D-raf, a Drosophila homolog of the human c-raf-1, is known as a signal transducer in cell proliferation and differentiation. A previous study found that the D-raf gene expression is regulated by the DNA replication-related element (DRE)/DRE-binding factor (DREF) system. In this study, we found the sequences homologous to transcription factor C/EBP, MyoD, STAT and Myc recognition sites in the D-raf promoter. We have generated various base substitutional mutations in these recognition sites and subsequently examined their effects on D-raf promoter activity through transient CAT assays in Kc cells with reporter plasmids p5'-878DrafCAT carrying the mutations in these binding sites. Through gel mobility shift assay using nuclear extracts of Kc cells, we detected factors binding to these recognition sites. Our results show that transcription factor C/EBP, STAT and Myc binding sites in D-raf promoter region play a positive role in transcriptional regulation of the D-raf gene and the Myo D binding site plays a negative role.
It is a major objective for the management and operation of water resources system to forecast streamflows. The applicability of artificial neural network model to hydrologic system is analyzed and the performance is compared by statistical method with observed. Multi-layered perception was used to model rainfall-runoff process at Pyung Chang River Basin in Korea. The neural network model has the function of learning the process which can be trained with the error backpropagation (EBP) algorithm in two phases; (1) learning phase permits to find the best parameters(weight matrix) between input and output. (2) adaptive phase use the EBP algorithm in order to learn from the provided data. The generalization results have been obtained on forecasting the daily and hourly streamflows by assuming them with the structure of ARMA model. The results show validities in applying to hydrologic forecasting system.
Kim, Woo Kyoung;Kang, Nam E;Kim, Myung Hwan;Ha, Ae Wha
Nutrition Research and Practice
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제7권3호
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pp.160-165
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2013
3T3-L1 preadipocyte were differentiated to adipocytes, and then treated with 0, 10, 20, and $40{\mu}g/mL$ of peanut sprout ethanol extract (PSEE). The main component of PSEE is resveratrol which contained 5.55 mg/mL of resveratrol. The MTT assay, Oil-Red O staining, glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) activity, and the triglyceride concentration were determined in 3T3-L1 cells. MMP-2 and MMP-9 activities as well as mRNA expressions of C/EBP ${\beta}$ and C/EBP ${\alpha}$ were also investigated. As the concentration of PSEE in adipocytes increased, the cell proliferation was decreased in a dose-dependent manner from 4 days of incubation (P < 0.05). The GDPH activity (P < 0.05) and the triglyceride concentration (P < 0.05) were decreased as the PSEE treatment concentration increased. The mRNA expression of C/EBP${\beta}$ in 3T3-L1 cells was significantly low in groups of PSEE-treated, compared with control group (P < 0.05). The MMP-9 (P < 0.05) and MMP-2 (P < 0.05) activities were decreased in a dose-dependent manner as the PSEE concentration increased from $20{\mu}g/mL$. In conclusion, it was found that PSEE has an effect on restricting proliferation and differentiation of adipocytes.
Objective : This experimental study was designed to determine the anti-obestic effects of Bangpoongtongsungcankamibang(BTSK). Method : In vitro, BTSK extracts of various concentration (50,100, 200 $200{\mu}g/ml$)were added examination. The protein and mRNA expression of $C/EBP{\alpha}$ and $PPAR{\gamma}$ receptor was measured by western blot assay and RT-PCR. In vivo, BTSK extracts of various concentration (100, $200{\mu}g/ml$) were orally administered to induced hyperlipidemic rats by poloxamer-407 for consecutive four weeks and serum triglyceride, total cholesterol were measured. This method applied to induced hyperlipidemic rats by triton WR-1339, too. Obesity induced rats by the high fat-diet for six weeks were orally administered BTSK extracts of various concentration (100, $200{\mu}g/ml$) and serum triglyceride, total cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride, LDL-cholesterol, triglyceride, HDL-cholesterol, hydroxy radical, superoxide dismuatse activity were measured. Results : I. In vitro 1. The 3T3-L1 cells' differentiation was significantly decreased by BTSK. 2. expression of $C/EBP{\alpha}$ and $PPAR{\gamma}$ was was significantly decreased by BTSK. II. In vitro 1. BTSK significantly reduced serum triglyceride, total cholesterol, contents in poloxamer-407 treated rat. 2. BTSK significantly reduced serum triglyceride, contents in Triton WR-1339 treated rat. But Total cholesterol did not show a significant change. 3. BTSK significantly reduced body weight gain of rat and adipose tissue mass of rats and serum triglyceride, LDL-cholesterol, contents and significantly increased HDL-cholesterol, HTR(HDL-cholesterol/Total-cholesterol) in rats with obesity induced by the high fat-diet. 4. BTSK reduced blood lipid peroxide, hydroxy radical and increased superoxied dismuatse(SOD) activity.
