• 대한한의학회지
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• 제25권4호
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• pp.108-120
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• 2004

Objective : Euonymus alatus (Thunb.) Sieb (EA) is a traditional Korean herbal medicine, commonly used to treat tumors in Korea and China for centuries. Several earlier studies have indicated that EA exhibits anti-tumor properties, but its mechanism remains to be elucidated. In this study, we evaluated the molecular mechanism of EA in a human uterine leiomyomal smooth muscle cell (ULSMC) line. Methods : This study was evaluated by: (a), morphological changes by using acridine orange/ethidium bromide staining; (b), DNA fragmentation by TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL); and (c), sub-G1 cell analysis. Results : This study observed that EA treatment caused apoptotic cell death and depletion of intracellular glutathione (GSH) and that reduction of mitochondrial membrane potential was found to be involved in the initiation of apoptosis by EA. Conclusion : This results show that EA exerted clear cytotoxic effects and strongly inhibited the proliferation of ULSMC.

• 대한한방부인과학회지
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• 제18권3호
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• pp.67-76
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• 2005

Purpose : 귀전우(Euonymus alatus, EA)는 현재까지 항종양활성을 나타낸다고 보고되었지만 그 작용 메커니즘에 대해서는 아직 밝혀지지 않은 채 남아 있다. 본 연구에서는, 자궁근종세포(ULSMC)에서 EA의 분자적 수준에서의 작용메커니즘을 연구${\cdot}$검토하고자 하였다. Methods : EA의 열수추출액이 자궁근종세포(ULSMC)와 caspase-3 pretense의 활성도에 미치는 영향을 측정하였다. Results : 우리는 자궁근종에서 EA 유도 세포독성의 메커니즘을 검토하였는바, 근종 세포들은 20-200g/ml 농도의 EA추출물에 6시간 배양될 때, caspase-3가 활성화되고, 그때 세포들은 apoptosis를 유발하게 되었다. EA에 의한 apoptosis의 유도가 진행되었으며, cytochrome- c의 세포질분획에서 양적증가가 caspase-3의 활성보다도 우세하였다. GSH합성의 저해제인 5mM buthionine용액에 전처리는 EA유도 apoptosis를 용이하게 하지만 pan-caspase inhibitor인 Z-VAD-fmk용액 전 처리는 부분적으로 apoptosis유도를 억제하였다. 한편, EA는 건강한 지원자들로 부터 채취한 말초혈액 단핵세포들에 있어서는 독성의 효과는 없었다. Conclusion : 이들 결과들은 EA가 prooxidant로 작용을 하고 그리고 caspase-3 activation과 mitochondrial pathway를 경유하는 apoptosis를 유발한다는 것을 나타낸다. EA의 탕제약제로서 열수추출액이 항산화활성뿐만 아니라, 종양세포에 대한 세포독성효과를 나타낸다고 보고된 바, 이에 향후 근종치료에 대한 임상연구가 필요할 것으로 보인다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제1권3호
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• pp.213-220
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• 2001

Background: A previous study has shown that Euonymus alatus (EA) has an antidotic activities against inflammation, suggesting possibility that EA can exert this beneficial effects to liver injury by an initial protection against drug-induced hepatocyte demage. The present study was undertaken to evaluate the protective effect of EA-extract on experimentally induced hepatitis in ICR mice and to investigate some mechanisms responsible for its action. Methods: Water EA extract was used in this experiments. The mice received i.p. a dose of 700 mg/kg galactosamine (GalN) together with $5{\mu}g/kg$ of endotoxin (LPS), or received i.v. 12 mg/kg of concanavalin A (Con A). EA (4 mg/mouse) was administrated on day -2, -1 and 0 before induction of liver injury. Liver injury was assessed by measurement of serum alanin amino-transferase (SGPT) levels on 9 hr after GaIN.LPS, or 8 hr after con A administration. Results: Treatment with either GaIN or LPS alone did not cause hepatitis. However, simultaneous administration of GalN and LPS to mice resulted in LPS-dose dependent fulminant hepatitis. GaLN/LPS-induced liver injury was reduced when mice were given EA for 3 days before induction. This preventive effect of Ea was more prominent when EA was given by intraperitoneal route rather then by oral route. Pretreatment of EA or dexamethasone inhibited significantly $TNF{\alpha}$ production in GalL/LPS-injured mice. However, EA-treatment did not influence $TNF{\alpha}$-induced hepatitis in GalN-sensitized mice, suggesting that $TNF{\alpha}$ is likely to act as one of final mediators of endotoxin action and the protective effect of EA might be manifested chiefly by inhibition of endotoxin-induced $TNF{\alpha}$ production, not by blocking the $TNF{\alpha}$-action. Injection of Con A into mice evoked remarkable liver injury in a dose dependent fashion. This liver damage was reduced by EA-pretreatment. Dexamethasone significantly reduced both GalL/LPS-induced and Con A-induced liver damages, showing synergism with EA. However, indomethacin reduced only GalN/ LPS-induced hepatitis, not for Con A-induced hepatitis. Conclusion: These results led to the conclusion that EA may be able to contribute at least in part to prevent the drug-induced hepatotoxicity, and that its anti-hepatitis effects might be manifested directly by modulation of endogenous mediators, such as leukotriese D4, $TNF{\alpha}$ and free radical, and indirectly by regulation of immune mediated responses. Also these results suggested that EA could be developed as a potential antidotic agent.

