Some trials to alter the structure of extracellular polysaccharides by means of biotransformation and microbial modification have been reported. Seaweed alginate was acetylated by intact and resting cells of Pseudomonas syringae ATCC 19304. Glucose analogs such as 3-O-methyl-D-glucose used as sole carbon sources was directly incorporated into curdlan by agrobacterium sp. ATCC 31749. The 2-amino-2-deoxy-D-glucose (glucosamine)and 2-acetamido-2-deoxy-D-glucose (N-acetylglucosamine) were incorporated into microbial cellulose by Acetobacter xylinum ATCC 10245. The changed monomeric composition in pullulan by Aureobasidium pullulans ATCC 42023 as well as zooglan by Zoogoea ramigera ATCC 25935 was another effect of glucose analogs used a carbon source. There was no effect of glucose analogs found in polysacharide-7 (PS-7) produced by Beijerinckia indica. ATCC 21423.
The present investigation describes the chemical nature of purified extracellular polysaccharides synthesized by tow resembling streptococci, Streptococcus salivarius strain SD-1 and Streptococcus mitis strain SD-9, which was isolated from human dental plaque, with the following results. 1. Extracellular polysaccharide by Streptoccus salivarius strain SD-1 is recovered mostly in Fraction I-and II-45% of the presne purification procedure, leaving trace amount in Fraction I-and II-70%. 2. The dextran is the major polysaccharides in Fraction I-and II-45% of both strains with minor amounts of levan. 3. The Fraction I-and II-45% of both strains contain glucose and fructose, which its 70% of the same fractions glucose only. 4. It appears that the glycerol was the major end product of the Smith degradation of the Fraction I-45% of both strains.
Agrocybe cylindracea으로부터 분리 배양한 균사체 배양액을 이용하여 균사체내 다당류(IP)와 균사체외 다당류(EP)를 분리하고, 동물실험을 통한 각 다당류의 면역증강활성에 관해 실험을 실시하였다. 탐식능에 대한 실험결과, IP와 EP 모두는 복강 침출 세포(PEC)에서 대조군에 비해 6.6-50%, 말초 임파구(ML)에서 67-167%, 비장(SP)에서 16-90%의 전반적으로 높은 탐식능을 나타냈다. 또한 항체 생성능 측정을 위한 plaque forming cell(PFC)와 rosette forming cell(RFC)의 실험결과에서 볼 때, PFC형성능은 대조군에 비해 EP투여 II군에서 46-50%, IP투여 I군에서 49-70%의 활성증가를 나타내었다. 또한 RFC형성능은 대조군에 비해 IP투여 I군에서 91%의 증가를, EP투여 I군에서 33%, EP투여 II군에서 43%의 활성증가를 나타내어 높은 항체생성이 기대되었다. Mitogen 활성은 농도 의존적으로 세포 증식능을 보였으며, IP와 EP를 비교할 때, EP는 IP에 비해 약2.5배의 세포증식 활성을 보였다.
Agrocybe cylindracea의 배양방법별 균사체 및 다당류 생산수율비교 실험에서는 모두 진탕배양이 효과적이었다. 다당류의 정제는 조단백다당류를 이용하여 DEAE-cellulose column에 의한 1차 정제를 행하였고, 최종으로 Sepharose 2B를 이용한 2차 정제를 실시하여 최종적으로 균사체내다당류(ACIPDG, ACIPAG)와 균사체외다당류(ACEPDG, ACEPAG)를 얻었다. ACEPDG는 총당 75.8%, ACEPAG는 총당 65.4%를 함유하였으며, ACIPDG는 총당 89.2%, ACIPAG는 총당 54.2%의 조성을 보였다. 다당류 분획물들의 분자량을 측정한 결과, 모두 10만이 넘는 거대분자로 ACEPDG 300KDa에서 ACIPAG 600KDa까지 나타났다. 다당류의 조성을 HPLC로 분석한 결과, ACEPDG분획물은 glucose, inositol이 검출되었으며 ACIPDG, ACEPAG, ACIPAG 분획물은 glucose, fructose, inositol이 검출되었다.