In this study, the decolorization of Evercion Blue P-GR (EBP) and Ostazin Black H-GRN (OBH) was investigated using white-rot fungi named as Trametes versicolor (T. versicolor) by Membrane Bioreactor (MBR) system. This study involved experiments employing synthetic textile wastewater in Membrane Bioreactor (MBR) system (170 ml), initially inoculated with a pure culture of fungi, but operated, other than controlling pH (4.5±0.2) and temperature (25±1℃), under non-sterile conditions. The effect of dye concentrations on fungal biodegradation was also investigated. The decolorization efficiencies were 98%, 90%, and 87% respectively, for EBP when the initial dye concentration of 50, 100, and 200 mg L-1 were used. However, the decolorization percentages for OBH dye were obtained 95% for 50 mg L-1 dye solution in 2 days and 66% for 100 mg L-1 dye solution in 5 days. Possible interactions between dye molecules and the fungal surface were confirmed by SEM, EDX, and FTIR analyses.
멜리틴은 봉독의 주요 성분 중 하나로 항염증과 항암활성 효과를 가지고 있다. 우리는 폐암세포에서 멜리틴이 EMT 억제를 통해 암세포 이동과 침투를 억제하는 사실을 확인하였다. 멜리틴은 EGF로 유도된 폐암 세포 이동과 침투를 억제하였을 뿐만 아니라 EMT와 관련된 단백질인 이카드헤린의 발현을 증가시켰으며, 바이멘틴과 피브로넥틴 발현은 감소시켰다. 또한 멜리틴에 의한 EMT조절 전사인자인 ZEB2, Slug, Snail의 발현을 확인한 결과 멜리틴 처리에 의해 농도의존적으로 발현이 감소하였다. 또한 작용 메커니즘을 확인하기 위해 mTOR와 FAK 메커니즘을 확인한 실험에서 EGF 처리에 의해 증가한 AKT, mTOR, p70S6K, 4EBP1의 인산화가 멜리틴 농도의존적으로 감소하였다. 그러나 FAK는 EGF에 의해 변화가 없었으며, EKR, JNK 메커니즘은 EGF 처리에 의해 인산화가 증가하였으나 멜리틴 처리에 의해 아무런 영향을 받지 않았다. 그러므로, 폐암세포의 세포 이동과 침투에 대한 멜리틴의 억제효과는 AKT/mTOR/P70S6K/4EBP1 기전 억제를 통해 EMT를 억제하여 세포 이동과 침투를 억제하는 것으로 보인다.
본 연구에서는 괭생이모자반 에탄올 추출물의 항비만 효과에 대해 알아보고자 3T3-L1 preadipocyte에서 Oil Red O staining과 triglyceride content, adipogenesis의 발현에 대해 조사하였다. MTT assay를 통해 괭생이모자반 에탄올 추출물의 세포 독성을 확인 해 본 결과 $200{\sim}1,000{\mu}g/ml$ 농도에서 90% 이상의 세포 생존율을 확인 할 수 있었다. 또한 insulin, dexamethasone과 IBMX 복합물을 처리하여 분화를 유도하였을 때는 분화유도제를 처리하지 않은 군에 비해 활발하게 지방구를 형성하였으나, 괭생이모자반 에탄올 추출물을 250, 500, $1,000{\mu}g/ml$ 농도로 처리하였을 때는 농도 의존적으로 지방구 형성을 억제하였다. 이를 정량하여 triglyceride content (%)로 나타낸 결과 농도별로 13%, 16%, 23% 억제 효과를 나타내었다. 또한 Western blot assay를 통해 adipogenic transcription factor의 발현양상을 비교해 본 결과, 분화유도제 처리에 의해 $C/EBP{\alpha}$, $C/EBP{\beta}$와 $PPAR{\gamma}$의 발현이 증가하였으나, 괭생이모자반 에탄올 추출물을 처리하였을 때는 이러한 전사인자들의 발현이 농도 의존적으로 감소됨을 확인 할 수 있었다. 이상의 결과를 통해 괭생이모자반 에탄올 추출물은 adipogenic transcription factor의 발현을 조절하여 지방세포의 분화를 억제하였으며, 지방구와 triglyceride 생성을 감소시켜 최종적으로 비만억제 효과를 나타낸다는 것을 알 수 있었다.
