Recent studies have implicated that more rostral components of the trigeminal spinal nucleus including subnucleus oralis (Vo) in orofacial nociceptive mechanisms. Since there is only limited electrophysiological evidence, the present study was initiated to characterize the receptive field and response properties of malls nociceptive neurons in chloralose/urethan-anesthetized rats. Single neuronal activity was recorded in right subnucleus oralis, and types of nociceptive neurons classified wide dynamic range (WDR), NS (nociceptive specific) and deep nociceptive (D) and the mechanoreceptive field (RF) and response properties were determined. A total of 34 nociceptive neurons could be subdivided into 17WDR neurons, 12NS neurons and 5D neurons. Vo nociceptive neurons had RF involving maxillary and/or mandibular divisions mainly located in the intraoral and/or perioral regions. Majority of Vo nociceptive neurons showed spontaneous activity less than 1Hz. The NS and D neurons activated only by heavy pressure and/or pinch stimuli had high mechanical thresholds compared to WDR neurons activated also by tactile stimuli. Vo nociceptive neurons showed a progressive increase of response to the graded mechanical stimuli. 39% of Vo nociceptive neurons received C-fiber electrical input as well as A-fiber electrical input from their RF, and 45% of them responded to electrical stimulation of the right maxillary first molar. 41% of Vo nociceptive neurons responded to noxious heat applied to their RF, and 18% of them showed an immediate burst of discharges following MO application to the right maxillary first molar pulp. These results indicate that Vo is involved in the transmission of nociceptive information mainly coming from intraoral or perioral region including tooth pulp.
Large-conductance $Ca^{2+}$-actived $K^{+}$ channels ($BK_{Ca}$ channels) play a key role in setting the pace of contractile activity in muscle and are involved in the regulation of neurotransmitter release in neuron. $BK_{Ca}$ channels are activated by depolarizing membrane potential and the elevated level of intracellular calcium. Using yeast-two hybrid assay, we have identified a novel protein interacting with the cytosolic carboxyl terminus of rSlo, the brain isoform of rat large-conductance $Ca^{2+}$-activated $K^{+}$ channel $\alpha$-subunit. The novel gene encodes 51 kDa protein and is named as SIRK(rSlo-interacting RGS-like protein). SIRK is expressed in various tissues and localized in the cytosolic and the membrane fraction. Biochemical and immunological studies indicated that SIRK physically interacted with the cytosolic region of rSlo. To investigate whether SIRK can modulate the activity of rSlo, GFP-fused SIRK and rSlo were transiently transfected into COS-7 cells and the effects of SIRK was studied using electrophysiological means. We concluded that the overexpression of SIRK alters the surface expression of rSlo channel with only a limited effect on the biophysical characteristics of the channel.the channel.
The present study was performed to investigate modification in the electrophysiological characteristics of cat dorsal horn cells during neurogenic inflammation induced by mustard oil. The results obtained were summarized as follows: 1) Following subcutaneous injection of mustard oil the majority of wide dynamic range (WDR) cells (10/15 units) showed enhanced responses (80%) to brush, while the responses to all types of mechanical stiumli were enhanced in 3/15 units. One cell was further activated by pinch and the another was not affected at all after induction of inflammation. 2) The sensitization of WDR cell was resulted from subcutaneous injection of mustard oil either inside or outside of the receptive field (RF), whereas the spontaneous activity increased only after mustard oil was injected inside of the RF. 3) In the animal with inflammation the responses of high threshold (HT) cell to noxious stimulus were not altered, while HT cell responded to such mechanical stimulus as pressure which was usually ineffective in normal animals. 4) After induction of inflammation, low threshold (LT) cell appeared to be converted to WDR cell, showing responses not only to brush but also to pressure and pinch. 5) The mustard oil-induced inflammation enhanced responses of WDR and HT cells to the thermal stimuli and also resulted in a pronounced after-discharge in WDR cells. 6) After subcutaneous injection of lidocaine, the increased background activity of WDR cells due to inflammation was almost completely abolished. 7) A subcutaneous injection of mustard oil inside of the RF invariably desensitized the dorsal horn cells which receive sensory inputs from the inflamed RF. From the results of Present study it was revealed that a neurogenic inflammation induced by mustard oil resulted in an enhancement of responses of cat dorsal horn cells to mechanical and thermal stimuli.
