목 적: 재조합 표피성장인자는(rhEGF) 다양한 표피와 상피 세포의 증식을 자극하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 방사선이 조사된 섬유아세포의 증식에 rhEGF의 효과를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 인간에서 기원한 섬유아세포를 초대배양(primary culture)한 세포를 이용하였다. 대웅제약에서 유전자 재조합하여 대장균에서 발현하여 생산한 rhEGF를 제공 받아 사용하였다. 방사선 조사는 4 MV 선형가속기(CLINAC 600C, Varian, Palo Alto, CA, USA)를 이용하여 분당 2 Gy 내외의 선량률로 균일하게 조사하였다. 조사된 방사선량은 8 Gy이었다. 생존세포수는 trypan blue 염색법을 이용하였고, rhEGF에 의한 세포주기의 변화를 관찰하기 위하여 유세포 분석법을 시행하였다. 결 과: 4 Gy의 방사선을 조사한 후 7일째까지 생존 세포수를 trypan blue 염색법을 이용하여 측정한 결과 모든 rhEGF 농도(1.0 nM, 10 nM, 100 nM, 1,000 nM )에서 방사선 조사 단독군보다 생존세포 수가 많았다. 방사선을 조사하지 않은 섬유아세포에서 rhEGF를 10 nM처리한 후 FACS scan을 시행한 결과 세포주기 중에서 S기 비율이 증가하였다. 결 론: 방사선이 조사된 섬유아세포에서 rhEGF를 투여하면 rhEGF를 투여하지 않은 섬유아세포에 비해서 세포증식이 가속됨을 확인할 수 있었다.
The purpose of this study was to evaluate the effect of orthodontic force on periodontal cellular activity by immunoperoxidase stain of epidermal growth factor, one of the tissue hormone. And supplementarily, to investigate of the changes of periodontal structures, periodontium was stained by H-E, Masson's Trichrome, P. A. S. stain after orthodontic force application. The experimental animals were four young adult dogs of average 8 month old. The fixed orthodontic appliance was cemented on mandibular right 4th premolar and 1st molar of each animal as experimental site. Mandibular left 4th premolar area of the same animal was used as control. The appliance consist of two silver crown soldered with 0.030' tube, $0.018\times0.022'$ S.S. sectional arch wire, and 0.009' open coil spring for manifestating of orthodontic force for bodily tooth movement of mandibular 4th premolar toward mesial direction. Experimental group was sacrificed at 1, 2, 3, 5 weeks from beginning of the experiment, and was investigated immunohistochemically and bistochemically by several staining methods. Findings were as follows: 1. The degree of EGF staining in control group was highest in epithelium of periodontium, and osteoclasts, osteoblasts and fibroblasts around the capillary were stained at higher level in periodontium. Generally, control group shows positive distribution of EGF all around the periodontal area. 2. The degree of EGF staining in control and 5 week group were similar, and did not show the significant different level between tension and pressure side. 3. All of 1, 2, 3 week group showed the same staining degree and distribution of EGF, and the tension side was more positive reaction of EGF stain than the pressure side. 4. The features of collagen fiber and periodontal fiber arrangement observed by H-E, Masson's Trichrome and P. A. S. stain revealed that oblique periodontal fibers were strectched in tension side, compressed in pressure side of all experimental group. Some fiber group in pressure side of 5 week group recovered the regular arrangement along the capillaries.
The epidermal growth factor (EGF) may play a pathological role in hepatocellular carcinoma (HCC). However, the conclusions of published reports on the relationship between the EGF $61^*A/G$ polymorphism and HCC risk remain controversial. To derive a more precise estimation we performed a meta-analysis based on 14 studies that together included 2,506 cases and 4,386 controls. PubMed, EMBASE, Web of Knowledge and the Chinese National Knowledge Infrastructure (CNKI) databases were used to retrieve articles up to August 1, 2014. The crude odds ratios (ORs) with 95% confidence intervals (95%CIs) were calculated to evaluate the association. Meta-analysis results showed a significant association between the EGF $61^*A/G$ polymorphism and HCC risk in all four genetic models (allele model: OR=1.25, 95%CI=1.12-1.40; dominant model: OR=1.32, 95%CI=1.14-1.54; recessive model: OR=1.33, 95%CI=1.12-1.58; ho-mozygous model: OR=1.59, 95%CI=1.33-1.90). Moreover, significant associations were observed when stratified by ethnicity, source of controls, etiology and genotype methods. Thus, this meta-analysis suggests that the G-allele of the EGF $61^*A/G$ polymorphism is associated with an increased risk of HCC, especially in Asians and Caucasians, without influence from the source of controls or etiological diversity. Further studies with larger population sizes are needed to confirm these results.
