본 연구는 상아모세포의 분화, 상아질의 형성, 치근 형성에 중요한 역할을 하는 NFI-C가 치아에 미치는 영향과 NFI-C 결손 생쥐에서 NFI-C와 TGF-${\beta}$의 신호전달물질인 Smad4의 발현양상을 알아보았다. 이를 위해 NFI-C 결손 생쥐치아를 광학 현미경과 면역조직적 화학방법을 사용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. NFI-C 결손생쥐는 전치부의 경우 법랑질이 있는 치관 부위는 상아질이 정상적으로 형성되었지만 법랑질이 없는 설면 부위는 개방되어 있었고 뼈모양 상아질이 관찰되었다. 2. NFI-C 결손생쥐는 구치부의 경우 법랑질이 있는 치관 부위는 상아질이 정상적으로 형성되었지만 법랑질이 없는 치근부위의 치근은 짧아졌고 상아모세포의 수가 줄었으며 약간의 뼈모양 상아질이 관찰되었다. 이는 NFI-C결손이 상아모세포 분화에 영향을 끼쳐 비정상적인 치근을 만드는 것을 보여준다. 3. NFI-C 결손생쥐의 Smad4 발현은 정상 생쥐에 비해서 핵에 더 많은 발현을 보였다. 이는 Smad4가 NFI-C와 TGF-${\beta}$의 신호전달물질로서 그 사이에서 균형을 맞추면서 상아모세포 분화에 영향을 미친다는 것을 보여준다.
Image J 프로그램은 digital image 분석 또는 생명 공학적 분석에 사용되고 있다. 다양한 동물실험 중에서도 마우스 두개골 결손모델(Mouse calvarial defected model)은 조직공학자들에게 대표적으로 사용되고 있는 뼈의 결손모델이다. 이러한 마우스 두개골 결손 모델은 뼈의 재생 또는 새로운 지지체(scaffold)의 재생효과 실험에 사용되고 있다. 마우스 두개골에 지름 4mm의 원형 결손을 만들어 각종 실험재료를 처리하여 파괴된 마우스 두개골 뼈의 재생에 관련하여 측정하는 실험이 주를 이룬다. 실험 후에 마우스를 희생하여 대부분 헤마톡실린과 에오신 염색을 통하여 분석을 하게 된다. 다른 한편으로는 마이크로 시티(u-CT)를 사용하여 정량적인 분석을 한다. 하지만 이는 시간이 오래 걸리고 고가의 비용이 드는 단점이 있다. 이번 실험은 마우스 두개골 결손 모델 시에 프리쉐어 프로그램인 Image J를 통하여 간단하게 마우스 두개골 결손 뼈의 재생량을 2D X-ray 상으로 농도를 측정하여 정량적인 분석을 실행하였다. 결론적으로 Image J를 사용한 농도 분석법은 빠르고 정확하게 뼈의 재생량을 상대적으로 비교함으로써 신생 뼈의 관한 재생 실험자에게 도움을 줄 수 있을 것으로 사료된다.
동물실험에서 실크단백질 산 가수분해물을 투여하고 t-BHP투여한 군의 혈액 생화학적 검사 결과 t-BHP만 투여한 군과 비교하였을 때 AST, ALT 그리고 LDH가 실크단백질 산 가수분해물의 투여 농도가 높아질수록 수치가 감소하는 것으로 나타났고 세포가 손상할 시에 증가하는 MDA를 간 조직을 대상으로 측정한 결과 실크단백질 산 가수분해물의 농도가 높아질수록 수치가 대조군과 유사한 정도로 감소하는 것으로 보아 간 손상에 관여하는 효소의 누출 억제효과가 있는 것으로 사료된다. HPLC로 간 조직에서의 GSH 측정결과 t-BHP만 투여한 군과 비교하였을 때 유의적으로 증가하였고 조직학적 검사 결과 t-BHP만 투여한 군과 비교하였을 때 실크단백질 산 가수분해물을 투여한 군이 대조군과 가까운 모습을 보이는 것으로 관찰되어 실크단백질 산 가수분해물이 산화적 스트레스로부터의 간 보호 효과가 있는 것으로 사료된다. 따라서 실크단백질 산 가수분해물의 기능적 소재로서의 이용가능성이 확대될 것으로 사료된다.