Cardiotoxicity assessment of all drugs has been performed according to the ICH guidelines since 2005. Non-clinical evaluation S7B has focused on the hERG assay, which has a low specificity problem. The comprehensive in vitro proarrhythmia assay (CiPA) project was initiated to correct this problem, which presented a model for classifying the Torsade de pointes (TdP)-induced risk of drugs as biomarkers calculated through an in silico ventricular model. In this study, we propose a TdP-induced risk group classifier of artificial neural network (ANN)-based. The model was trained with 12 drugs and tested with 16 drugs. The ANN model was performed according to nine features, seven features, five features as an individual ANN model input, and the model with the highest performance was selected and compared with the classification performance of the qNet input logistic regression model. When the five features model was used, the results were AUC 0.93 in the high-risk group, AUC 0.73 in the intermediate-risk group, and 0.92 in the low-risk group. The model's performance using qNet was lower than the ANN model in the high-risk group by 17.6% and in the low-risk group by 29.5%. This study was able to express performance in the three risk groups, and it is a model that solved the problem of low specificity, which is the problem of hERG assay.
The present study was undertaken to investigate modification in electrophysiological characteristics of cat dorsal horn cells resulting from carrageenin-induced inflammation. The followings were studied; 1) the time-course of changes in responses of the WDR (wide dynamic range) cell 1-3h after subcutaneous injection of carrageenin in its receptive field; 2) the responses of the same dorsal hern cells before and after induction of inflammation; 3) the effect of inflammation on the responsiveness of dorsal horn neurons to algogens (bradykinin & potassium); and 4) the effect of inflammation on the activity of WDR cell following administration of indomethacin and clonidine. Though responses of WDR neuron were increased dramatically during first 1h, the maximal enhancement was observed 3h after induction of inflammation especially by repetitive light tactile stimulus. Following carrageenin injection the majority of WDR neurons (10/15 units) showed enhanced responses to all the mechanical stimuli while in 3 cases responsiveness were intensified during activation by one tactile stimulus (brush or pressure). One cell was unaffected by inflammation and in another case the response was enhanced only to noxious stimulus. Five of 9 cells that could initially be driven by noxious stimulus were activated more strongly by same stimulus and even by tactile stimulus (pressure) following inflammation. In 2 cases neurons were sensitized only to noxious stimulus whereas in another 2 cells that did not show enhanced responses to noxious stimulus responses to light tactile stimulus (pressure) appeared after inflammation. Of 16 LT cells tested 6 responded to squeeze while 4 showed the characteristics of WDR cell following inflammation. No modification in responsiveness was recognized in 3 cells whereas response to only brush was enhanced in another 3 neurons. Following carrageenin injection responses of LT cell to bradykinin or $K^{+}$ were not altered whereas those of WOR neurons to bradykinin or $K^{+}$ were suppressed in 22.2% and 33.3% of cases, respectively. In two of 8 activity of HT cells were inhibited by bradykinin while in five of 8 responsiveness to $K^{+}$ were rather enhanced by inflammation. In the rest inflammation was ineffective. In inflammation-induced animal the receptive field of LT cell was not changed whereas those of WDR cell and HT cell were tremendously expanded. The enhanced responses of WDR neurons to mechanical stimuli resulted from inflammation were suppressed by intravenously injected indomethacin and clonidine suggesting that postaglandin is involved in inflammation-induced sensitization of these cells. The involvement of peripheral and central mechanisms in the modification in responsiveness of dorsal horn cells in the carrageenin-induced inflammation was discussed.