Effect of recombinant human epidermal growth factor (rhEGF, DWP401) on fetal external, visceral and skeletal malformation during organogenesis was examined. Pregnant Sprauge-Daw ley rats were administered with 0.2, 1 and 5mg/kg/day subcutaneously on gestation day 6 through 16. Dams were sacrified at 20th day of gestation. Materal body weight, food consumption and clinical observation were not changed. Significant dose-dependent increase of relative and absolute liver weight were observed in the treatment group, whereas other organ weights were not changed. Placental weight of 1 and 5mg/kg/day group and number of resorption in 5mg/kg/day treatment group were significantly increased. External and visceral malformation of fetuses were not observed with treatment. However, skeletal variations(increase of asymmetry sternebrae, decrease of dumb-bell and asymmetry sternbrae at 5mg/kg/day, and fused stemebrae at 5mg/kg/day) were observed. These results showed that rhEGF (DWP401) may not have embryo and/or fetal developmental toxicity effect in rats.
각질형성세포의 배양법이 개발 후 피부 결손 부위의 치료에 인체 각질형성세포를 배양하여 얻어진 표피를 이식하거나 세포부유물을 도포하는 기존의 방법들은 trypsin 처리 과정을 거치면서 배양된 세포의 부착능력을 가진 단백질이 손상되어 성공적인 피부 재생이 불가능하다. 이 연구에서는 면역결핍 생쥐 모델에서 인간 피부 각질형성에포와 EGF-피브린 고분자 혼합물을 분사하여 피부의 전층 상처를 재생하였다. 조직학 검사와 면역화학검사를 통하여 각질형성세포와 EGF-피브린 고분자를 함께 분사한 경우 이식된 인간 표피세포에 의한 빠른 표피재생을 확인할 수 있었다. 이 피부 재생술은 기존의 배양된 인공피부 sheet의 이식을 이용한 피부재생법에 비해 여러 가지 장점을 가지고 있으므로, 앞으로 화상이나 피부궤양과 같은 피부결손의 효율적인 새로운 치료법으로 사용되어질 수 있을 것이다.
The induction of proliferation of adult rat islets was investigated under various culture conditions. The islets were isolated from male Sprague-Dawley rats and subsequently embedded in collagen gels, which mimic the in vivo three-dimensional surroundings. During the culture period, the effects of heterologous serum (fetal bovine serum, FBS), epidermal growth factor (EGF), and retinoic acid (RA) on islet growth were examined with respect to the morphological and total DNA content changes. To investigate these changes at the cellular level, whole mount immunocytochemistry using specific antibodies for insulin and glucagon was performed. The results showed that (i) collagen gels as an extracellular matrix can maintain islets in a similar way to that in vivo, (ii) heterologous serum (FBS) had stimulatory effects on islet proliferation in a dose-dependent manner, (iii) RA had inhibitory effects on islet proliferation induced by the serum in a dose-dependent manner, (iv) EGF had weak inhibitory effects on islet proliferation induced by the serum except at the concentration of 10 nM where its effect was not significant, and (v) whole mount immunocytochemistry revealed that newly proliferated islet cells were mainly $\beta$-and $\alpha$-cells.
