This study was performed to develop the biological treatment technology of wastewater polluted with heavy metals. Zinc-tolerant microorganism, such as Pseudomonas chlororaphis which possessed the ability to accumulate zinc, was isolated from industrial wastewaters polluted with various heavy metals. The characteristics of zinc accumulation in the cells, recovery of the zinc from the cells accumulating zinc, were investigated. Removal rate of zinc from the solution containing 100 mall of Zinc by zinc-tolerant microorganism was more than 90% at 48 hours after inoiulation of the microorganisms. A large number of the electron-dense granules were found mainly on thIn cell wall and membrane fractions, when determined by transmission electron microscope. Energy dispersive X- ray spectroscopy revealed that the electron-dense granules were zinc complex with the substances binding Heavy metals. The zinc accumulated into cells was not desorbed by distilled water, but more than 80% of the zinc accumulated was desorbed by 0.1M-EDTA. The residues of the cells after combustion at 55$0^{\circ}C$ amounted to about 21% of the dry weight of the cells. EDS analysis showed that the residues were comparatively pure zinc compounds containing more than 79% of zinc.
납 내성균인 P. aeruginosa의 균체내 납 축적 특성, 축적형태 및 균체내에 축적된 납의 회수 방법을 조사한 결과는 다음과 같다. 납 농도가 100mg/l인 용액중에서 처리 48시간 후 납 내성균주의 납 처리율은 약 97% 이상이었다. 납이 축적된 균체를 전자현미경으로 관찰한 결과, 균체의 cell wall과 cell membrane에 많은 electron-dense granule들이 형성되어 있었으며, electron-dense granule들을 EDS로 분석한 결과, 이 granule들은 lead complex인 것으로 확인되었다. 공시균주의 균체내 축적된 납은 증류수에 의해서는 거의 탈착이 되지 않았으나 EDTA 처리에 의해서는 약 87% 이상 탈착되었다. 납이 축적된 균체를 $550^{\circ}C$에서 회화시켰을 때 건조균체량의 약 30%에 해당하는 작열잔류화합물들이 생성되었으며, 이 작열잔류화합물들을 EDS로 분석한 결과, 납이 약 86% 이상 함유되어 있는 비교적 순수한 납 화합물인 것으로 확인되었다.
착생식물인 American Ivy의 기근이 흡착 표면에 부착할 때 착생에 따라 일어나는 형태 및 세포수준에서의 분화현상을 전자현미경적으로 연구하였다. 발달 중의 어린 기근은 향축면과 배축면이 구별되지 않는 곤봉상의 형태로 세포소기관들이 비교적 발달하며 색소체가 분포하는 유세포로 구성되어 있다. 이때 유세포 내 여러 액포에는 전자밀도가 높은 물질(EDS)의 축적이 두드러지게 나타나기 시작하였고, 이러한 현상은 기근 표피의 최외층 및 인접한 세포층에서 가장 신속하게 일어났다. 착생하는 기근의 세포는 훨씬 확장되었으나, EDS의 축적으로 인한 액포의 융합으로 세포질은 세포벽 주위로 밀려 극히 일부만 분포하였다. 착생과 거의 동시에 이들 세포층에는 급격한 변화가 일어나 세포질 내 미세구조들이 분해 소실되었고 액포 내 다량의 EDS도 극히 소량만 잔류하거나 거의 사라져 세포는 공동화되었다. 이와 함께, 세포벽 또한 변형되어 점차 불규칙적인 형태의 세포들로 변하였다. 착생이 더욱 진행되면 양면의 표피조직 및 세포들은 모두 불규칙적인 형태로 변화되고, 표면 부위는 일련의 분비물질들이 축적되었다. 흡착이 진행되어 대상 물체표면에 강력히 착생하면서 조직은 더욱 밀착되고 구성 세포들은 찌그러져 기근 조직의 대부분 부위에서 세포사멸이 일어났다. 이와 같이 기근 조직의 기능적 단계에 따라 EDS의 급격한 변화가 나타났는데, 이는 아마 기근이 흡착면에 부착할 때 EDS가 착생과 연관된 기능을 수행하는 것과 관련이 있을 것으로 추정되고 있다.