Cadmium (Cd) is known to exert gonadotoxic and spermiotoxic effects. The present study was performed to investigate the morphological effects and metallothionein (MT) expression by zinc pretreatment in the course of time of cadmium-induced testicular injury in rat. Fifty male Spraque-Dawley rats weighing 160-180 g were divided into two groups: saline-pretreated cadmium group and zinc-pretreated cadmium group. Rats of two groups received subcutaneous injection of saline and 100 mg/kg $ZnSO_4$ at 0, 2, 5 and 8 hrs intervals respectively. Cadmium chloride (4.5 mg/kg $CdCl_2$) was administrated intraperitoneally at 2 hr after zinc injection and rats were killed 0, 12, 24, 48 and 72 hrs later. Testicular tissue damages, Interstitial (Leydig) cells status and MT expression were determined using hematoxylin-eosin stained sections and a computerized image analysis system on sections immunostained with a mouse anti-metallothionein respectively. Zinc pretreatment was significantly reduced testicular damages in five pathological categories after cadmium administation. The number of surviving interstitial cells was significantly higher in the zinc-pretreated group than in the saline-preatreated group at 48 and 72 hrs after cadmium administration. Non-damaged testis showed the positivity of MT staining in spermatogenic cells, Sertoli cells and endothelium of blood vessel, but not in the Leydig cells. The potitivity of MT staining in saline-pretreated group was significantly reduced at 24 hrs after cadmium administration, whereas zinc-pretreated group showed strong MT positive staining similar to the 0 hr by 42 hrs after cadmium administration. In damaged testis, MT positive staining was also observed in the Leydig cells of both groups. These results suggest a major preventive effect of zinc against cadmium-induced testiculat toxicity may be due to its ability to reduce the cytotoxicity of cadmium in spermatogenic cells and Leydig cells by inhibiting the susceptibility of the testis to cadmium but not MT production by cadmium.
Background: This study examined the hypoglycemic and kidney protective effect of black ginseng in streptozotocin-induced diabetic mice. Methods and Results: Diabetes was induced by treating mice with streptozotocin (STZ) for four weeks. In vivo studies were performed in order to investigate the hypoglycemic effect of the black ginseng prosapogenin (GBG05-FF) extract. The body weight and blood glucose level were measured. Moreover, after the mice were sacrificed, the kidneys were isolated and histological changes were observed with hematoxylin and eosin staining. Blood urea nitrogen and creatinine levels were also measured. The results showed that administration of black ginseng increased body weight. Compared to blood glucose levels in STZ mice, blood glucose levels were reduced by 48% in STZ mice supplemented with 300 mg/kg of black ginseng, and by 69% in STZ mice supplemented with 900 mg/kg. Furthermore, histopathological examination of STZ mouse kidneys revealed, changes in the kidneys, epithelial cell damages, inflammatory cell infiltration and glomerulus hypertrophy. However, a significant reduction of glomerular water droplets (indicative of glomerulus hypertrophy) was observed in the kidneys of STZ mice supplemented with black ginseng extract. Conclusions: These results suggest that black prosapogenin (GBG05-FF) ginseng extract has a significant hypoglycemic effect and can be used as an anti-diabetic substance and renal protective agents as part of dietary supplements or novel drugs.