여드름은 면포, 구진, 낭종, 결절, 색소 침착 등 다양한 피부병변으로 나타나는 모낭피지선의 만성 염증질환으로 사춘기부터 성인기까지 발생 연령대가 다양해지고 있다. 한편, 약물 부작용으로 여드름이 발생하기도 하는데, 표피성장인자(epidermal grouwth factor, EGF) 수용체 억제제 항암제를 사용할 경우 75 ~ 100%에서 여드름양 모낭염이 발생된다고 보고되고 있다. 여드름의 치료로 항생제, 레티노이드 경구 복용 및 외용 약제 도포 등 다양한 방법이 이용되고 있다. 그러나 최근 들어 레티노이드 기형 유발 가능성 및 Propionibacterium acne의 항생제 내성률 증가는 기존 치료의 한계로 여겨진다. 따라서 본 연구는 최근 여드름양 발진에 효과가 있다고 알려진 EGF를 함유한 외용제가 여드름 치료에 미치는 효과와 안정성을 평가하였다. 한국 성인 10 ~ 29세 23명을 대상으로 EGF 함유 제품(트러블컨트롤 EGF)과 3종 제품(트러블컨트롤 클래리파잉 클렌징폼, 트러블컨트롤 올-클리어 필링토너, 레드롤 카밍 모이스처)을 하루 두 번 사용하도록 하였다. 사용 후 영상 피지량, 경표피수분손실량, 피부 홍조 측정, 전문가 육안 평가, 사용 후 만족도 설문조사를 평가하였다. 최종 측정 시, 피부 피지량, 경피수분손실량, 피부 홍조가 통계학적으로 감소하였으며, 전문가 육안 평가에서 여드름 병변(면포, 구진)도 통계학적으로 감소하였다. 연구동안 심각한 부작용은 관찰되지 않았다. 표피성장인자 함유 외용제는 경도의 여드름에 안전하면서도 효과적으로 사용할 수 있을 것으로 생각된다.
신장은 독성물질, 빈혈, 재관류-유도 상해, 급성신부전에 회복 기능을 가지고 있다. 뇨 표피성장인자(EGF)는 신장 사구체연접장치에서 생산된다. 신장은 EGF를 축적하거나 배설한다. 신장 질환의 경우에는 EGF 배설이 감소한다. 본 연구에서는 glycerol-유도 급성신부전에서 스쿠알렌의 효과를 연구하였다. In vitro에서 RT-PCR를 통해 EGF 발현을 관찰하였다. 근위세뇨관 세포를 분리한 후, glycerol (1, 2, 4 mM) 혹은 스쿠알렌(0.1, 0.05 or 0.1%)을 첨가하였다. In vivo에서 BUN, creatine, 조직학적 변화를 관찰하였다. 실험군은 다음과 같다. 실험군 1은 정상군, 실험군 2는 glycerol (50%, 8 ml/kg) 처치 후, 스쿠알렌을 처치하지 않은 군, 실험군 3은 glycerol (50%, 8 ml/kg) 처치 후, 스쿠알렌(180 mg/kg)을 함께 처치한 군으로 각 실험군 당 생쥐 7마리를 사용하였다. 실험 결과, glycerol이 신장에 손상을 주어 EGF mRNA 발현이 감소됨을 확인할 수 있었다. 그러나, 스쿠알렌을 처치한 군에서는 EGF mRNA 발현이 증가함을 관찰할 수 있었다. 또한, BUN과 creatine 수치의 빠른 회복이 관찰되었다(P<0.01). 조직학적 관찰에서도 실험군 2는 사립체의 심한 손상이 관찰되었는데, 실험군 3의 경우 사립체의 빠른 회복이 관찰되었다. 결론적으로, 스쿠알렌이 glycerol-유도 급성신부전에 회복 효과가 있을 것으로 사료된다.
Objectives: The purpose of this study was to evaluate effects of heparin-binding epidermal growth factor (HB-EGF) on the rate of blastocyst formation and hatching in the mouse embryos and the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and ATPase ${\gamma}$-subunit mRNA. Methods: Late 2-cell mouse embryos was cultured for 72 hours in RTF medium containing with 1, 10, and 100 ng/ml HB-EGF. The mRNA expression level of MMP-9 and ATPase ${\gamma}$-subunit was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: The rate of hatching was significantly higher (p<0.05) in group containing with 1 ng/ml HB-EGF than other groups. Also, the rate of hatched blastocyst was significantly higher (p<0.05) in 10 ng/ml. The mRNA expression level of MMP-9 mRNA was not shown any difference among groups, but ATPase ${\gamma}$-subunit was higher than other groups. Conclusions: Taken together these results suggest that HB-EGF has the positive effect to promote the blastocyst formation and hatching process and influences the blastocoel expansion by promoting the ATPase mRNA expression in the mouse embryos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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