• 약학회지
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• 제48권4호
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• pp.247-253
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• 2004

We investigated the hypoglycemic effect of formula containing Euonymus alatus (EA) and Mori Folium (MF) in multiple low dose (MLD) streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. In order to iduce hyperglycemic state 25 mg/kg of STZ was injected intraperitoneally for 5 consecutive days. SD rats were randomly divided into diabetic control and treatment groups. Treatment groups were administered with either 250 mg/kg of EA and 250 mg/kg of MF (E1Ml), or 500 mg/kg of EA mixed with same dose of MF (E2M2) for 3 weeks. Blood glucose levels and body weights were measured every 5th or 6th day. E1Ml and E2M2 both significantly reduced food intake, water intake, and fasting blood and urine glucose levels as compared to those in diabetic control group in a dose dependent manner. Body weight in diabetic control group was increased slightly after 3 weeks. Treatment group, however, showed gradual increase in body weights during 3 week-period. While plasma insulin levels of the diabetic control group were decreased to the level of 387$\pm$14 pg/ml from 534$\pm$36 pg/ml, those levels in E1Ml and E2M2-treated groups were both markedly increased by 13% and 26%, respectively. Urine glucose levels in E1Ml and E2M2-treated groups were also remarkably reduced by 17 and 26% compared to the levels of diabetic control group. While expression of membrane-bound glucose transporter-4 (GLUT-4) protein in skeletal muscle was reduced by 45% in diabetic control compared to the normal control, GLUT-4 protein expressions in E1Ml and E2M2-treated groups were augmented by 2 and 3.5 times compared to the diabetic control, respectively. Pancreatic HE staining experiments showed that E2M2-treated group revealed much less infiltrated mononuclear cells, indicating that E2M2 efficiently blocked insulitis induced by multiple low dose streptozotocin. Taken together, we conclude that formula containing EA and MF may prevent or delay the development of hyperglycemia through overexpression of GLUT-4 protein in skeletal muscle and prevention of insulitis.

• 대한한방부인과학회지
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• 제18권4호
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• pp.1-9
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• 2005

Purpose : 이 연구는 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대한 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb 추출물 (CWE) 의 증식억제, 항산화 작용 및 세포사 유발 효과를 검토하기 위해 이루어 졌다. Methods : SKBR3 세포주는 48시간 동안 다양한 농도 ($0-40\;{\mu}g/ml$)의 CWE를 첨가하면서 배양되었고, 세포의 생존 비율은 MTT 배양을 통해서 평가하였다. 또한 CWE의 증식억제 효과는 유방암 세포주의 세포사와 관련되어 있음을 형태학적인 변화와 올리고뉴클레오솜 DNA 분절을 통해 확인하였다. Results : CWE의 50%에서 효과를 나타내게 하는 약물농도인 $ED_{50}$ (effective dose 50%)은 $9.3+2.2{\mu}g/ml$이며, 약물의 농도에 의존하여 세포의 증식을 억제시켰다. 아울러, 다양한 농도와 배양시간에서 CWE가 ROS 생산을 억제하는 것을 밝힐 수 있었다. 따라서 이러한 작용과 항암예방효과는 농도와 노출 시간에 의존하였다. Conclusion : 이러한 관찰을 통해 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb의 열수 추출물은 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대해 강한 증식억제 효과와 강력한 항산화효과 및 세포사의 유발 효과를 가지는 것으로 인식할 수 있다.