To verify the effects of JAUN-1, which is a water-extracted herbal mixture, on gastroenteric disorders induced by 0.1 percent of iodoacetamide (IA) in rats. We divided four groups, $Na{\"{\i}}ve$ + Distilled Water (DW), 0.1% IA + DW, 0.1% IA + Proton pump inhibitor (Lansoprazole, 5 mg/kg) and 0.1% IA + Herbal mixture (JAUN-1, 50mg/kg) and performed following experimental methods to confirm its advantageous effects against ulcerogenic stomach in rats induced by 0.1% IA; cell cytotoxicity, analysis of lesions score, Hematoxylin & Eosin (H&E) stain, RT-PCR for ${\beta}-actin$, COX-1 and COX-2 and evaluation of intestinal prokinetic activity. No cytotoxicity was elucidated at the concentration of 1, 5, 10, 50, 100, $500\;{\mu}g/ml$ and 1mg/ml JAUN-1 through MTT Assay using by human stomach epithelial AGS cells, respectively. In addition, the JAUN-1 treated group and the lansoprazole treated group significantly decreased in lesions score compared to the DW treated group in the gastritis induced rat model, and results of immunohistochemistry by H&E staining showed that histological recovery in Proton Pump Inhibitor (PPI) and JAUN-1 treated groups rather than the DW administrated group. Another outcome was that ${\beta}-actin$ relative COX-2 expression level was significantly promoted in the DW treated group while ${\beta}-actin$ relative COX-1 expression level was no meaningful change in this rat model. Finally, intestinal prokinetic activity was recovered from low level of prokinetic activity due to 0.1% IA induced gastritis to the similar level of Normal group. These results suggested that JAUN-1 may have beneficial effects against 0.1% IA-induced gastritis rat model through decreasing lesions score, histological recovery, ${\beta}-actin$ relative COX-1, 2 expression level and prokinetic activity.
Objectives : Sopung-tang(Shufeng-tang) is a famous herbal prescription that treated ischemic brain injury. This study was designed to evaluate the effects of Sopung-tang(Shufeng-tang) on congnition and motor function recovery after ischemic brain injury in rats. Methods : Male rats were divided into 4 groups. Those rats caused ischemic brain injury by occlusion of MCA as Longa method. Control group I was per os normal saline for 7 days after ischemic brain injury. Control group II was per os normal saline for 14 days after ischemic brain injury. Experimental group I(Ex I) was taken with Sopung-tang(Shufeng-tang) for 7 days after ischemic brain injury. Experimental group II(Ex II) was taken with Sopung-tang(Shufeng-tang) for 14 days after ischemic brain injury. The author carried out neurological, cognitive motor behavior tests and histological assessment. Neurological motor behavior tests consist of limb placement test, beam-walking test and horizontal wire test. Morris water maze test was used for cognitive motor behavior test. In the histological assessment test, TTC(2,3,5-triphenylteterazolium chloride) staining, Hematoxylin & Eosin staining and immunohistochemical staining were experimented. Results : 1. In neurological motor behavior tests, motor function recovery was significantly increased in the experimental groups as compared with control groups(p<0.05). Especially Ex II was significantly increased as compared with Ex I(p<0.05). 2. In Morris water maze test, congnitive motor function recovery was significantly increased in the experimental groups as compared with control group(p<0.05). Especially Ex II was significantly increased as compared with Ex I(p<0.05). 3. In the immunohistochemical staining for the expression of BDNF in hippocampus, more immune reaction was investigated in the experimental groups as compared with control groups. Especially most immune reaction was experimented in the EX II. Conclusions : According to the above results, Sopung-tang(Shufeng-tang) can treat on the congnition and motor function recovery after ischemic brain injury in rats. And it is effective method in expression of BDNF in hippocampus.
The purpose of this study is to examine the viability of PDL cells in rat molars by using MTT assay and to verify the MTT assay through the histologic observation. Thirty of Sprague-Dawley white female rats of 4-weeks old with a body weight of about 100 grams were used. Groupings are as follows : Immediate Group : Positive control group(n=10)-after extraction immediately. Dried Group : Negative control group(n=10)-after drying for an hour under warm dry. $ViaSpan^{\circledR}$ Group : 1hour $ViaSpan^{\circledR}$ group(n=10)-after storing in $ViaSpan^{\circledR}{\;}at{\;}4^{\circ}C$ for 1hour. Ten teeth of each group were treated as same as above and replanted to the original socket of experimental animals. After two weeks of replantation. all the experimental animals were sacrificed. And after fixation, extracted maxillary jaw was dimineralized. After it was embedded in paraffin. serial section by $5\mu\textrm{m}$ was carried out and for construction of specimen, hematoxylin-eosin dye was used. The mean MTT measurement of immediate group(positive control) is 2.81 and the mean measurement of dried group(negative control) is 0.98 which is significantt differnt(P<0.05), The mean measurement of $ViaSpan^{\circledR}$ group is 2.65 and there is significant difference between dried group and $ViaSpan^{\circledR}$ group(P<0.05), However, there is no difference between immediate group and $ViaSpan^{\circledR}$ group. The average resorption points of immediate group is 3.03 points. In the dried group, average 6.44 points resorption and 2.68 points showed resorption in the $ViaSpan^{\circledR}$ group. Unlike with MTT assay, there was no significant difference between the immediate group and $ViaSpan^{\circledR}$ group. The usage of MTT assay as a viable cell marker may give us a better indication of the maintenance of periodontal ligament cell vitality.