청각기관의 음조체계로 인해 사람들은 일반적으로 주파수 분포에 따라 소리를 듣는다. 그러나 어음인지 측면에서 어음의 음향적 특성이 사람의 뇌에서 어떻게 인식되는지는 여전히 명확하지 않다. 따라서 본 연구에서는 유사한 고주파수 음향적 특성을 갖는 두 개의 어음이 청각 뇌간에서 전기생리학적으로 어떻게 발현되는 지 확인하고자 하였다. 정상 청력을 지닌 20대 성인 33명이 실험에 참여하였다. 자극음으로 두 개의 한국어 단음절 /자/와 /차/, 4개의 주파수로 구성된 톤버스트음(500, 1000, 2000, 4000 Hz)을 사용하여 청성뇌간반응을 얻었다. 연구 결과, 단음절과 톤버스트음 모두 높은 재현성을 보였고, 파형 V는 모든 피검자에게서 잘 발현되었다. 피어슨 상관관계 분석 결과, 3671 ~ 5384 Hz 대역에서 에너지 분포를 갖는 /자/ 음절은 4000 Hz의 톤버스트음과 높은 상관관계를 나타냈다. 그러나 /차/ 음절은 1000 Hz와 2000 Hz의 톤버스트음과 높은 상관성을 보여, 3362~5412 Hz의 음향적 특성과 청각 뇌간에서 생리학적 반응은 일치하지 않았다. 이러한 결과를 바탕으로 사람의 어음인지과정을 면밀히 조사하기 위해 음향-청지각적 매핑후속 연구가 필요하겠다.
흰쥐의 안면신경핵을 구성하는 신경세포들의 시냅스 연결 양태 및 세포막 특성을 규명하기 위해 in vivo 필드전위 및 세포 내 전위 측정법을 이용하여 전기생리적 반응을 관찰하였다. 말초 안면신경 분지를 역행성으로 전기자극시 자극세기에 비례하여 전위의 크기가 증가되었고 필드 전위의 양태는 두 가지 반응으로 나타났는데 전기자극 직후 1ms 부근에서 정점을 나타내는 양태와 이와 더불어 $7\sim8ms$ 부근에서 후기 정점을 동반하는 양태가 있었다. 안면신경핵은 염색시 내측, 배외측, 중간측 및 외측등 4부분의 소핵으로 구분되었다. Neurobiotin으로 채워진 단일 신경세포를 형태학적으로 재구축하였는데 세포체는 추체형태를 나타내었고 주 수상돌기는 모든 방향으로 뻗어져 있었고 각 수상돌기의 영역은 해당 소핵 내에 한정되어 있었다. 일련의 과분극 전류 $(-1.2\sim+1.2nA)$를 세포내에 가하였을 때 동반되는 세포내 전위변화를 입력저항 값으로 계산하였을 때 그 기울기가 직선형으로 나타났다. 탈분극 전류를 세포내 주입시 지속적인 활동성 전위가 나타났으며 전류의 크기에 비례하여 각 전위의 개수가 증가하였고 spike-빈도 적응 현상이 나타났다. 그러나 시간 의존성 내향성 정류현상은 관찰되지 않았고 anodal break excitation이 나타났다. 이상의 실험결과로 보아 안면신경핵을 구성하고 있는 세포들 사이의 시냅스는 다양한 형태로 존재할 가능성이 있다고 사료되며 이들 시냅스간의 변화를 통하여 안면 신경마비, 반쪽 안면 경련, hypoglossal-facial anastomosis등에서 나타날 수 있는 임상적 신경성 증상 기전을 설명할 수 있을 것으로 여겨진다.
Intact leaf과 detached epidermis에 있는 공변세포의 전기 생리학적 특성에 대한 빛과 이산화탄소의 효과를 조사하였다. 빛을 intact leaf의 abaxial side에 처리하면 공변세포막이 과분극 (hyperpolarization)되었다. 닭의장풀의 intact leaf에 있는 공변세포들은 빛에 의해 최대 13 mV 그리고 이산화탄소에 의해 42 mV까지 membrane potential difference(MPD)가 negative하게 변했다. 자주달개비에서도 비슷한 결과를 얻었다. 그러나, 빛과 이산화탄소를 detached epidermis에 있는 공변세포에 처리할 경우에는 공변세포의 MPD가 변하지 않았다. 위의 결과로부터, 엽육세포가 공변세포의 MPD 변화에 영향을 주는 것으로 사료되어, 엽육세포들을 광합성 억제제들을 침윤시켜 엽육세포 광합성의 어느 기작이 공변세포 MPD 변화에 영향을 주는지 조사하였다. CCCP로 침윤한 잎의 공변세포막은 적색광에 의해 약간 탈분극(depolarization)되었고, 이산화탄소에 의해 과분극되었다. 반면에, DCCD와 DCMU로 침윤한 경우에는 대조구 잎과 마찬자기로 적색광과 이산화탄소에 의해 과분극되었다. Azide로 침윤한 잎에 적색광을 처리하면 공변세포의MPD는 변하지 않았고, 이산화탄소를 처리하면 다른 처리구들에 비해 훨씬 감소한 막의 과분극을 보였다. 이는 azide가 잎에 손상을 유도하며 세포내 대사활성을 감소시킨 결과 이산화탄소에 의한 MPD 변화가 작았고, 적색광은 아무 효과도 보이지 않은 것으로 사료된다. 따라서, 엽육세포가 적색광을 감지하며 빛에 의해 유도된 공변세포막 과분극은 순환적 광인산화 반응에 의해 생성된 에너지에 의존하나 이산화타소에 의해 유도된 공변세포막 과분극은 광합성가 무관하다고 볼 수 있다. 또한 이산화탄소를 intact leaf에 처리하면 공변세포 액포가 알칼리화되는 것을 관찰하였는데, 이는 막의 과분극이 양성자 이온의 방출에 의해 일어난다는 것을 의미한다.
