• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권2호
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• pp.368-375
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• 2005

Batch cultures were carried out to optimize the exo-polysaccharide production by liquid cultures of Pleurotus ferulae. Among the various carbon sources, when $5\%$ of glucose was used, the maximum mycelial growth and exo-polysaccharide concentration reached were 8.78 g/l and 3.59 g/l, respectively. Yeast extract and polypeptone were identified as the most suitable nitrogen sources. In particular, when a mixture of $1\%$ of polypeptone and $0.8\%$ of yeast extract was used, 9.52 g/l of mycelial growth and 4.09 g/l of exo-polysaccharide were obtained. In the case of mineral sources, K$_2$HPO$_4$ and MgSO$_4$$\codt$7H$_2$0 were found to be the best mineral sources for mycelial growth and exo-polysaccharide production. Under the optimized culture conditions, the agitation speed and aeration were investigated for mycelial growth and exo­polysaccharide production in a jar fermentor. The maximum mycelial growth and exo-polysaccharide concentration at 1.5 vvm and 200 rpm obtained were 13.2 g/l and 4.95 g/l, respectively, after 10 days of culture, which were $76\%$ and $79\%$ higher than those of the basal medium. The specific growth rate was decreased with the increase of mycelial growth. However, the specific production rate of the exo-polysaccharide was proportionally increased with the specific growth rate. The proposed model profiles showed good agreement with the experimental results for the mycelial growth and exo-polysaccharide production. The specific production rate using the optimized medium was higher than that of basal medium.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권5호
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• pp.1253-1257
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• 2009

Exo-polysaccharide isolated from the culture of Grifola frondosa was modified by sodium periodate ($NaIO_4$) and sodium chlorite ($NaClO_2$) to delete polysaccharide part and phenolic compound, respectively, and was investigated what effect has each part of exo-polysaccharide against 2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in porcine kidney epithelial cells (LLC-PK1). Oxidative stress on LLC-PK1 cell was measured by cell viability, lipid peroxidation, superoxide dismutase (SOD), and glutathione peroxidase (GSH-px) activity. Exposure of LLC-PK1 cells to 1 mM AAPH for 24 hr resulted in significant decrease in cell viability, SOD, and GSH-px action, and significant increase in lipid peroxidation. The treatment of exo-polysaccharide and $NaIO_4$ modified sample protected LLC-PK1 cells from AAPH-induced cell damage such as cell viability, lipid peroxidation, SOD, and GSH-px activity in a dose dependant manner (10, 100, and $500{\mu}g/mL$). However, the treatment of $NaClO_2$ modified sample did not affect for cell viability, lipid peroxidation, SOD, and GSH-px activity. The antioxidant activity of exo-polysaccharide was significantly decreased on AAPH-induced LLC-PK1 cell system when phenolic compound was deleted. The antioxidant activity was significantly correlated with the content of phenolic compound of exo-polysaccharide.

• KSBB Journal
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• 제13권5호
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• pp.547-553
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• 1998

For the efficient production of a new exo-polysaccharide from Ganoderma lucidum ASI 7004, the optimum conditions and methods in submerged cultivation were investigated with an airlift fermenter system. The optimum aeration rate was 2.5 Wm at the initial pH 5.0 and 28$^{\circ}C$. The increase of dissolved oxygen concentration by pure oxygen supply during cultivation did not improved the exo-polysaccaride production and the mycelial growth. The maximum exo-polysaccharide production and the mycelial growth under the optimum culture condition were obtained in media of glucose 60g/L, yeast extract 6g/L, (NH4)2HPO4 1g/L and KH2PO4 0.5g/L. Under these optimum medium and culture conditions, about 7.15g/L of exo-polysaccharide and 13.9g/L of mycelial growth were producted, respectively.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVI)
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• pp.187-191
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• 2005

발효기에서의 균사체 생장과 세포외다당류의 생산을 위한 최적 배양조건을 조사하기 위하여 회분식 반응기를 이용하여 연구한 결과 최적 회전속도와 통기량은 각각 200 rpm과 1.5 vvm 었다. 최적 배양 환경하에서 5L발효기(working volume 2 L)에서 배양한 결과 각각 10.21 g/L 와 3.56 g/L의 mycelial growth와 exo- polysaccharide를 얻었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제24권4호
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• pp.459-464
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• 1996