A bacterial isolate (strain JS-2) characterized as Bacillus sp. was challenged with high concentrations of toxic selenite ions. The microbe was found to transform the toxic, soluble, colorless selenite (${SeO_3}^{2-}$) oxyions to nontoxic, insoluble, red elemental selenium ($Se^0$). This process of biotransformation was accompanied by cytoplasmic and surface accumulation of electron dense selenium ($Se^0$) granules, as revealed in electron micrographs. The cells grown in the presence of selenite oxyions secreted large quantities of extracellular polymeric substances (EPS). There were quantitative and qualitative differences in the cell wall fatty acids of the culture grown in the presence of selenite ions. The relative percentage of total saturated fatty acid and cyclic fatty acid increased significantly, whereas the amount of total unsaturated fatty acids decreased when the cells were exposed to selenite stress. All these physiological adaptive responses evidently indicate a potentially important role of cell wall fatty acids and extracellular polymeric substances in determining bacterial adaptation towards selenite-induced toxicity, which thereby explains the remarkable competitiveness and ability of this microbe to survive the environmental stress.
중금속으로 오염된 폐수를 처리하기 위하여 다양한 처리 방법들이 제시되고 있으나, 최근에는 미생물을 이용한 중금속 처리 방법에 대한 관심이 높아지고 있다. 따라서 중금속으로 오염된 토양에서 중금속에 대하여 강한 내성과 우수한 생물흡착능력을 동시에 가지고 있는 미생물 CPB를 분리하여 중금속에 대한 내성, 흡착 능력 및 흡착의 최적조건을 조사하였다. 중금속에 대한 내성은 전체적으로 $400mg{\ell}^{-1}$ 이상의 농도에서도 높은 내성을 보였으며, 생장 저해도는 단일 중금속 보다 중금속이 복합으로 존재 할 경우 더 크게 나타났다. 중금속 흡착 능력은 Pb>Cd>Cu>Zn의 순으로 흡착 능력이 나타났다. 외형적 흡착형태는 중금속의 종류에 따라 세포 표면 및 세포 막 부근에 electron dense particles들이 형성되었으며, 이는 EDS 분석을 통하여 중금속 화합물인 것으로 확인되었다. 중금속을 흡착하는데 있어 전반적인 최적 pH는 $5{\sim}7$범위였고, 최적 온도는 $25{\sim}35^{\circ}C$이다.
구리 내성균인 P. stutzeri의 균체내 구리 축적 특성, 축적형태 및 균체내에 축적된 구리의 회수 방법을 조사한 결과는 다음과 같다. 구리 농도가 100mg/l인 용액중에서 치리 48시간 후 구리 내성균주의 구리 처리율은 약 78% 이상이었다. 구리가 축적된 균체를 전자현미경으로 관찰한 결과, 균체의 cell wall과 cell membrane에 많은 electron-dense granule들이 형성되어 있었으며, electron-dense granule들은 EDS로 분석한 결과, 이 granule들은 copper complex인 것으로 확인되었다. 구리 내성균주의 균체내 축적된 구리는 증류수에 의해서는 거의 탈착이 되지 않았으나 EDTA 처리에 의해서는 약 80% 이상 탈착되었다. 구리가 축적된 균체를 $550^{\circ}C$에서 회화시켰을 때 건조균체량의 약 23.2%에 해당하는 작열잔류화합물들이 생성되었으며, 이 작열잔류화합물들은 EDS로 분석한 결과, 구리가 약 78.4% 이상 함유되어 있는 비교적 순수한 구리 화합물인 것으로 확인되었다.
A Gram (-), rod-shaped bacterium $2.3{\sim}2.8{\times}0.45{\mu}m$ in size which exhibited growth-inhibiting effects against a cyanobacterium (Anabaena cylindrica) was isolated from Daechung Dam Reservoir. This isolate was identified as Moraxella sp. and designated Moracella sp. CK-1. Hollow zones formed around bacterial colonies on the cyanobacterial lawn. In a mixed-culture of A. cylindrica and the isolate, each microorganism grew inverse-proportionally, and the cyanobacterial vegetative cells completely disappeared within 24 hours. On treatment with Moraxella sp. CK-1, cell walls of A. cylindrica disappeared, but sheathes remained in a more electron dense form. The unit membrane such as thylakoidal membrane was stable to bacterial lysing activity. This bacterium showed a broad action spectrum against cyanobacteria. The growth-inhibiting activity of Moracella sp. CK-1 against A. cylindrica is believed to be performed through the excretion of active substances.