Objectives This experimental study was designed to investigate the effects of Dai-saiko-to (DSH) on differentiation of 3T3-L1 preadipocytes and body weight, serum lipid levels in high-fat diet-induced obese mice. Materials and Methods Cells were incubated with DSH at an indicated concentration (0.01-1 mg/ml) for 24h, then the growth rate was assessed by MTS assay. 3T3-L1 preadipocytes were incubated in DMEM for 2 days with the indicated concentrations of DSH. On Day 6, the cells were fixed and the cellular lipid contents were assessed by Oil-Red-O staining. The expression of peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) and cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymine (CCAAT)/enhancer-binding proteins ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$) as adipocyte-specific proteins were determined by real time RT-PCR and western blotting. Four-weeks old mice (wild-type C57BL/6) were used for all experiments. Body weight gain and serum lipid levels were measured in the obesity-induced mice. Results DSH did not show toxicity even at the concentration of 1 mg/ml and DSH significantly inhibited the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner. Also, DSH significantly reduced the expressions of $PPAR{\gamma}$ and $C/EBP{\alpha}$ in a dose-dependent manner. Furthermore, DSH significantly reduced body weight gain, serum glucose, total cholesterol and LDL-cholesterol contents in obesity-induced mice. Conclusions These results demonstrated that DSH inhibited 3T3-L1 preadipocyte differentiations and high-fat diet-induced obesity in mice.
Bojungchiseub-tang (BJCST) has been used in symptoms and signs of edema, dampness-phlegm, kidney failure, and so on. BJCST is also expected to have strong anti-obesity activities. However, little is known about the mechanisms of its inhibitory effects on adipocyte differentiation and adipogenesis. In the present study, we examined the effects and mechanism of BJCST on transcription factors and adipogenic genes of 3T3-L1 preadipocytes to understand its inhibitory effects on adipocyte differentiation and adipogenesis. Our results showed that BJCST significantly inhibited differentiation and adipogenesis of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner. To elucidate the mechanism of the effects of BJCST on lowering lipid content in 3T3-L1 adipocytes, we examined whether BJCST modulate the expressions of transcription factors to induce adipogenesis and adipogenic genes related to regulate accumulation of lipids. As a result, the expression of steroid regulatory element-binding protein (SREBP)1, cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymidine (CCAAT)/enhancer binding proteins ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$), $C/EBP{\beta}$, $C/EBP{\delta}$, and peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) genes, which induce the adipose differentiation, liver X receptor $(LXR){\alpha}$ and fatty acid synthase (FAS) genes, which induce lipogenesis and adipose-specific aP2, Adipsin, lipoprotein lipase (LPL), CD36, TGF-${\beta}$, leptin and adiponectin genes, which compose fat formation were decreased. BJCST also reduced the expression of acyl CoA oxidase (ACO) and uncoupling protein (UCP) genes related to lipid oxidation. In conclusion, BJCST could regulate transcript factor related to induction of adipose differentiation and inhibited the accumulation of lipids and expression of adipogenic genes.
Objectives : Mahuang-Chuanwu(Mahwang-Cheonoh) Pharmacopuncture(MCP) has been used to treat obesity in Clinical Korean Medicine. MCP solution(MCPS) is also expected to have strong anti-obesity activities. However, little is known about the mechanisms of its inhibitory effects on adipocyte differentiation and lipogenesis. Methods : In the present study, we examined the effects of MCPS on differentiation and lipogenesis of 3T3-L1 adipocytes. To elucidate the mechanism of the effects of MCPS on lowering lipid content in 3T3-L1 adipocytes, we examined whether MCPS modulates the expressions of transcription factors to induce lipogenesis and adipogenic genes related to regulate the accumulation of lipids. Results : Our results showed that MCPS significantly inhibited differentiation and lipogenesis of 3T3-L1 adipocytes in a dose-dependent manner. MCPS suppressed the mRNA expressions of cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymidine(CCAAT)/enhancer binding proteins ${\alpha}$($C/EBP{\alpha}$), C/EBP ${\beta}$, $C/EBP{\delta}$, and peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$($PPAR{\gamma}$) genes related to the induction of adipose differentiation. MCPS inhibited the mRNA expressions of adipose-specific aP2, adipsin, lipoprotein lipase(LPL), CD36, TGF-${\beta}$, and leptin genes related to the fat formation. MCPS downregulated the mRNA expressions of liver X receptor(LXR) ${\alpha}$ and fatty acid synthase(FAS) genes related to the induction of lipogenesis. In addition, MCPS reduced the production of adipocyte-induced pro-inflammatory cytokines. Conclusions : MCPS could regulate the accumulation of lipids and expression of adipogenic genes via inhibition of transcript factors related to induction of adipose differentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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