Exo-polysaccharide (BWS) obtained from submerged cultivation of Ganoderma lucidum mycelium was fractionated. Antitumor activity of their fractions was investigated in comparison with the mycelial polysaccharide fractions. Eight kinds (BWS-DN, BWS-DA, BWS-DN-GI, BWS- DA-GI, MWS-DN, MWS-DA, MWS-DN-GI and MWS-DA-GI) of polysaccharide fractions were obtained by DEAE-cellulose ion exchange chromatography and Sepharose CL-4B gel chromatography from BWS and MWS, which were isolated from culture fiuid and mycelial cell, respectively. The anticomplementary activities (ITCH$_{50}$%) of the exo-polysaccharide fractions showing 15% to 30% were lower than those of mycelial polysaccharide fractions showing 15% to 70%. The acidic fractions of BWS-DA and BWS-DA-GI fractionated from BWS, showed the highest activity of 30%. In the MTT assay, BWS-DN and MWS against mouse leukemia L1210 exhibited high inhibition ratio of 86 and 89%, respectively at the concentration of 600 $\mu$g/ml. High inhibition ratio of 50% (IC$_{50}$) was achieved for BWS, BWS-DA and MWS-DA fractions against human colon adenocarcinoma COLO-205 and for BWS-DA, BWS-DN and MWS-DN fractions against human leukemia HL-60 at the concentra- tion of 300 $\mu$g/ml among the six polysaccharide fractions, respectively.

• KSBB Journal
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• 제16권4호
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• pp.370-375
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• 2001

생물고분자 생산 균주를 분리하여 동정한 결과, 분리균주는 Gram 음성의 간균으로 내생포자를 형성하지 않았으며, nitrate 환원과 catalase 반응에서 양성이고, oxidase 반응에서 음성인 통성 혐기성의 한 균주로 분류학상의 위치를 검토한 결과, Enterobacter sp.로 판단하였다 이 균주가 생성하는 생물고분자는 정색반응, CPC 침전, IR 분석 등에 의해 우론산을 함유한 산성의 다당인 것으로 추정되었다. TLC 및 GC에 의해 조사한 결과, mannose, galactose 및 galacturonic acid로 구성된 hetero 다당이었으며, 분자량은 약 3.7$\times$$10^{5}$이었다. 이다당의 수용액(0.5-2.0%, w/v)은 비뉴우톤 유체로 항복응력을 갖는 의가소성 유체로서 거동하였으며, 1.5% 농도 이상의 낮은 농도에서 겔 형성능을 나타내었다.다.

• 한국균학회지
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• 제27권1호통권88호
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• pp.82-86
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• 1999

영지버섯(Ganoderma lucidum WK-003) 균사체의 액체 배양에 의하여 세포외 생물고분자 물질의 산업적 생산을 위한 최적 조건을 검토하였다. 세포외 고분자물질 생산을 위한 산업용배지의 최적 농도는 molasses 5%와 CSL 2.5%에서 균사체 생장(12.4 g/l)과 균체외 다당체 생산(3.6g/l)이 최대를 나타났으며, 5 l 발효조 배양시에는 균사체 생장이 합성배지(8.1g/l)일때가 산업용배지(7.3 g/l)보다 높게 나타났으나, 균체외 다당체 생산은 합성배지(7.2 g/l)보다 산업용 배지(11.2 g/l)일 때가 더 높게 나타났다. 간 보호 효과는 합성배지와 최적화된 산업용 배지에서 생산된 균체외 다당체를 $CCl_4$ 독성이 유발된 rat에 경구 투여하였을 때 주요 지표를 나타내는 GPT활성은 산업용배지에서 생산된 균체외 다당체 인 경우 704IU/L에서 356IU/L로 낮추었으며, 합성배지에서 생산된 균체외 다당체는 704IU/L에서 349IU/L로 낮춘 결과를 보였다. 따라서 합성배지와 산업용 배지에서 생산된 균체외 다당체의 간 보호 작용은 거의 차이가 없는 것으로 나타났다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제12권4호
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• pp.379-386
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• 2005