본 연구는 고단백뇨를 보이는 신장질환모델마우스(FGS/Kist mouse)의 사구체에 대한 미세구조학적 변화를 관찰하고자 수행하였다. 전반적으로 사구체내의 모세혈관은 주변부의 혈관사이세포(mesangial cell) 부위의 확장으로 인하여 관강이 좁아져 있었으며 관강내에는 점액양 물질들이 흔히 관찰되었다. 또한 사구체바닥판(basal lamina)이 모세혈관 사이의 공간쪽으로 돌출되어져 있는 소견들도 볼 수 있었다. 혈관사이세포 부위에는 주변부와 뚜렷이 구분되는 전자밀도가 높은 물질들이 많이 차여져 있었다. 한편, 사구체바닥판에 인접하여 존재하고 있는 발세포들(podocytes)은 세포질내 많은 공포들이 관찰되었고, 발세포들이 내고 있는 발세포발(foot process)들은 서로 융합되거나 소실되어 매우 불규칙적인 소견을 보였다.
Initial subcellular responses in susceptible (PI 274420) and resistant (cv. Hartwig) soybeans infected with the soybean cyst nematode (SCN) were examined 2 and 4 days after inoculation (DAI). Subcellular features common to both soybeans at 2 DAI included hypertrophied initial syncytial cells (ISCs) and syncytium-component cells (SCs) with a dense cytoplasm containing proliferated rough and smooth endoplasmic reticulum (RER and SER), a hypertrophied nucleolus, and reduced vacuoles, suggesting that the nematode-infected cells were dedifferentiated. In the resistant soybean, a striking initial subcellular difference from the susceptible soybean was the dilation of the RER, indicating ER dysfunction and leading to cell death. This disturbed nematode feeding, as evidenced by disrupted feeding tubes. In PI 274420, the ISC cytoplasm was depleted, with the exception of ER membranes, at 4 DAI, while the SC cytoplasm was dense with proliferation of starch-containing plastids around multiple nuclei that might be derived from the congregation of nuclei in the neighboring SCs and in part by nuclear division without cytokinesis. In cv. Hartwig, syncytia were necrotized with secondary cell wall thickening outside the plasma membrane and an extremely dense cytoplasm containing a nucleus with an electron-lucent nucleolus, accompanied by the proliferation of closely stacked parallel RER and ribosomes. These results suggest that syncytia develop continuously in PI 274420 to produce and store nutritional substances in SCs, providing for the nematode through ISC until maturation, but in cv. Hartwig, syncytia degenerate early due to excessive metabolism, blocking nematode feeding and cytoplasmic connections with adjacent intact cells.
양서류 피부과립선의 미세구조를 관찰하기 위하여 무미양서류인 무당개구리(Bombina orientalis), 두꺼비 (Bufo bufo gargarizans), 개구리 (Rana nigromaculata) 및 옴개구리 (Rana rugosa)의 피부조직은 2.5% glutaraldehyde-paraformaldehyde (pH 7.2)와 1%osmium tetroxide에 전후 고정한 후 ethanol과 acetone으로 탈수, Epon 812 mixture에 포매하여 LKB ultramicrotome으로 초박절표본을 만들어 uranyl acetate와 lead citrate으로 염색하여 JEOL-100B형 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 양서류 피부과립선은 선상피세포와 근상피세포로 이루어졌다. 2. 양서류 피부과립선의 선상피세포는 암세포들로 구성되었으나 무당개구리에서는 명세포도 관찰되었다. 3. 양서류 피부과립선은 전분지를 하였다. 4. 양서류 피부과립선 상피세포의 핵은 원형 내지 타원형으로 크고 작은 핵경함요를 보였고, heterochromatin은 주로 핵경 인접부에 많았다. 세포질에는 mitochondria가 핵주변부에 비교적 많이 산재하였고, rough-surfaced endoplasmic reticulum은 핵 주변부에 발달하였지만 smooth-surfaced endoplasmic reticulum은 미약하였다. 5. 분비과립들은 구형 또는 난형으로 높은 전자밀도를 보였으며 다소 약한 전자밀도를 보이는 과립도 관찰되었다. 6. 양서류 과립선내 분비과립들이 같은 세포내에서 다소 전자밀도의 차이를 보이는 것은 분비과립의 형성단계에 따른 농도 차이에 기인하며 그 화학적 조성은 유사하다고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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