This study was carried out to investigate the effects of vitamin E on the prevention and treatment of Babesia gibsoni. Fifteen mongrel dogs, uninfected with Babesia spp, were assigned to three groups according to vitamin E(${\alpha}-tocopherol$) concentrations in the RBC. The concentrations in each of the three groups were, respectively : ${\alpha}-tocopherol$ in RBC less than $30{\mu}g/{\mu}l$(Group I), $30{\mu}g/{\mu}l{\sim}60{\mu}g/{\mu}l$(Group II), more than $60{\mu}g/{\mu}l$(Group III). Artificial infection was accomplished by injecting $2{\times}10^7{\sim}2{\times}10^8$ erythrocyte of Babesia gibsoni-infected dog into the cephalic vein. We investigated the clinical signs, vitamin E concentrations in RBC and serum, Vitamin A concentrations in serum, hematological values, white blood cell(WBC) viability and RBC membrane osmotic fragility after infection of Babesia gibsoni for a period of 20 days at 5 day intervals. The results obtained are summarized as follows : 1. After infection by Babesia gibsoni, clinical examination revealed depression, anorexia, pale mucous membranes, dark brown urine and diarrhea in proportion as time went on. After 10 days of infection, one dog each of Groups I, II and III revealed depression and anorexia. Two dogs in Group I and one dog each of Groups II and III showed dark brown urine after 15 days. Diarrhea was observed in one dog in each of the 3 groups after 20 days of infection. 2. After 5 days of infection, two dogs in each of Groups I, II and III showed Babesia gibsoni in RBC of blood smear stained with Giemsa. At the 15th day after infection with Babesia gibsoni, they were observed in all experimental animals. After both 5 days and 10 days of infection, the rate of Babesia gibsoni parasitized RBC(permillage, ‰) was 1‰, and increased as time went on. 3. After 5 days of infection by Babesia gibsoni, Group I, which had the lowest vitamin E concentration, showed significantly decreased RBC and PCV levels(p < 0.01). Group II and group III also showed significantly decreased RBC and PCV levels after 15 days of infection(p < 0.05). Particularly after 10 days of infection, Group I showed lower values in RBC and PCV levels compared to Groups II and III. WBC, RBC, fibrinogen and total protein levels between the groups did not differ during experimental periods. 4. According to the WBC differential counts, the ratios of neutrophil to lymphocyte showed a tendency to be slightly higher in Group III (more than $60{\mu}g/{\mu}l$) than in Groups I and II. 5. WBC viability did not differ between the groups. 6. RBC membrane osmotic fragility did not differ between the groups.
The characteristics of anion exchange with internal $HCO_3\;^{-}\;(or\;OH^-)$ was studied by determining the time course of hemolysis in isoosmotic ammonium salt solution in human erythrocytes. The effects of inhibitors, pH and temperature on the exchange between internal $HCO_3\;^-\;(or\;OH^-)$ and external $Cl^-$ were observed and the permeabilities of various organic and inorganic anions were also measured. The results were compared with data previously reported from the experiments using radioisotopes. The results are as follows; 1) SITS $H_2DIDS$ and furosemide inhibited the hemolysis of erythrocytes in isoosmotic $NH_4Cl$ solution in a dose·dependent manner, and the concentrations for lengthening twice the time for $half-hemloysis(t_{1/2})\;were\;2.3{\times}10^{-7},\;1.3{\times}10^{-7}\;and\;2.5{\times}10^{-5}M$, respectively. 2) Acetazolamide also shifted the time-dependent hemolytic curve to the right in a dose-dependent manner, and the concentrations for lengthening twice $t_{1/2}\;was\;2.4{\times}10^{-5}M$. 3) The time-dependent hemolysis was delayed by decreasing pH from 7.0 to 6.2, but w·as not affected by the change of pH in the range of 7.0 to 8.2. 4) The time for $half-hemloysis(t_{1/2})$ showed a temperature-dependency and Arrhenius plot exhibited a break point at $20^{\circ}C$. The apparent activation energy calculated from this plot was 18.1 kcal/mol between $2^{\circ}C-20^{\circ}C$ and 11.2 kcal/mol between $20^{\circ}C-37^{\circ}C$, respectively. 5) The apparent permeabilities of various inorganic anions based on $t_{1/2}$ were in the order of $Cl^->NO_{3}\;^->SCN^->SO_4\;^{2-}>SSO_3\;^{2-}>HPO_4\;^{2-}$. which was similar with the previous reports based on the experiment using radioisotopes. The results Obtained from this study are comparable with the previous data reported from the experiments using radioisotopes. This indicates that the hemolysis of erythrocytes in isoosmotic ammonium salt solution can be used as a simple and good method for the study of anion exchange in erythrocyte membrane.