천연배지에서 배양한 소나무잔나비버섯(Fomitopsis pinicola)균사체와 균체외 유리아미노산 및 다당류함량을 조사하였다. 배지로는 YM(yeast-malt broth), CP(citrus peel-broth) 및 GT 배지(green tea-broth)를 사용하였으며 $30^{\circ}C$, 150rpm에서 10일간 배양하였다. 균사체의 수율은 GT, CP 및 YM에서 각각 42.3, 34.2 및 $9.89\%$였으며, 균사체를 제거한 배양액의 탁도는 GT 0.14, CP 0.16, YM 0.22이었다. 균사체의 총 유리아미노산 함량은 YM 928.19 $mg\%$, CP 1060.53 $mg\%$, GT 764.83 $mg\%$였으며, 주 아미노산은 YM은 lysine, CP와 GT는 glutamic acid였다. 균체외 총 유리아미노산 함량은 YM 659.75 $mg\%$, CP 954.55 $mg\%$, GT 838.69 $mg\%$였으며, 주 아미노산은 YM, CP 및 GT 모두 glutamic acid였다. 균사체와 균체외 total 아미노산 유도체의 함량은 CP>GT>YM 순이었다. 균사체의 주 아미노산 유도체는 YM은 cystathionine, CP와 GT는 hydroxy proline이였다. YM, CP 및 GT의 균체외 주 아미노산 유도체는 hydroxy proline이였다. 균사체와 균체외 AIS 함량은 CP>GT>YM순이었다. 산가용성 다당류 함량은 GT($0.69\%$)>YM($0.39\%$)>CP($0.18\%$)순, 균체외 산가용성 다당류 함량은 GT($0.87\%$)>CP($0.69\%$)>YM($0.09\%$)순이었다. 균사체의 알칼리 가용성 다당류 함량은 CP($5.21\%$)>GT($5.18\%$)>YM($4.56\%$) 순, 균체외는 GT($6.79\%$)>YM($3.57\%$)>CP($3.01\%$)순으로, 균사체 함유 다당류는 산가용성($0.18{\sim}0.69\%$)에 비하여 알칼리가용성($4.56{\sim}5.21\%$)의 함량이 현저하게 높았다. CP 배지에서 배양한 균사체의 알칼리가용성 다당류를 겔 여과한 결과 hexose와 uronic acid로 구성된 분자량 500,000 dalton의 다당류와 분자량 10,000 dalton이하의 단백질이 결합한 단백 다당체로 추정되었다.

• 미생물학회지
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• 제31권1호
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• pp.27-36
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• 1993

Rhizobium fredii USDA191 은 대기 중의 질소를 환원하여 식물체의 생육에 필요한 질소원을 공급해주는 세균으로 다량의 체외 다당류를 합성한다. 전위요소 Tn5의 삽입에 의한 돌연변이 유도로 다당류결핍 변이주 R. fredii YKL293 가 분리되었으며 이 변이주로부터 Tn5 에 인접한 DNA 단편이 pUC19 에 클로닝되었고(plyk5293),이 DNA 단편을 탐침으로 하여 .lambda.NM1149 에 구성되 USDA191 genomic library 로부터 야생형체외다당류 합성관련 유전자(exo) 를 함유한 클론 .lambda. NM1149 22E 를 plaque 혼성화에 의하여 분리하였다. 클론 NM1149.22E 에 들어있는 exo 유전자를 pBR322 에 옮겨서 pJW33을 만들고, 재조합체 pJW33 을 Escherichia coli POII734 에 도입시켜 lacZ 구조유전자를 함유한 MudI 1734 가 exo 유전자의 프러모토와 융합되어 lacZ 구조유전자의 전사가 이루어지도록 하였다. 위와 같이 만들어진 재조합체 플라스미드 pUM21을 함유한 E. coli JM83 은 .betha.-galactosidase 를 합성하였으며, 야생형 tacZ 유전자를 갖고 있는 E. coli LE392 에 비해서 14-25배 정도 낮은 역가를 보였다.

• 한국균학회지
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• 제27권1호통권88호
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• pp.76-81
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• 1999

영지 균사체의 액체 배양에 의하여 생산된 세포의 다당시료 분획 중 우수한 항암활성을 나타내었던 산성분획인 BWS-DA-GI의 구조를 균사체 유래의 산성 다당 분획(MWS-DA-GI)과 비교하면서 조사하였다. BWS-DA-GI의 구성성분을 검토한 결과, 다량의 glucose, mannose 및 galactose와 미량의 xylose 및 fucose를 함유하였으며, glucose, galactose 및 mannose의 몰비는 2.5:2.1:2.5이었다. 반면, 균사체 유래의 산성 다당 분획인 MWS-DA-GI는 다량의 galactose, fucose, mannose 및 glucose와 미량의 xylose를 함유하였다. 또 BWS-DA-GI의 구조를 균사체 유래의 다당 분획인 MWS-DA-GI와 비교하면서 과요오드 산화, Smith분해, affinity chromatography 및 메칠화 분석으로 조사한 결과, 두 시료 모두 ${\beta}-1,3-glucan$이었고, BWS-DA-GI는 1,6분지를 보유하고 있는 반면, MWS-DA-GI는 1,4 및 1,6분지를 함께 보유하는 것으로 추정되었으며, 분자량은 각각 1,200,000 및 1,000,000 dalton이었다.