Enzymatic conversion of brain glycosylphosphatidylinositol-linked alkaline phosphatase (GPI-AP), amphiphilic, was examined. When GPI-AP was incubated with glycosylphosphatidylinositol-specific phospholipase D (GPI-PLD), a negligible conversion of GPI-AP to hydrophilic form was observed. The inclusion of monoacylglycerols enhanced the enzymatic conversion, although the action of monoacylglycerols differed greatly according to the size of acyl group; the enzymatic conversion was enhanced considerably in the presence of monoacylglycerols possessing acyl group of longer chain length ($C_{10-}C_{18}$), which monoacylglycerols with acyl moiety of shorter length ($C_{4-}C_{8}$) did fail to augment the enzymatic conversion. Noteworthy, monooleoylglycerol was much more effective than the other monoacylglycerols in promoting the enzymatic conversion, indicating a beneficial role of the unsaturation in acyl chain. Meanwhile, ionic amphiphiles such as monohexadecyllysophosphatidylcholoine and palmitoyl-carnitine decreased the enzymatic conversion of GPI-AP in a concentration-dependent manner, with monohexadecyllysophosphatidylcholine and palmitoyl-carnitine deceased the enzymatic conversion of GPI-AP in a concentration-dependent manner, with monohexadecyllysophosphatidylcholoine being more inhibitory than palmitoylcarnitine. Separately when GPI-AP was exposed to various oxidants prior to the incubation with GPI-PLD, a remarkable decrease of the enzymatic conversion was observed with hypochlorite and peroynitrite generators, but not $H_{2}O_{2}$. In further study, hypochlorite was found to inactivate GPI-PLD at low concentrations ($3~100{\mu}M$). From these results, it is suggested that the enzymatic conversion of GPI-AP by GPI-PLD may be regulated in vivo system.
The effects on the enzymatic hydrolysis of waste paper treated with physical or chemical treatment were investigated. To gain the higher saccharification rate, physical or chemical treatment are necessary in enzymatic conversion process of waste paper. The major deterrents to the effective utilization of waste paper for enzymatic conversion process are phenolic compounds, cellulose crystallinity and coating materials. In the enzymatic hydrolysis of waste paper, the deterrents through enzymatic conversion process can be eliminated by the physical or chemical treatment. This study was performed to obtain the optimal condition for enzymatic conversion process of non-treated waste paper and to review effects on enzymatic conversion process of waste paper treated with physical or chemical methods. In the aspect of saccharification rate, waste paper treated with 1.5% sodium hypochlorite was the most effective and in physical treatment methods, multi-stage treatment(autohydrolysis+refining treatment) was more effective than the other physical treatment.
It has been known that, in enzymatic synthesis of cephalexin, the conversion yield was reduced by high loading of ampicillin acylase. In order to elucidate this phenomena, pH-controlled synthesis of cephalexin was examined using a purified Acetobacter turbidans acylase. When the pH of the reaction mixture was maintained at $6.20{\pm}0.04$, the reduction of the maximal conversion rate was not observed even with high enzyme loading. The kinetic parameters also suggest that pH drop during the enzymatic synthesis of cephalexin was mainly attributed to the rapid hydrolysis of D-${\alpha}$-phenylglycine methyl ester to D-${\alpha}$-phenylglycine, rather than the disappearance of 7-amino-3-deacetoxycephalosporanic acid for cephalexin synthesis. At higher molar ratio of two substrates, [D-${\alpha}$-phenylglycine methyl ester]/[7-amino-3-deacetoxycephalosporanic acid], the conversion rate was also elevated under pH-controlled enzymatic synthesis, which implies that the main reason for the pH drop is due to the production of D-${\alpha}$-phenylglycine methyl easter, the effect of a water-methanol cosolvent system on the ester, the effect of a water-methanol cosolvent system on the conversion profile was also examined. Even the though the conversion rate was increased in 10% methanol solution, a higher than 16% methanol in the reaction mixture caused an inactivation of enzyme.
The mushroom cultured waste(MCW) from cork oak was evaluated as the raw material for bioethanol production. For enzymatic hydrolysis, cellulase cocktails (Celluclast 1.5L and Novozym 188) was used for polysaccharides to monosaccharides conversion. Compared with sound cork oak woodmeal, woodmeal from MCW showed higher cellulose to glucose conversion. To improve polysaccharides to monosaccharides conversion, pretreatment by sodium hydroxide was applied. Even though more xylan and lignin were removed in woodmeal of MCW than that of cork oak, concentration of glucose was higher from sodium hydroxide treated cork oak woodmeal (51.3 g/L) than treated MCW woodmeal (41.6 g/L).