신령버섯(Agaricus blazei Murill)의 액체 배양으로 다당체의 균사체외 분비를 유도하였으며, 버섯 균사체의 새포내 다당체와 세포외 분비 다당체의 면역증진활성을 in vitro 시험으로 비교하였다. 부분 정제된 세포내 다당체와 세포외 다당체의 총당 함량은 각각 85.6%와 95.3%였으며, ${\beta}$-glucan 함량은 각각 67.9%와 88.1%로 측정되었다. 면역활성 실험에는 시료의 닥 함량을 동일하게 맞추어 사용하였다. In vitro에서 균사체내외 다당체는 대식세포 주인 RAW 264.7을 활성화시켜 nitric oxide (NO) 생성을 농도 의존적으로 증가시켰으며, 각각 최대 53.9%, 53.1%의 비슷한 증가활성을 나타내었다. 또 균사채내외 다당체는 모두 RAW 264.7을 활성화시켜 염중성 cytokine류인 interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$의 생성을 증가시켰으며, 이때 3종의 cytokine 모두에서, 세포내 다당체에 비해 세포외 다당체를 처리했을때 저농도에서 높은 증가률을 나타내었다. 두 다당체는 in vitro 상에서 비장세포를 증식시키는 효과를 나타내었으며, 세포내 다당체가 농도 의존적으로 증식효과를 보인데 반해 세포외 다당체는 저농도에서 증식이 높았고, $250\;{\mu}g/ml$ 농도 이상에서는 더 높아지지 않았다. 두 다당체 모두 암세포인 B16F0 melanoma에 대한 직접적인 세포독성 효과는 나타내지 않았다. 신령버섯 균사체 배양으로 생성된 세포내외 다당체는 in vitro에서 모두 면역활성을 증가시키는 것으로 나타났으며 전반적으로 그 활성은 세포내 다당체보다 세포외 다당체가 우수한 것으로 판단되었다.
Atherosclerosis is associated with the presence of extracellular lipid droplets and large fatty deposits, both of which are to be covered at the surface mainly by zwitterionic phospholipids. The development of atherosclerosis is often associated with the accumulation of calcium. Furthermore, the presence of glycosaminoglycans directly underlying fatty deposits in human aorta has been demonstrated. Also, the possible involvement of the interaction between sulfated polysaccharide and lipoprotein in the development of atherosclerosis has been suggested in view of the presence of both low density lipoproteins and glycosaminoglycans, as well as their complexes, in atherosclerotic aortas. Therefore interactions of sulfated polysaccharides with low density lipoproteins which serve as a vehicle for cholesterol and cholesterol ester and with zwitterionic phospholipids have been studied extensively by a number of workers to provide mechanisms. In this paper, the mechanism of the interaction of sulfated polysaccharides with low density lipoproteins and the mechanism of the interaction between sulfated polysaccharides and zwitterionic phospholipids are reviewed. The possibility of the occurence of these interactions in the body are also considered.
The effect of AF-toxin I produced by the strawberry pathotype of Alternaria alternata on the protein synthesis of susceptible strawberry protoplasts was examined by using the radiolabeled amino acids. The incorporation of the radiolabeled amino acids into newly synthesized proteins in the strawberry protoplasts was stimulated by the toxin treatment at relatively low concentrations (2.2$\times$10-11 to 2.2$\times$10-9 M), but not at higher concentrations (2.2$\times$10-8 to 2.2$\times$10-6 M). An one-dimensional SDS-polyacrylamide gel electrophoresis revealed no detectable differences in the proteins synthesized in both the toxintreated and untreated protoplasts. The susceptible strawberry protoplasts were treated with AF-toxin I and stained with Fluostain I to detect the extracellular polysaccharides. The toxin treatment induced the accumulation of extracellular polysccharides in a dose-dependent manner. These results indicate a transient activation of cellular metabolism in the susceptible cells by the toxin exposure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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