주요 약용작물로 사용하고 있는 천궁의 경정을 기내배양 하여 건전한 종경을 대량으로 증식하는데 적함한 배양조건을 구명하기 위하여 실험한 결과를 요약하면 7월에 채취한 재료를 1%의 NaOCI에 20분간 표면살균한 후, carbenicillin 500 mg/L, BA 1.0 mg/L 와 $GA_3$ 1.0 mg/L가 첨 가된 1/2 MS배지가 오염율 감소와 신초 재분화율을 높이는데 효과적이었고, 재분화한 신초의 기내증식은 BA 0.5 mg/L와 당 60 g/L가 함유된 1/2 MS가 양호하였으며 이들 유묘는 1/2 MS에 NAA 3.0 mg/L 단용배지에서 배양하였을때 발근하였다.
Chattopadhyaya, Banani;Banerjee, Joydeep;Basu, Asitava;Sen, Soumitra K.;Maiti, Mrinal K.
Plant Biotechnology Reports
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제4권2호
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pp.173-178
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2010
An efficient protocol for shoot regeneration was developed for sesame (Sesamum indicum L.) internodes using the transverse thin cell layer (tTCL) culture method. The frequency of shoot regeneration and the number of adventitious buds produced from regenerated shoots depend significantly on explant age, thickness of the tTCL sections, and the phytohormones supplemented to the culture medium. A combination of 6-benzyladenine (2.0 $mg\;l^{-1}$) and a-naphthaleneacetic acid (0.5 $mg\;l^{-1}$) was found to be the best phytohormone combination for shoot bud induction, with the maximum number of shoots obtained when the tTCL sections were 0.5-1.0 mm thick and derived from 4- to 6-week-old seedlings of sesame. Well-developed shoots were rooted on MS medium without phytohormones, and 80% of the regenerated plantlets were successfully established in soil.
Genetic transformation was affected by material of explant, age of callus, and medium of regeneration. Two rice seed cultivars (Ilpum and Baekjinju) and mediums were investigated in this study for enhancing regeneration of transgenic rice expressed AtBI-1 gene encoding the Arabidopsis thaliana Bax inhibitor. Regeneration rate of Ilpum rice transformant in gelrite of 5 and 8 g were 27.4% and 18.0%, respectively. In Baekjinju, regeneration rate of transformant was 5.4% and 4.3% in 5 and 8 g gelrite, respectively. The highest number of transformant plant in this study was regenerated from Ilpum cultivar on MS medium (30.4%) and was applied for the subsequent experiment. The callus regeneration rate of transformant were 40.7% in callus infection of up-side, it was higher regeneration then in the down-side (3.9%). The regeneration rate of callus of 25 days and 35 days were 14.7% and 38.6%, respectively. The most important application of this work is in genetic transformation of rice, particularly for improvement transgenic plant tissue culture protocol with high frequency of plant regeneration.
Park, Jong-In;Ahmed, Nasar Uddin;Kim, Hye-Ran;Nou, Ill-Sup
Journal of Plant Biotechnology
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제39권1호
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pp.13-22
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2012
Plant regeneration has been optimized increasingly by organogenesis and somatic embryogenesis using a range of explants with tissue culture improvements focusing on factors, such as the age of the explant, genotype, media supplements and $Agrobacterium$ co-cultivation. The production of haploids and doubled haploids using microspores has accelerated the production of homozygous lines in Brassicaceae crop plants. Somatic cell fusion has facilitated the development of interspecific and intergeneric hybrids in sexually incompatible species of $Brassica$. Crop improvement using somaclonal variation has also been achieved. Transformation technologies are being exploited routinely to elucidate the gene function and contribute to the development of novel enhanced crops. The $Agrobacterium$-mediated transformation is the most widely used approach for the introduction of transgenes into Brassicaceae, and $in$$vitro$ regeneration is a key factor in developing an efficient transformation method in plants. Although many other Brassicaceae are used as model species for improving plant regeneration and transformation systems, this paper focuses on the recent technologies used to regenerate the most important Brassicaceae crop plants.
Chaudhuri, Rituparna Kundu;Pal, Amita;Jha, Timir Baran
Plant Biotechnology Reports
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제2권3호
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pp.213-218
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2008
Swertia chirata is an endangered gentian species that prefers to grow at higher altitudes. This ethnomedicinal herb is known primarily for its bitter taste caused by the presence of important phytochemicals that are directly associated with human health benefits. Due to a continuous loss of habitat and inherent problems of seed viability and seed germination, alternative strategies for propagation and conservation are urgently required to prevent the possible extinction of this species. We have formulated a reproducible protocol for the rapid propagation and conservation of this plant using leaves taken from in vitro shoot cultures. Direct induction of more than seven shoot buds per explant was achieved for the first time when the explants were placed on MS medium supplemented with $2.22{\mu}M$ N-6-benzyladenine, $11.6{\mu}M$ kinetin, and $0.5{\mu}M$${\alpha}-naphthalene$ acetic acid. Direct organogenesis was noted exclusively from the adaxial surface of the basal segments of leaves. Leaves closer to the apical meristem were more responsive than those farther away from the meristem. Plants raised through direct organogenesis were evaluated for their clonal fidelity by chromosomal analysis and DNA fingerprinting. Complete plants were successfully transferred to the field condition and produced viable seeds. Given the enormous potential of this age-old medicinal plant in terms of potential health-benefitting drugs, this protocol can be used for commercial propagation purposes and to initiate future genetic improvement studies.