70% ethanolic extracts were prepared from the three mutant rice cultivars with giant embryo termed Shinsunchal-giant embryonic rice, Whachung-giant embryonic rice and Nampung-giant embryonic rice, and its antioxidative and antimutagenic properties were evaluated and compared. For analysing antioxidativity, various antioxidative indices, such as electron donating ability to DPPH radical, scavenging capacity to hydroxyl radicals generated by Fenton reaction, scavenging capacity to superoxide radicals generated by HPX/XOD system, inhibitory effect on autoxidation of linoleic acid and inhibitory effect on membrane lipid peroxidation derived from rabbit erythrocyte ghost, were determined. For analysing antimutagenicity, suppressive effects on mutagenesis induced by the chemical mutagen, mitomycin C, were measured using E. coli PQ 37 as a indicator cell. The results showed that for both antioxidativity and antimutagenicity the giant embryonic rices were more effective compared to the general cooking rice, Among the giant embryonic rice cultivars, Nampung-giant embryonic rice tended to be most effective, showing its scavenging activity to DPPH radical, superoxide radical and hydroxyl radical, and inhibitory activity to lipid peroxidation was 2,3-, 3,3-, 1.7-, and 2.5-fold greater than those of normal rice, respectively.
Functionality changes by germination of giant embryonic rice and pigmented rice were evaluated with focusing on antioxidative activities of 70% ethanolic extracts. Overall, reducing power of giant embryonic rice and pigmented rice was higher than that of normal brown rice, and the germination of rices tend to enhance their reducing powers. In vitro and ex vivo experiments employing linoleic acid peroxidation and rabbit erythrocyte membrane peroxidation systems, respectively, revealed inhibitory effect on lipid peroxidation was highest in pigmented rice, followed by giant embryonic rice, and normal brown rice from high to low order. Superoxide radical-scavenging activity decreased in order of pigmented rice > giant embryonic rice > normal brown rice, and germination also enhanced their superoxide scavenging ability compared to non-germinated controls. Hydroxyl radical-scavenging ability was highest in pigmented rice, followed by giant embryonic rice, and normal brown rice. Despite marked enhancement in hydroxyl radical-scavenging ability of normal brown rice by germination, order of scavenging ability was not altered among germinated rices. Same trend as with in vitro ROS scavenging was observed for ex vivo scavenging potency on ROSs generated by TPA stimulation in HL-60 cells. Germination-associated differential increase in ROS scavenging ability of pigmented rice and giant embryonic rice, characterized by no induction of cytotoxicity, was observed.
Lim, Sun-Woo;Jung, Ju-Young;Kim, Wan-Young;Han, Ki-Hwan;Cha, Jung-Ho;Chung, Jin-Woong;Kim, Jin
Applied Microscopy
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제32권2호
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pp.91-105
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2002
Urea transport in the kidney is mediated by a family of transporter proteins that includes renal urea transporters (UT-A) and erythrocyte urea transporters (UT-B). The cDNA of five isoforms of rat UT-A, UTA1, UT-A2, UT-A3, UT-A4, and UT-A5 have been cloned. The purpose of this study was to examine the expression of UT-A (L194), which marked UT-A1, UT-A2 and UT-A4. Male Sprague-Dawley rats, weighing approximately 200 g, were divided into three group: control rats had free access to water, dehydrated rats were deprived of water for 3 d, and water loaded rats had free access to 3% sucrose water for 3 d before being killed. The kidneys were preserved by in vivo perfusion through the abdominal aorta with the 2% paraformaldehyde-lysine- periodate (PLP) or 8% paraformaldehyde solution for 10 min. The sections were processed for immunohistochemical studies using pre-embedding immunoperoxidase method and immunogold method. In the normal rat kidney, UT-A1 was expressed intensely in the cytoplasm of the inner medullary collecting duct (IMCD) cell and UT-A2 was expressed on the plasma membrane of the terminal portion of the shortloop descending thin limb (DTL) cells (type I epithelium) and of the long-loop DTL cells (type II epithelium) in the initial part of the inner medulla. Immunoreactivity for UT-A1 in the IMCD cells, was decreased in dehydrated animals whereas strongly increased in water loaded animals compared with control animals. In the short-loop DTL, immunoreactivity for UT-A2 was increased in intensity in both dehydrated and water loaded groups. However, in the long-loop DTL of the outer part of the inner medulla, immunoreactivity for UT-A2 was markedly increase in intensity in dehydrated group, but not in water loaded group. In conclusion, in the rat kidney, UT-A1 is located in the cytoplasm of IMCD cells, whereas UT-A2 is located in the plasma membrane of both the short-and long-loop DTL cells. Immunohistochemistry studies revealed that UT-A1 and UT-A2 may have a different role in urea transport and are regulated by different mechanisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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