• 대한한의학회지
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• 제26권1호
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• pp.26-36
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• 2005

Objective : Many traditional herbal remedies exhibit several beneficial effects including anti-inflammation. Euonymus alatus (Thunb.) Sieb (EA), known as Gui jun woo in Korea, has long been used in folk medicine to regulate Qi (bodily energy) and blood circulation, relieve pain, eliminate stagnant blood, and treat dysmenorrhea in oriental countries. The exact mechanism of the anti-inflammatory action of Euonymus alatus (Thunb.) Sieb (EA), however, has not been determined. Methods: Since there is increasing evidence that nitric oxide (NO) plays a crucial role in the pathogenesis of inflammatory diseases, this study was undertaken to address whether the methanol (MeOH) extract and its fractions of the bark of EA could modulate the expression of inducible NO synthase (iNOS) in thioglycollate-elicited murine peritoneal macrophages and murine macrophage cell line, RA W264.7 cells. Results: Stimulation of the peritoneal macrophages and RAW264.7 cells with $interferon-\gamma\;(IFN-\gamma)$ and lipopolysaccharide (LPS) resulted in increased production of NO in the medium. However, the butanol (BuOH) fraction of the MeOH extract of EA barks showed marked inhibition of NO synthesis in a dose-dependent manner. The inhibition of NO synthesis was reflected in the decreased amount of iNOS protein, as determined by Western blotting. The BuOH fraction did not affect the viability of RA W264.7 cells, as assessed by methylthiazol-2-yl-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay; rather, it reduced endogenous NO-induced apoptotic cell death via inhibition of NO synthesis in RAW264.7 cells. On the other hand, the MeOH and BuOH fraction showed no inhibitory effect on the synthesis of NO by RAW264.7 cells, when iNOS was already expressed by the stimulation with $IFN-\gamma$ and LPS. Conclusion: Collectively, these results demonstrate that the MeOH and BuOH fraction inhibits NO synthesis by inhibition of the induction of iNOS in murine macrophages.

• 대한한의학회지
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• 제22권2호
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• pp.53-63
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• 2001

목적 : 귀전우 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb로부터 얻은 추출물에 대하여 생리활성(항산화 활성)을 검토하였고, $amyloid-{\beta}{\;}(A{\beta})$가 지니는 Rat의 배양 Hepatocyte 세포독성에 대한 세포보호효과 및 세포막 지질의 과산화에 미치는 영향을 검토하였다. 방법 : 귀전우 추출물과 항산화제인 BHT. ascorbic acid 및 ${\alpha}-tocopherol$을 각각 linoleic acid에 소정량 첨가하고 $50^{\circ}C$에서 일정기간 저장하여 linoleic acid의 산화 안정성을 비교 검토하였으며, 또한 유지 자동산화의 촉진인자인 금속이온($Fe^{3+},{\;}Zn^{2+}$) 을 첨가하여 귀전우 추출물의 금속이온봉쇄효과를 조사하였다. 결과 :세포성지질의 과산화의 지표인 malondialdehyde(MDA)생성이 A{\beta}처리로 크게 증가하였으나 세포막파괴에 의한 세포파괴의 전형적인 현상이 귀전우 열수 추출물의 전처리와 후처리로 크게 감소되었다. 귀전우 추출물의 농도에 따른 항산화 효과는 전 농도별에서 높은 항산화 효과를 나타내었다. 그리고 시간 경과에 따른 항산화 효과에 있어서도 정도의 차이는 있지만 각 농도(5mg, 10mg 및 25mg)에서 유도기의 연장효과가 상당히 우수한 것으로 나타났다. 귀전우 추출물과 항산화제와의 비교에 있어서는 합성 항산화제인 BHT 및 ascorbic acid 만큼 우수한 항산화력을 나타내었으며, 천연 항산화제인 ${\alpha}-tocopherol$ 보다는 아주 우수한 것으로 나타났다. 귀전우 추출물의 금속이온 봉쇄효과에 있어서는 linoleic acid에 귀전우 추출물과 $Fe^{3+}$ 및 $Zn^{2+}$을 첨가한 군이 귀전우 추출물을 첨가하지 않은 군보다 항산화 효과가 아주 우수한 것으로 나타나 금속이온 봉쇄력이 강한 것으로 나타났다. 결론 : 귀전우 열수 추출물은 $A{\beta}$ 의한 세포파괴를 감소시키는 활성을 가지며 예방 및 보호효과를 나타내었고, hepatocyte에 대한 보호효과와 세포막지질 과산화의 저해 및 $A{\beta}$처리와 같은 독성에 대한 적응능력 향상을 통한 세포보호효과를 주는 것으로 간세포 보호 등의 임상적 응용에 그 효과가 기대된다.