The morphology and histology of the gastrointestinal mucosa of the mole, Talpa micrura coreana (Thomas), were studied using light and scanning electron microscopes. Tissue specimens were taken from body and pyloric portions of the stomach, and from the initial, proximal, middle, distal and terminal portions of the intestine. For light microscopy, tissue blocks were fixed in 10% buffered neutral formalin, embedded in paraffin wax, and sectioned at a thickness of $5{\mu}m$. These sections were stained with hematoxylin-eosin. For scanning electron microscopy, tissue blocks were fixed in 1% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde, and postfixed in 1% osmium tetroxide, dehydrated in graded alcohol, transferred to isoamylacetate and dried by the critical point drier(Polaron E 3000). Subsequently, specimens were coated with gold and observed with a JSM-35C scanning electron microscope. The results were as follows: The mucous membrane of the body portion of the stomach had numerous irregular folds and the pyloric mucosa formed the strawberry-shaped folds, and general histological structures of each portion were similar to those of man. The intestine could not be differentiated macroscopically and microscopically into small and large intestines. There was no cecum, appendix, taenia coli, haustra coli or appendices epiploicae. In the initial portion (4 mm long), conical or tongue-shaped villi with the height of $143.3{\pm}10.7{\mu}m$ were present, and large mucous glands were seen in the submucosa. In the proximal, middle and distal portions, wavy folds composed of the epithelium and lamina propria were densely and transversely arranged, and their heights were $440.4{\pm}45.5{\mu}m,\;454.4{\pm}19.9{\mu}m\;and\;205.2{\pm}33.5{\mu}m$, respectively. The mucosa of the terminal portion (3 cm long) formed several longitudinal folds, and the intestinal glands were directly opened on the smooth surface of the folds. Aggregated lymphoid follicles were observed in the major portions of the intestine except the initial and terminal portions. There was no circular or semilunar fold throughout the intestine.
Sono-guided fine needle aspiration (FNA) of the thyroid is widely used, but the aspirated samples are typically not well preserved and low cellularity makes diagnosis difficult in many cases. The object of the current study is to evaluate the adequacy and diagnostic accuracy of the use of $SurePath^{TM}$ liquid-based cytology (SP-LBC) in the sonoguided fine needle aspiration of the thyroid nodule and to compare its use with that of the use of a conventional smear (CS). A total of 172 sono-guided FNAs of thyroid nodules from April to June, 2006 were prepared by the use of the split method with either SP-LBC or CS; the samples were stained with the use of hematoxylin-eosin (H&E) and Papanicolaou (Pap) stains. A cyto-histological correlation was performed in 69 (30 SP and 39 CS) cases that had been histologically confirmed. The rate of producing unsatisfactory slides by the use of the SP-LBC method (9.3%) was less than that of the use of the CS method (20.9%). The diagnostic accuracy of the SP method (93.3%) was better than that of the CS method (85.3%). The sensitivity and specificity of the SP method (94.4% and 92.3%) was better than that of the CS method (83.3% and 70%), respectively (p < 0.05). The CS of sono-guided aspirated specimens had some unavoidable limitations related to inadequate sampling such as a bloody background, low cellularity and an indication that some clinicians smeared many useless slides (averaging four to ten slides), and that most slides showed only blood that included few follicular cells. The SP method resulted in more thinly smeared slides and showed cleaner background and greater cellularity than the use of the CS method. Each follicular cell shows superior nuclear detail, and more distinct cytoplasmic features than with the use of the CS method. SP-LBC appears to be an easy, highly accurate, and reliable cytological method for employ for a diagnostic approach of thyroid disease and thyroid nodules. The SP-LBC method is a suitable alternative to the CS method to overcome diagnostic difficulties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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