This study was carried out that to investigate the effects of amino acids supplemented with culture medium on development of porcine embryos cultured in vitro. Cumulus oocyte complexes (COCs) were cultured in the maturation medium containing hormones (0.5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ LH, 0.5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ FSH and 1$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ estradiol-17${\beta}$) for 20-22 h at 39$^{\circ}C$ in an atmosphere of 5% CO$_2$in air. Subsequently, COCs were cultured in hormone-free maturation medium for 20-22 h. After maturation for 40-44h, oocytes were removed cumulus cells by pipetting and cultured with epididymal sperm for 5 h in the mTBM. Embryos obtained were divided in 4 groups (1) cultured in NCSU 23 containing 0.4% BSA to blastocyst stage(Control), (2) essential amino acids (EA), (3) non-essential amino acids (NA), (4) mixture of essential and non essential amino acid (EA+NA). All treated groups(2-4) were used a glucose free NCSU 23 medium supplemented with pyruvate (0.33 mM), lactate (4.5 mM) to morula stage. From morula to blastocyst stage embryos of all treated groups were cultured in NCSU 23 containing 0.4% BSA. The rates of cleaved oocytes at 48 h after IVF were from 82% to 88% in the groups of control, EA, NA and EA+NA, respectively. The in vitro developmental rates into blastocysts in the groups of EA and EA+NA were significantly (P<0.05) higher than those of group of control (35.1, 35.4 vs. 19.4%, respectively), however, no significant (P<0.05) between control and NA. In conclusion, supplemented with essential amino acid or mixture of essential and non essential amino acid in the culture medium at morula stage increased the rate of development to blastocyst on in vitro produced porcine embryos.
Park Sun Young;Kim Jong-Keun;Kim In Jin;Choi Bong Kyu;Jung Kyu Yong;Lee Seoul;Park Kyung Jin;Chairoungdua Arthit;Kanai Yoshikatsu;Endou Hitoshi;Kim Do Kyung
Archives of Pharmacal Research
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제28권4호
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pp.421-432
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2005
In order to understand the renal reabsorption mechanism of neutral amino acids via amino acid transporters, we have isolated human L-type amino acid transporter 2 (hLAT2) and human T-type amino acid transporter 1 (hTAT1) in human, then, we have examined and compared the gene structures, the functional characterizations and the localization in human kidney. Northern blot analysis showed that hLAT2 mRNA was expressed at high levels in the heart, brain, placenta, kidney, spleen, prostate, testis, ovary, lymph node and the fetal liver. The hTAT1 mRNA was detected at high levels in the heart, placenta, liver, skeletal muscle, kidney, pancreas, spleen, thymus and prostate. Immunohistochemical analysis on the human kidney revealed that the hLAT2 and hTAT1 proteins coexist in the basolateral membrane of the renal proximal tubules. The hLAT2 transports all neutral amino acids and hTAT1 transports aromatic amino acids. The basolateral location of the hLAT2 and hTAT1 proteins in the renal proximal tubule as well as the amino acid transport activity of hLAT2 and hTAT1 suggests that these transporters contribute to the renal reabsorption of neutral and aromatic amino acids in the basolateral domain of epithelial proximal tubule cells, respectively. Therefore, LAT2 and TAT1 play essential roles in the reabsorption of neutral amino acids from the epithelial cells to the blood stream in the kidney. Because LAT2 and TAT1 are essential to the efficient absorption of neutral amino acids from the kidney, their defects might be involved in the pathogenesis of disorders caused by a disruption in amino acid absorption such as blue diaper syndrome.
