 결과, 혼합목분을 기질로 했을때 Fomitopsis palustris가 분비하는 균체외효소 활성은 효소 종류에 따라 기질농도, 목분입도, 및 배양기간등의 배양조건에 따라 다른 효소활성 값을 나타냈다. 침엽수 혼합목분을 기질로 했을 때 대부분의 cellulase 분비를 유도하는 최적 조건은 목분 입도, 80~100 mesh, 기질 농도는 7.5%가 적정한 것으로 밝혀졌다. 또한 최적의 목분입도 및 투입농도 조건에서 배양기간은 4~8주로 적절한 것으로 구명되었다.
Bacillus sp. KYJ 963, which was isolated from Korean salt-fermented anchovy (anchovy-jeot), produces an extracellular ${\beta}$-amylase. The analysis of the digestion products of substrates by thin layer chromatography from the purified protein revealed that the enzyme could not hydrolyze maltose or ${\alpha}$-cyclodextrin. In the amino acid composition analysis, the major characteristic of the ${\beta}$-amylase was the high proportion of amino acids that possess short side chain such as glycine and alanine.
Connective tissue growth factor (CTGF) is a novel fibrotic mediator, which is considered to mediate fibrosis through extracellular matrix (ECM) synthesis in diabetic cardiovascular complications. Statins have significant immunomodulatory effects and reduce vascular injury. We therefore examined whether fluvastatin has anti-fibrotic effects in vascular smooth muscle cells (VSMCs) and elucidated its putative transduction signals. We show that advanced glycation end products (AGEs) stimulated CTGF mRNA and protein expression in a time-dependent manner. AGE-induced CTGF expression was mediated via ERK1/2, JNK, and Egr-1 pathways, but not p38; consequently, cell proliferation and migration and ECM accumulation were regulated by CTGF signaling pathway. AGE-stimulated VSMC proliferation, migration, and ECM accumulation were blocked by fluvastatin. However, the inhibitory effect of fluvastatin was restored by administration of CTGF recombinant protein. AGE-induced VSMC proliferation was dependent on cell cycle arrest, thereby increasing G1/G0 phase. Fluvastatin repressed cell cycle regulatory genes cyclin D1 and Cdk4 and augmented cyclin-dependent kinase inhibitors p27 and p21 in AGE-induced VSMCs. Taken together, fluvastatin suppressed AGE-induced VSMC proliferation, migration, and ECM accumulation by targeting CTGF signaling mechanism. These findings might be evidence for CTGF as a potential therapeutic target in diabetic vasculature complication.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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