Recently, we have reported that the environmental pollutant 2-bromopropane (2-BP) induces a significant embryo-fetal developmental toxicity in rats. However, the cause of developmental toxicity and the relationship between maternal and developmental toxicities could not be elucidated because the developmental toxicity of 2-BP was observed only in the presence of maternal toxicity The in vitro teratogenicity study using whole embryo culture was carried out to understand the teratogenic properties and the possible mechanism of teratogenicity induced by 2-BP in rats. Rat embryos aged 9.5 days were cultured in vitro for 48 hrs at medium concentrations of 0, 1, 3, or 10 mg/ml of 2-BP. Embryos were evaluated for growth, differentiation, and morphological alterations at the end of the culture period. At 10 mg/ml, 2-BP caused a delay in the growth and differentiation of embryos and an increase in the incidence of morphological alterations, including altered yolk sac circulation, abnormal axial rotation, craniofacial hypoplasia, open neuropore, absent optic vesicle and kinked somites. At 3 mg/ml, only a delay in the growth and differentiation of embryos was observed. There were no adverse effects on embryonic growth and development at the concentration of 1 mg/ml. The results showed that the exposure of 2-BP to rat embryos results in a developmental delay and morphological alterations at dose levels of 3 mg/ml culture media or higher and that 2-BP can induce a direct developmental toxicity in rat embryos.
This study was carried out to develop an effective seed propagation method for Thalictrum rochebrunianum var. grandisepalum (H. Lev.) Nakai by analyzing seed dormancy types and germination characteristics. Seeds were collected between September to October at Gangwon province, and well-selected seeds were used while being dry-stored at 4±1℃. The seed size ranged 4.52 × 1.58 ㎜ and the weight of thousand seeds were 1,603.5 ± 0.02 ㎎. The moisture content was 7.2%. Seeds were achene type, and morphology characters showed an elliptical shape and rough texture, and light brown in color. Moist-chilling treatment was conducted for dormancy breaking because the seeds had an undeveloped embryo of liner type. The embryo had developed during a moist-chilling period, constantly, and fully developed in 10 weeks. Consequently, it seemed to be non-deep complex or intermediate complex type of morphophysiological dormancy, and embryo dormancy was broken by wet-chilling for 10 weeks. After 10 weeks of wet-chilling treatment, seed germination began. Germination percentage was higher in dark condition raher than light condition and recorded the maximum at 25℃ in the dark (16.3%). A pre-soaking treatment with a combined plant growth hormones promoted germination and shortened T50. Specifically, seed germination of 84.5% was achieved by pre-soaking of seeds with a combined solution of 500 ㎎/L GA3 and 10 ㎎/L kinetin for 24 h after a wet-chilling treatment for 10 weeks. Thus the effect of plant growth hormones coupled with chilling temperature on seed breaking dormancy provide asubsequent growth of seedlings for successful plantation.
Epidermal growth factor (EGF) and insulin-like growth factor-I (IGF-I) have been shown to stimulate proliferation and differentiation of various somatic cells, including placental trophoblasts and also to enhance fetal growth and development when maternally administered. Since an increase of the expression of placental EGF and IGF-I receptors in rat, mouse, and human with the gestation advanced, both EGF and IGF-I were considered to play pivotal roles on fetal growth by regulating some function of placental cells. Amino acids are crucial importance for both maternal and fetal requirements of energy source and essential constituent of fetal mass during pregnancy. Impaired fetal and placental uptake of amino acids has been observed in several models of growth retardation in the rat. Amino acid is concentrated in the fetal side through active transport by amino acid transporters and is one of the important metabolic fuels for the fatal growth. Therefore, at first plasma amino acid concentrations in mothers and fetuses were measured as an index of uphill transport across the placenta associated with EGF and IGF-1. The EGF administration at the concentration of 0, 0.1, or 0.2 $\mu\textrm{g}$/g to pregnant rats from day 18 to 21 of gestation apparently increased fetal/maternal ratio of serum proline concentration and also fatal growth in EGF dose-dependent manner. When IGF-I in doses of 0, 1, 2, and 4 $\mu\textrm{g}$/g were administrated, the ratio of leucine, isoleucine, tryptophan, phenylalanine, tyrosine and also fetal growth significantly increased with a dose-dependent manner. These results suggested that EGF and IGF-I enhanced fatal growth by, as one of its possible mechanisms, promoting placental activity to transfer some amino acid supplies from the mother to the fetus in late pregnancy.