Petiole explant of Glehnia littoralis Fr. Schmidt was in vitro cultured MS plant medium(DUCHEFA co.) supplemented with various plant growth regulators and examined to find out their optimum combination and concentration for plantlet regeneration. We investigated optimal condition for efficient plant regeneration through adventitious shoot formation on MS plant medium with various kinds of plant growth regulators. Embryogenic calli and adventitious shoot formation were greatly influenced by plant growth regulators. Embryogenic calli induction showed a good response on MS medium supplemented with NAA and BA than others. Especially, combination of 1.0 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA on MS medium led to the greatest frequency in adventitious shoot. The results suggest that plant regulator selection be important factor to achieve an efficient regeneration.
Kim Mi-Sun;Jeon Jae-Heung;Youm Jung-Won;Kim Jae-Hyun;Lee Byung-Chan;Kang Won-Jin;Kim Hyun-Soon;Joung Hyouk
Journal of Plant Biotechnology
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제7권2호
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pp.129-134
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2005
Callus induction from a leaf explant has been achieved in Lilium Oriental hybrid 'Casa Blanca'. The highest frequency of callus induction was obtained on MS medium supplemented with 0.5 mg/L BA and 2.0 mg/L NAA after 2 months of culture. The cultures maintained continuously without change in color and type of callus when they cultured in the dark. Plantlet regeneration with a high frequency was achieved from induced calli on the same medium. A number of shoots are formed from one cluster of callus, and bulblets developed into intact plantlets after transfer to hormone-free MS medium. No phenotypic variations were observed among regenerants. Enhancement in plantlet regeneration via callus formation would be expected to facilitate the efficiency of transformation of this Oriental hybrid 'Casa Blanca'.
Protocols for in vitro conservation was developed for Coleus forskohlii. Plants maintained both in field served as explant source. Shoot tips and single node cuttings were used to optimize protocols for in vitro multiplication. MS basal medium supplemented with $0.54\;{\mu}M$ naphthalene acetic acid (NAA) and $8.87\;{\mu}M$ benzy-ladenine (BA) induced multiple shoots in shoot tips and nodes. Shoot multiplication was amplified with a gradual decrease of BA concentration, leading to its final omission after 4 months. Concomitant rooting on multiplication media enabled successful establishment extra vitrum. For in vitro conservation studies, experiments were carried out with 2-3 week maintained in vitro plants under standard and reduced culture conditions (SCC, RCC). In vitro plants could be successfully conserved in full strength MS medium (FMS) under SCC for 6 months without subculture with full potential to regenerate, producing viable shoots and nodes. The root production remained unaffected due to conservation, showing high rooting activity in mannitol and low temperature treatments. Preset low temperature (15 and $10^{\circ}C$) and reduction in media constituents does not appear to favour conservation, although the former accomplished conservation levels equal to (FMS) under SCC.
Mishra Ramya Ranjan;Behera Motilal;Kumar Deep Ratan;Panigrahi Jogeswar
Journal of Plant Biotechnology
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제8권1호
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pp.27-35
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2006
Plantlet regeneration in Asteracantha longifolia(L.) Nees (Acanthaceae), a medicinal herb has been achieved from seedling explants on basal MS medium. Three different seedling explants including node, internode and leaf segments on used. Of these three explant, leaf explants gave better response for both callus mediated organogenesis and direct multiple shoot induction. Number of explants showing differentiation of shout buds was higher on MS media supplemented with BA compared to kinetin. MS medium fortified with BA ($2.0mgl^{-1}$) and NAA ($0.5mgl^{-1}$) was found to be most suitable for both callus mediated organogenesis and elongation of shouts. The elongated shoots were successfully routed on MS medium fortified with NAA or IBA. Among them $0.1mgl^{-1}$ NAA or $0.2mgl^{-1}$ IBA provides better response for rhizogenesis. Regenerated plantlets were successfully established in soil where 85.4% or them developed into morphologically normal and fertile plants. RAPD profiling using four decamer primers confirmed the genetic uniformity of the regenerated plantlets and substantiated the efficacy and suitability of this protocol for in vitro propagation of A. longifolia.
In vitro mass multiplication of Vanilla planifolia was investigated using node as explant. Multiple shoots were developed in MS medium supplemented with $2.0mgl^{-1}$ 6-benzylaminopurine and $1.0mgl^{-1}$$\alpha$-naphthalene acetic acid. Multiple shoots were maintained for 6-T weeks with regular subculturing at the end of $3^{rd}$ week onto fresh medium. The maximum number of shoots at the rate of 12.8 per node segment was achieved over a period of four weeks. The elongated shoots were separated from the shoot clusters and were transferred onto half strength MS medium supplemented with indole-3-acetic acid ($1.0mgl^{-1}$) over a period of 28 days for induction of roots. The development of roots was observed on $7^{th}$ day of incubation. The in vitro raised plantlets were transferred to poly-cups, covered with polyethylene sheets and maintained under shade net for 25 days for hardening. Finally these plants were transferred to field and recorded that 85 % of tissue cultured plants were survived. From the present study, a simple and efficient micropropagation protocol was developed for Vanilla planifolia using single node segments as explants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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