• 대한수의학회지
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• 제34권2호
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• pp.307-313
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• 1994

We have previously shown that crude water extract of Euonymus alatus (EA) had strong prophylactic effect against chemically induced-and tumor cell implanted-cancer, and that the mechanisms responsible for its antitumor effects were due to nonspecific enhancement of the NK cell activities and the cell mediated immunity. However, it was unknown that any components of crude extract did work so, since it consisted of several components. In this paper, we fractionated the crude watar EA-extract into several fraction such as hexane-, ethylether-, ethyl acetate-, n-butanol- and water soluble-fraction, and screened the immune regulating activities of each fraction by the evaluation of lymphokine production and activated lymphocyte proliferation. As a result of the component fraction of EA-extract, it was found that n-butanol fraction was a potent immunostimulator, and the remained water soluble fraction also contained some stimulator, But, other fraction did not showed any remarkable effect. It is therefore suggested that EA-glycosides in n-butanol fraction may be new one of the potent biological response modifiers. The present study was also undertaken in an efforts to investigate the effects of elm-bark(EB, Ulmus clavidiana var japonica), which has been used for curing ulcer and inflammation as a folk medicine without any kind of experimental evidence to support this, on the cellular- and humoral-immune responses, lymphocyte function and NK cell activities in mice. Regardless of time and duration of EB-treatment, Arthus reaction and antibody response to SRBC were not modified by EB, but delayed hypersensitivity to SRBC was significantly enhanced only when EB was treated prior to SRBC-sensitization. EB slightly inhibited the proliferation responses of splenocytes to PHA-stimulation, but it significantly augmented the responses of these cells to S aureus Cowan 1 and Con A-activation, and these effects were manifested only when EB was added at culture initiation. EB did not influence Ig secretion of spleen cells but it significantly augmented the Con A-induced 1L 2 and MIF production of splenocytes. NK cell activities of splenocytes were markedly riled when effector cells were pretreated with EB and this augmentation was dine to the increase of binding affinity of effector cells to target cells and the target cell lytic activities of effector cells. These results led to the conclusion that EB triggers increase of cellular immune responses, such as delayed hypersensitivitiy, lymphokine production and NK cell activities. Also these results suggested that EB contains potent immune stimulants, which may provide the rational basis for their therapeutic use as one of the new biological response modifiers.

• 한국식품과학회지
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• 제37권6호
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• pp.898-904
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• 2005

본 연구는 화살나무의 줄기와 날개를 열수 추출하여 분자량 크기별로 네 분획(F I. F II, F III, F IV)으로 분리하여 각 분획물의 성분조성을 분석하였고, 이들 각 분획물의 생리활성을 알아보기 위해 DPPH를 이용한 유리 라디칼 소거능과 동물 세포에서 활성산소종 제거능에 대하여 조사하였다. 열수 추출물의 정성반응 결과, 네 분획물 모두 대부분 탄수화물이었고, 소량의 단백질을 함유하였으며, 일부 분획물에는 소량의 페놀 화합물 및 유기산이 함유되어 있었다. 주요 구성 성분인 총당과 총단백질 함량은 448mg/g과 21mg/g이었으며, 총 당의 함량은 F III가 가장 높았고, F IV, F II 및 F I의 순서였다. 네 분획물을 가수분해하여 이들의 구성당을 분석한 결과, 중성당은 mannose : fucose : galactose : glucose가 0.01 : 0.02 : 0.14 : 0.83의 비율로, 아미노당은 galactosamine : glucosamine이 0.01 : 0.99의 비율로 구성되어 있었으며, 전체 구성당 함량에서 중성당 : 아미노당의 비율은 0.94 : 0.04로 조성된 다당체였다. 분획물별로 총단백질과 구성 아미노산은 F IV가 가장 높았으며, F III, F II 및 F I의 순서로 함유하였다. 조 추출물에 함유된 아미노산의 종류와 양은 Glu>Asp>Pro>Gly>Leu>Val>Ser>Ala>Thr>Ile>Phe>Cys>His>Arg>Met>Lys>Try>Trp>Cys2의 순서로 19종의 아미노산이 분석되었으며, 특히 산성 아미노산과 중성 아미노산 함량이 높았다. 네 분획물을 각 농도별로 처리하여 DPPH 유리 라디칼 소거능을 조사한 결과는 $50-1,000{\mu}g/mL$ 처리했을 때 농도에 비례하여 네 분획물 모두에서 F IV, F III, F II 및 F I의 순서로 활성을 나타냈다. CHO-k1 동물 세포에서 활성산소종 제거능을 조사한 결과는, 분획물을 $1-100{\mu}g/mL$까지 처리한 농도에 비례하여 활성이 상승되는 것으로 나타났으나 $100{\mu}/mL$ 이상의 처리농도에서는 거의 변화를 보이지 않았다. 각 분획물별로 F IV이 가장 높은 활성을 보였으며, 그 다음 F III, F I이었으며, F II은 가장 낮은 활성을 나타냈다. 화살나무 열수 추출물 중에는 항산화능과 활성산소종 제거능을 나타내는 물질이 여러 가지 있을 것으로 추정되지만 분자량 크기별로 분획한 네 분획물의 정색반응과 성분조성을 조사한 결과, 주요 구성성분은 단백질이 결합되어 있을 가능성이 높으며, DPPH 유리 라디칼 소거능과 CHO-k1의 세포에서 활성산소종 제거능의 생리활성을 나타내는 다당체(bioactive carbohydrate)일 것으로 사료된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제46권5호
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• pp.592-599
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• 2017