Kim, B. K.;H. J. Chung;Park, J. H.;J. H. Woo;Park, M. Y.;H. H. Seong;W. K. Chang
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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pp.69-69
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2003
Although effect of TGF$\beta$$_1$ on preimplantation embryo development was reported at mice, little information relevant to this subject is known in bovine. The objectives of this study were to investigate TGF$\beta$$_1$, and TGF$\beta$$_1$ receptors type I and II expression, known as important factors in the embryo development, at unfertilized oocytes and fertilized embryos that will be used as basic data to be compared to NT embryos. We postulated that TGF$\beta$$_1$ may have a beneficial effect on the preimplantation embryo and show different expression patterns as embryo stages change. We have used immunocytochemistry to investigate the presence in unfertilized oocytes and preimplantation embryos of TGF$\beta$$_1$ and the essential components of the TGF$\beta$$_1$ signalling pathway, TGF$\beta$$_1$ receptors type I and II. We found that both receptors, as well as TGF$\beta$$_1$, were present in the unfertilized oocytes. This indicates that TGF$\beta$$_1$, is a maternally expressed protein. At the morulae and blastocyst stages the TGF$\beta$$_1$ receptor type II was not present, but the TGF$\beta$$_1$ receptor type I was present at both stages and we can confirm the TGF$\beta$$_1$ expression of high level at 8-cell stage. These findings support our hypothesis that the TGF$\beta$$_1$, and TGF$\beta$$_1$ receptors may interact with the oocyte and preimplantation embryo, and that TGF$\beta$$_1$ signalling may be important for the development of the oocyte and the preimplahtation embryo.
Three-dimensional (3D) culture system is useful technique for study of in vivo environment and it was used various experiments. This study was investigated to establish of embryo co-culture system and changes of PAs activity in 3D cultured endometrial cells of pigs. In results, growth of stromal cells into gel matrix were detected only with endometrial and myometrial cells. The most rapid growth of stromal cells were confirmed in $2.5{\times}10^5cells/ml$ and gel matrix containing 15% FBS. Expression of urokinase-PA (uPA) after treatment of hCG (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0 IU/ml) were higher than without hCG, but, there are not significant difference among the treatment. On the other hand, expression of uPA after treatment of $IL-1{\beta}$ (0.1, 1, 10 and 100 ng/ml) were higher than without $IL-1{\beta}$, but, there are not significant difference. Expression of uPA after treatment of estrogen (0.2, 2, 20 and 200 ng/ml) were not difference, but PA activity was significantly decreased (p<0.05). Blastocyst was producing in PZM-3 medium containing FBS and endometrial cells were grown in PZM-3 medium. When embryos development with cultured endometrial cells, cleavage rates were not significant difference and blastocyst were not produced in co-culture with stromal cells and 3D culture system. 3D culture system had similar activity to in vivo tissue and these features are very useful for study of in vivo physiology. Nevertheless 3D culture system was not proper in embryo co-culture system. Therefore, we suggest that 3D culture system with embryo co-culture need continuous research.
This study was conducted to know the effect of vinyl mulching from the sowing to germination on the seedbed for germination and production of seedling. Embryo growth was restrained with decreasing the water content in seed and stopped below 10% water content. Germination was possible over 55% water content but radicle growth was stopped at 55% water content. Ratioes of embryo / emdosperm length were about 50% at seeding time, and about 80% at just before freeing season, and the ratio was increased from the thawing season again. Vinyl mulching increased the soil water content and soil temperature. Germination rate and number of available seedling in vinyl mulching were increased 10% and 12%, respectively.
외래 유전자를 이식하여 형질전환동물을 생산하는 방법은 현재 약 3가지 정도가 실제 이용되고 있다. 현재 가장 많이 사용되고 있는 방법으로는 DNA 미세주입법인데 생쥐와 비교하여 다른 동물에서의 형질전환효율은 상당히 낮은 것으로 나타나 형질전환가축의 생산을 위해서는 많은 비용과 시설 및 노동이 필요하여 실용성에 문제를 갖고 있다. 각 가축에 적합한 DNA 미세주입 조건을 확립시키고 형질전환동물의 생산효율을 높이는 연구가 필요하다. 가축에서 형질전환기술이 실제로 응용되고 있는 분야로는 대량생산이 어려운 의약품을 형질전환가축의 젖으로 합성 분비시키게 함으로써 생리적으로 활성이 있는 의약품의 대량생산이 가능할 것으로 예상된다. Growth Hormone이나 Growth Factor들을 이용한 성장과 관련된 형질전환가축의 기술은 예상했던 것보다 큰 성과는 없었는데 이식 유전자의 과잉발현으로 인한 부작용으로 실용화될 수 없었다. 그러므로 형질전환동물의 실용화를 위해서는 효율적인 유전자 이식방법의 개발과 이식 유전자의 발현으로 인한 부작용을 최소화하면서 좋은 표현형을 얻을 수 있도록 이식유전자의 발현을 인위적으로 조절할 수 있는 regulatory system의 개발과 가축의 경제형질에 관여하는 유전자의 식별이 필요하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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