The use of fossil fuels is a major contributor to the increase atmospheric greenhouse gas emissions. As such problems arise, interest in new and renewable energy devices, particularly fuel cells, is greatly increasing. In this study, various characteristics of mixed strains were observed in wastewater collected by the Jeonju Environment Office to investigate the effects of microorganisms on voltage generation and voltage generation of substrates, electrode materials, electrons, electron transport media, and ash microbial fuel cells. As a result of separately measuring the voltage generated during inoculation, the inoculation voltage of Escherichia coli K12 (E. coli K12) was 0.45 V, and the maximum inoculation voltage of the mixed strain was 1.2 V. Thereafter, voltage values were collected using a digital multimeter and the amount of voltage generated over time was measured. In the case of E. coli K12, the maximum voltage reached 0.45 V, and the cell voltage was maintained above 0.23 V for 140 hours. In contrast, for the mixed strain, the maximum voltage reached 1.2 V and the voltage was slowly decreased to 0.97 V. In addition, the degree of microbial adsorption to the electrod surface after the inoculation test was confirmed using a scanning electron microscope. Therefore, these results showed the possibility of purifying pollutants at the same time as power generation through the production of hydrogen ions using microorganisms and wastewater.
Kim, Ji-Young;Kim, Youngsoo;Lee, Kyoung;Kim, Chi-Kyung
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제6권1호
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pp.56-60
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2001
The pcbC gene encoding (4-chloro-)2,3-dihydroxybiphenyl dioxygenase was cloned from the genomic DNA of Pseudomonas sp. P20 using pKT230 to construct pKK1. A recombinant strain, E. coli KK1, was selected by transforming the pKK1 into E. coli XL1-Blue. Another recombinant strain, Pseudomonas sp. DJP-120, was obtained by transferring the pKK1 of E. coli KK1 into Pseudomonas sp. DJ-12 by conjugation. Both recombinant strains showed a 23.7 to 26.5 fold increase in the degradation activity to 2,3-dihydroxybiphenyl compared with that of the natural isolate, Pseudomonas sp. DJ-12. The DJP-120 strain showed 24.5, 3.5, and 4.8 fold higher degradation activities to 4-chlorobiphenyl, catechol, and 3-methylcatechol than DJ-12 strain, respectively. The pKK1 plasmid of both strains and their ability to degrade 2,3-dihydroxybiphenyl were stable even after about 1,200 generations.
A flux determination methodology has been built which enables to develop constrained stoichiometric relationships and metabolic balances. The analysis differs from those developed for anaerobic growth conditions in that cell mass formation is a significant sink for carbon. When combined with experimental measurements, a determined system of equations results yielded tricarboxylic acid (TCA) cycle and glycolytic fluxes. The methodology was implemented to determine the fluxes of E. coli B/r and K12, and it was found that as the growth rate in a glucose minimal medium increased, the cells became increasing glycolytic and the TCA fluxes either leveled off or declined. The pattern identified for the TCA fluxes corresponded to ${\alpha}$-ketoglutarate dehydrogenase's induction-repression pattern, thereby suggesting that the induction-repression of the enzyme could result in significant flux changes. When the minimum flux solution was contrasted to the glycolytic and TCA fluxes determined, two observations were made. First, the minimum flux could provide the cell's biosynthetic ATP requirements. Second, at a high growth rate in a glucose medium, the excess glycolytic flux exceeded that of the TCA cycle, which appeared to more closely match the biosynthetic needs.
An experiment was conducted to assess the interaction between genotypes and dietary lysine content in commercial broiler chicks by measuring growth, and response to sheep red blood cells (SRBC) and Escherichia coli (E.coli) inoculation. Female chicks from four genotypes (A=Anak 2000; B=Hubbard; C=Cobb and D=Synthetic broiler) were fed four levels of lysine in diet from d old till the end of experiment. The lysine content of the diet was 9.61, 10.51, 11.41 and 12.31 g/kg. Body weights at 0, 14, 28 and 42 d of age and pen-wise feed intake till 14, 28 and 42 d of age were recorded. Production of antibody against SRBC and resistance to E.coli were measured at 5 d of post inoculation (PI) at 43 d of age. Also, response to phytohemaglutinin-P (PHA-P) was measured at 12 and 24 h of PI at 48 d of age. Genotype by dietary lysine interaction was significant for body weights at 14 and 28 d of age, but not at 42 d of age. Genotype by dietary lysine interaction was not significant for feed efficiency, for antibody titers against SRBC, and for air sac lesion score, relative bodyweight change, and relative weights of bursa and spleen in response to E.coli inoculation. However, a significant interaction was observed between the levels of lysine and dosage of SRBC for antibody titers. There was significant genotype by dietary lysine interaction for cutaneous basophilic hypersensitivity (CBH) response to PHA-P at 12 and 24 h of PI. It may be concluded that to obtain optimum body weight and immunity in commercial broilers the dietary lysine requirement may be recommended specific to the genotype.