Two experiments were conducted to standardize in ovo injection of amino acids (AA) and to evaluate the effect of in ovo injection of limiting AA(s) on pre and post hatch growth performance, immune response and development of digestive organs. Combinations of essential and non-essential amino acids (Lys+Arg, Lys+Met+Cys, Thr+Gly+Ser, Ile+Leu+Val and Gly+Pro) were injected into 50 eggs in each treatment group at 14 d of embryonic age. Standardization of injection site, needle length and embryonic age revealed that when AA were injected in to the broad end of the egg with a 11 mm needle and at the narrow end with a 24 mm needle both at the 7$^{th}$ and 14$^{th}$ d of incubation there was poor hatchability. However, better hatchability was recorded when the AA were injected in the narrow end of the egg with a 11 mm needle and in the broad end with a 24 mm needle on the 14$^{th}$ d of incubation. The chick to egg weight ratio was higher (p<0.018) when AA were injected on the 14$^{th}$ d of incubation. When a combination of amino acids were injected a 63.6 or 63.2 g difference in body weight of bird at 21 d was recorded between uninjected control and Ile+Leu+Val or Gly+Pro group, respectively. Higher feed intake (p<0.047) was recorded in the AA injected groups and feed conversion ratio (FCR) was numerically better in Gly+Pro, Lys+Met+Cys AA injected groups than in the uninjected control. Significantly higher immune response to cell mediated (p<0.033) and humoral (p<0.002) immunity was observed in in ovo amino acid injected birds, especially in Lys+Met+Cys, Thr+Gly+Ser or Ile+leu+Val groups. The digestive organ weights at 21 d did not differ between specific AA injected groups and the uninjected control. In ovo injected amino acids may act as immunomodulators and their role in gastrointestinal development needs further research.
Changes in taste components of Backilju, an traditional alcoholic beverage of Korea, were investigated. Ethanol(17%) was the most abundant, and then isoamylalcohol(23mg%) and methanol(8mg%) were also detected in a small amount in Backilju. Major non-volatile organic acids were lactic and malic acid, followed by citric, fumaric and succinic acid. Arginine, phenylalanine and glutamic acid were major free amino acids and essential amino acid content was 230∼560 mg%, which was 45∼48% of total free amino acids. The major fatty acid of total lipid was palmitic acid(37∼43%). It has been found that the Backilju contained more free amino acids and alcohols than other Korean Yokjus.
This study was carried out to investigate the proximate composition , free sugars,amino acids, organic acid, minerals and extracted color of the fruit of paper mulberry (Broussonetia Kazinoki Siebold) . the proximate compositins were 6.1% of moisture, 15.9% of crude protein, 28.5% of crude fat, 8.9% of crude ash and 40.6% of carbohydrates in the fruit of paper mulberry. Free sugars showed low content as 0.1% of glucose , 0.1% of sucrose, 0.1% of fructose and 0.01% of sorbitol, respectively. In amino acid composition of the fruit of paper mulberry, glycine was the highest in the content, followed by methionine, aspartic acid and alanine, The ratio of essential /total mino acids was 0.43 . The richestmineral contained in the fruit of paper mulberry was Ca and followed by K and Mg. Optical density (490-500nm) of the extracted color with 50% ehtanol and 80 % ethanol were 0.75 and 0.30 , respectively.
This study was conducted to determine the nutritional value of domestic cherry tomato varieties (Summerking, Qutiquti, and Minichal). The levels of amino acids, amino acid derivatives, and ${\gamma}-aminobutyric-acid$ (GABA) were analyzed using ion chromatography. In domestic cherry tomatoes, eighteen free amino acids were found including L-glutamic acid (L-Glu), L-glutamine (L-Gln), and L-aspartic acid (L-Asp). L-Glu was the most abundant amino acid, ranging from 1,533.17 mg/100 g to 1,920.65 mg/100 g (dry weight). The next abundant amino acids were L-Gln, ranging from 784.68 mg/100 g to 1,164.36 mg/100 g and L-Asp, ranging from 320.73 mg/100 g to 387.22 mg/100 g. Domestic cherry tomatoes contained eight essential amino acids except tryptophan and the total essential amino acid content was 297.30~432.43 mg/100 g (dry weight), which was 8.92~10.61% of total free amino acid. Several amino acid derivatives were found: L-carnitine (L-Car), hydroxylysine (Hyl), o-phosphoethanolamine (o-Pea), phosphoserine (p-Ser), ${\beta}-alanine$ (${\beta}-Ala$), N-methyl-histidine (Me-His), ethanolamine ($EtNH_2$), and L-citrulline (L-Cit). L-Car, transporting long-chain fatty acid into mitocondrial matrix, was the most abundant amino acid derivative in all domestic cherry tomatoes. A high level of GABA (313.18~638.57 mg/100 g), known as a neurotransmitter, was also found in all three domestic cherry tomatoes. These results revealed that domestic cherry tomatoes have a good balance of nutrient and bioactive compounds. Therefore, cherry tomatoes can be used as a functional food material.