본 연구에서는 비름나물, 참취, 민들레, 미나리, 부추, 곰취, 홑잎나물 등 식생활에서 많이 섭취되고 있는 7종 나물의 생시료와 데친 후의 수분, 단백질, 지질, 회분, 무기질, 식이섬유와 비타민 함량 등 영양성분 변화를 비교 분석하였다. 데치기 전후 7종 나물의 수분 함량은 각각 71.28~92.68 g/100 g과 76.90~92.09 g/100 g으로 시료 간 유의적인 차이를 나타내었다(P<0.05). 영양성분 비교 분석을 위해 수분을 제외한 모든 성분의 함량은 건조물 중량 100 g 기준으로 환산하였다. 단백질 함량과 조지방 함량은 곰취가 33.38 g/100 g과 4.50 g/100 g으로 분석시료 중 가장 높은 함량을 나타내었다. 조회분 함량은 비름나물이 19.89 g/100 g으로 가장 높은 함량을 나타내었고 홑잎나물에서 5.21 g/100 g으로 가장 낮은 함량을 나타내었다. 무기성분 중 칼슘 함량은 비름나물이 1,534.44 mg/100 g으로 가장 높은 함량을 나타내었으며 그다음으로 곰취, 민들레, 홑잎나물, 참취, 부추, 미나리 순으로 시료 간 유의적인 차이를 나타내었다(P<0.05). 철 함량은 민들레가 55.23 mg/100 g으로 가장 높은 함량을 나타내었으며, 나트륨 함량은 비름나물이 743.18 mg/100 g으로 기타 채소에 비해 유의적으로 높은 함량을 나타내었다. 칼륨과 마그네슘 함량은 비름나물에서 각각 7,710.63 mg/100 g과 1,786.67 mg/100 g으로 가장 높은 함량을 나타내었다. 총 식이섬유는 홑잎나물, 부추, 미나리, 비름나물, 곰취, 참취, 민들레 순으로 홑잎나물에서 59.75 g/100 g으로 가장 높은 함량을 나타내었다. 리보플래빈 함량은 곰취와 참취가 각각 3.10 mg/100 g, 3.08 mg/100 g으로 기타 채소보다 유의적으로 높은 함량을 나타내었다(P<0.05). 비타민 C 함량은 홑잎나물에서 468.28 mg/100 g으로 기타 나물보다 유의적으로 높은 함량을 나타내었으며 민들레 시료는 22.48 mg/100 g으로 가장 낮은 함량을 나타내었다. 주요 영양소 권장섭취량에 대한 기여도를 보면 단백질, 칼슘, 식이섬유, 비타민 등 성분에 대해서는 홑잎나물이 기여도가 높았다. 철 성분은 민들레가 기여도가 컸으며 칼륨, 마그네슘, 나트륨 등 성분은 비름나물이 성인 권장섭취량에 대한 기여도가 높았다. 이상의 결과로부터 나물은 종류에 따라 영양성분 함량의 차이가 있으며, 어느 한 종류의 나물을 섭취하기보다 여러 가지 나물을 골고루 섭취하는 것이 바람직할 것으로 생각된다.