Glyco-acrylate and methacrylate were synthesized by lipase-catalyzed glycosylation of acrylic acid, methacrylic acid and their vinyl esters with $\beta$-methyl fructoside and glycerol in t-butanol as a reaction medium. At the optimum conditions for enzymatic glycosylation of acrylic acid and vinyl methacrylate, we attained up to 80% conversion for glyco-acrylate from acrylic acid and 90% conversion for glyco-methacrylate from vinyl methacrylate. The polymerizable glyco-acrylates and methacrylate have biomedical application as hydrophilic monomers and hydration modifiers to be use for hydrogel contact lens formulation.
Enzymatic hydrolysis of waste office paper was evaluated using three commercial cellulases, Acremonium cellulase, Meicelase, and Cellulosin T2. Varying the enzyme loading from 1 to 10% (w/w) conversion of waste office paper to reducing sugar was investigated. The conversion increased with the increase in the enzyme loading: in the case of enzyme loading of 10% (w/w), Acremonium cellulase yielded 79%conversion of waste office paper, which was 17% higher compared to Meicelase, 13% higher than that of Cellulosin T2. Empirical model for the conversion (%) of waste office paper to re-ducing sugar (x) was derived from experimental results as follow, x = $kE^{m}t^{(aE+b)}$ where k, m, a, and b de-note empirical constants. E indicates initial enzyme concentration.
On-line conversion estimation of enzymatic esterification reactions in solvent-free media was investigated. In principle, conversion to ester can be determined from the amount of water produced by the reaction, because water is formed as a by-product in a stoichiometric manner. In this study, we estimated the water production rate only from some measurements of relative humidity and water balances without using any analytical methods. In order to test the performance of the on-line conversion estimation, the lipase-catalyzed esterification of n-capric acid and n-decal alcohol in solvent-free media was performed whilst controlling water activity at various values. The reaction conversions estimated on-line were similar to those determined by offline gas chromatographic analysis. However, when the water activity was controlled at higher values, discrepancies between the estimated conversion values and the measured values became significant. The deviation was found to be due to the inaccurate measurement of the water content in the reaction medium during the initial stages of the reaction. Using a digital filter, we were able to improve the accuracy of the on-line conversion estimation method considerably. Despite the simplicity of this method, the on-line estimated conversions were in good agreement with the off-line measured values.
Laccase catalyzes the oxidation and polymerization of aromatic compounds in the presence of molecular oxygen. Studies were conducted to characterize the use of polyethylene glycol (PEG) as an additive to keep up the enzymatic stability. The enzymatic activities highly remained and bisphenol A (BPA) was rapidly converted in the presence of 5 mg/l of PEC. These effects were accomplished with PEG of molecular weight 3,350. A linear relationship was found between the quantity of BPA to be converted $(10-120\;{\mu}M)$ and the optimum dose of PEC required for greater than $95\%$ conversion. This result suggests that it is the interaction between the PEG and the reaction products. In the optimum dose of PEG, the aeration of reaction mixture neither enhanced the conversion of BPA nor retarded the inactivation of the enzyme.
차세대 바이오에탄올로 주목받고 있는 목질계 바이오매스를 이용한 셀룰로오스 에탄올 생산과정은 셀룰로오스를 단당류로 분해하는 전처리과정이 가장 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 산가수분해와 효소당화과정을 이용하여 볏짚, 톱밥, 복사지, 신문지 등과 같은 목질계 바이오매스로부터 셀룰로오스에탄올을 제조하였다. 전처리과정으로 10~30 wt% 황산을 이용한 산가수분해($100^{\circ}C$, 1 h), celluclast ($55^{\circ}C$, pH = 5.0), AMG ($60^{\circ}C$, pH = 4.5), spirizyme ($60^{\circ}C$, pH = 4.2)을 이용한 효소당화과정(30 min), 산가수분해 후 효소당화과정을 비교하였다. 전처리과정의 수율은 hybrid 과정 > 산가수분해 > 효소당화 순으로 셀룰로오스 에탄올로의 전환이 잘 이루어지는 것으로 나타났으며, 최적 발효시간은 2일이었다. 또한 20 wt% 황산을 이용한 산가수분해 후 celluclast를 이용하여 효소당화를 수행할 경우 톱밥 > 볏짚 > 복사지 > 신문지 순으로 셀룰로오스 에탄올 전환특성이 높게 나타났다.
Dissolving part of xylan and lignin in lignocellulosic biomass by base can be used as pretreatment technique. Cork oak was pretreated with sodium hydroxide solution and the pretreatment effects were evaluated with two critical factors - NaOH concentration and pretreatment temperature. Some of xylan and lignin were removed by base pretreatment. At $90^{\circ}C$ and 13% NaOH pretreatment, 22.0% of lignin and 78.8% of xylan removed by base treatment. Enzymatic hydrolysis of cork oak which was pretreated at higher temperature or concentration was further improved. After pretreatment of cork oak with 13% NaOH at $90^{\circ}C$, the conversion rate of cellulose to fermentable sugars were reached up to 91.3%. At ethanol fermentation with enzymatic hydrolysate from different pretreatment conditions, all enzymatic saccharification liquids were well fermented by Saccharomyces cerevisiae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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