Because yeast is rich in vitamins, nucleotides and essential amino acids, it has been used as a nutrient and dietary supplements. Particularly yeast extract functions as a seasoning, flavor enhancer in meats. In this study, naturally occurring insoluble components during yeast extract process by autolysis were microanalyses by using SEM, XRD, HPLC, GC, FT-lR and DSC. On the basis of useful datas, authors have characterized the analytical points for the purpose of improving products in the preparation of yeast extract.
사람의 정상 골모세포 FOB에서 아미노산 수송계 L의 발현 및 이들 수송계 L을 통한 아미노산 수송특성을 밝히기 위하여, FOB 세포에서 RT-PCR, western blot 분석 및 아미노산 uptake 실험 등을 수행하여 다음과 같은 결과들을 얻었다. FOB 세포에서 아미노산 수송계 L의 두 아형인 LAT1, LAT2및 그들의 보조인자 4F2hc의 발현을 확인할 수 있었다. FOB 세포에서 $_{L}-leucine$의 수송은 $Na^+$-비의존적이었다. FOB 세포에서 $_{L}-leucine$의 수송은 아미노산 수송계 L의 선택적 억제제인 BCH에 의해 완전히 차단되었다. FOB 세포에서 여러 아미노산들에 의한 L-leucine수송억제 실험결과는 Xenopus oocyte에서 시행되어 보고되어진 LAT1과 LAT2 수송억제 실험 결과의 특성을 모두 포함하였다. 본 연구의 결과로 사람의 정상 골모세포주인 FOB에서 는 세포성장 및 증식을 위한 중성 아미노산의 수송에 아미노산 수송계 L의 두 아형인 LAT1과 LAT2가 중요한 역할을 하고 있음을 확인할 수 있었다.
This study was conducted to investigate the nutritional constituents of pine pollen and the effects of pine pollen on rat liver. Using the chemical components analysis method, the constituents of pine pollen are crude protein(13.97%). crude lipid (6.50%), crude ash (3.25%). Detectable in pine pollen are main fatty acids and non-essential amino acids such as glutamic acid and aspartic acid such as oleic and linoleic acid and 18kinds of amino acid including essential amino acids. The effects of pine pollen on rat liver fed with a high fat diet for 6 weeks showed significant decrease in total lipid and triglyceride as compared with the group fed with a fat diet only. Total cholesterol content decreased by 20.33%. No significant difference was found in total protein content of each group. Pine pollen Is efficacious in preventing geriatric diseases (arteriosclerosis, hyper-lipidemia and cardiovascular system-related diseases).
땅콩 보존품종에 대한 단백질 특성을 조사하여 고단백 유전자원을 선발하고 아미노산 함량의 품종 및 환경변이를 밝혀 고단백 양질 아미노산 조성 품종육성을 위한 자료를 얻을 목적으로 시험하였다. 작물시험장에서 수집한 땅콩 164품종의 단백질 함량을 분석하였으며, 5개 지역에서 재배된 9개 장려품종의 아미노산 변이와 분획 단백질의 아미노산 특성 차이를 검토하였다. 1. 공시된 땅콩 164품종의 평균 단백질 함량은 24.5%였으며 최고 28.7%, 최저 19.5%로 9.2%의 변이를 보였다. 2. 초형에 따른 단백질 차이는 적었으며, 립중에 따라서는 소립이 대립중에 비해 단백질 함량이 높았으며 특히 Spanish type 품종에서 립중에 따른 단백질 차이가 컸다. 3. 품종의 도입지역에 따라서는 대만이나 Philippine 품종들이 단백질 함량이 높았고 국내 육성품종과 일본품종은 낮았다. 4. 단백질 함량과 100립중, 주당협실중 간에는 부의 상관을 보였으나 유의성은 인정되지 않았고, 기름함량과는 정의 상관을 나타냈다. 5. 품종 및 재배지역에 따른 필수 아미노산과 반아미노산 총량의 차이가 있었으며 aspartic acid도 품종과 지역간 차이가 인정되었고, arginine, lysine, methionine, glutamic acid, glycine, tyrosine은 지역간 차이가 phenylalanine은 품종차이가 있었다. 6. 땅콩 장려품종에서의 제한 아미노산은 isoleucine, methionine, threonine, arginine, lysine이었다. 7. 단백질 fraction별로 볼 때 아미노산은 prolamins, globulins, glutelins, albumin순으로 많았으며 필수아미노산 비율은 globulins에서 가장 많았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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