가바성 억제 신경세포는 해마의 정상적인 기능을 조절하는데 중요한 역할을 하며 해마 병변을 유발하는 중요한 요소이다. 본 연구는 in vivo 실험법을 사용하여 해마 CA1 영역에서의 전기 생리학적 반응을 측정함으로써 가바성 신경세포의 기능을 분석하고 이를 슬라이스 실험법과 비교하고자 하였다. Fimbria-fonix 전기자극시 전형적인 population spike가 나타났고 $10{\sim}M$ bicuculline 존재하에서는 전기자극에 의해 burst 형태의 population spike가 나타났다. Population spike의 크기는 자극 강도에 비례하였으며 그 숫자도 bicuculline 전극사용시와 같이 동일한 양상을 보였다. CA1 영역의 흥분성 수준을 측정하기 위해 paired-pulse 자극을 하였는데 짧은 자극 간격에서 억제성 반응을 보였고 burst형태의 afterdischarge를 나타내었다. CA1 영역에서 in vivo실험법을 사용한 가바성 신경세포반응의 결과는 추체세포의 흥분성 조절을 효과적으로 분석할 수 있으며 in vitro 실험법에 비해 기능적 평가가 더욱 이상적임을 알 수 있다.
Objective : There are some advantages of trigeminal evoked potential(TEP) recording compared to other somatosensory evoked potential(SSEP) recordings. The trigeminal sensory pathway has a pure sensory nerve branch, a broader receptive field in cerebral cortex, and a shorter pathway. Despite these advantages, there is little agreement as to what constitutes a normal response and what wave forms truly characterize the intraoperative TEP. This study presents the normative data of TEP recorded on the epidural surface of the rat with a platinum ball electrode. Materials & Methods : Under general anesthesia with urethane, the adult Sprague-Dawley male rats(300-350g) were given electrical stimulation with two stainless steel electrodes which were inserted into the subcutaneous layer of the area around whiskers. A reference electrode was positioned in the temporalis muscle ipsilateral to the recording site. Results : TEPs were recorded in the Par I area of somatosensory cortex and recorded most apparently on the point of 2mm posterior from the bregma and 6mm lateral from the midline. The typical wave form consisted of 5 peaks (N1-P1-N2-P2-N3 according to emerging order, upward negativity). Each latency to corresponding peaks was not influenced by the different intensities of stimulation, especially from 1 to 5mA. Average latencies of 5 peaks were in the following order ; 7.7, 11.1, 15, 22.3, 29.4ms. There was also no significant difference between latencies before and after administration of muscle relaxant(pancuronium). For the electrophysiological localization of recorded waves, the action potential of a single unit was recorded with glass microelectrode(filled with 2M NaCl, $3-5M{\Omega}$) in the thalamus of rat. A sharp wave was recorded in the VPM nucleus, in which the latency was shorter than that of N1. This suggests that all 5 peaks were generated by neural activities in the suprathalamic pathway. Conclusion : In terms of recording near-field potentials, our data also suggests that TEP in the rat may be superior to other SSEPs. In overall, these results may afford normative data for the studies of supratentorial lesions such as hydrocephalus or cerebral ischemia which can have an influence on near-field potentials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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