We investigated the transgalactosylation reaction of chlorphenesin (CPN) using ${\beta}$-galactosidase (${\beta}$-gal)-containing Escherichia coli (E. coli) cells, in which galactose from lactose was transferred to CPN. The optimal CPN concentration for CPN galactoside (CPN-G) synthesis was observed at 40 mM under the conditions that lactose and ${\beta}$-gal (as E. coli cells) were 400 g/l and 4.8 U/ml, respectively, and the pH and temperature were 7.0 and $40^{\circ}C$, respectively. The time-course profile of CPN-G synthesis under these optimal conditions showed that CPN-G synthesis from 40 mM CPN reached a maximum of about 27 mM at 12 h. This value corresponded to an about 67% conversion of CPN to CPN-G, which was 4.47-5.36-fold higher than values in previous reports. In addition, we demonstrated by thin-layer chromatography to detect the sugar moiety that galactose was mainly transferred from lactose to CPN. Liquid chromatography-mass spectrometry revealed that CPN-G and CPN-GG (CPN galactoside, which accepted two galactose molecules) were definitively identified as the synthesized products using ${\beta}$-gal-containing E. coli cells. In particular, because we did not use purified ${\beta}$-gal, our ${\beta}$-gal-containing E. coli cells might be practical and cost-effective for enzymatically synthesizing CPN-G. It is expected that the use of ${\beta}$-gal-containing E. coli will be extended to galactose derivatization of other drugs to improve their functionality.
This study examined the prevalence of adherence factors, toxin genes, antimicrobial resistance phenotypes, and resistance genes in Escherichia coli (E. coli) isolated from piglets with diarrhea before and after the ban on antibiotic growth promoters (AGPs) in Korea from 2007 to 2018. In this period, pathogenic 474 E. coli isolates were obtained from diarrheic piglets. The virulence factors and antimicrobial resistance genes were assayed using a polymerase chain reaction, and the susceptibility to antibiotics was tested according to the Clinical and Laboratory Standards Institute guidelines. After the ban on AGPs, the frequency of F4 (12.5% to 32.7%) increased significantly, and LT (31.9% to 20.3%) and EAST-I (46.5% to 35.2%) decreased significantly. In addition, the resistance to streptomycin (45.8% to 67.9%), cephalothin (34.0% to 59.4%), and cefazlin (10.4% to 28.8%) increased significantly. Colistin resistance plasmid-mediated genes, mcr-1 and mcr-3, were detected after the ban on AGPs. The results of this study can provide useful data for analyzing the impact of the ban on AGPs on the virulence profiles and antimicrobial resistance of E. coli isolated from piglets with diarrhea in Korea.
The experimental design and response surface methodology (RSM) have been applied to the investigation of the electro-UV complex process for the disinfection of E. coli in the water. The disinfection reactions of electro-UV process were mathematically described as a function of parameters power ($X_1$), NaCl dosage ($X_2$), initial pH ($X_3$) and disinfection time ($X_4$) being modeled by use of the Box-Behnken technique. The application of RSM using the Box-Behnken technique yielded the following regression equation, which is an empirical relationship between the residual E. coli number and test variables in actual variables: Ln (CFU) = 23.57 - 0.87 power - 1.87 NaCl dosage - 2.13 pH - 2.84 time - 0.09 power time - 0.07 NaCl dosage pH + 0.14 pH time + 0.03 $power^2$ + 0.47 NaCl $dosage^2$ + 0.20 $pH^2$+ 0.33 $time^2$. The model predictions agreed well with the experimentally observed result ($R^2$ = 0.9987). Graphical response surface and contour plots were used to locate the optimum point. The estimated ridge of maximum response and optimal conditions for the E. coli disinfection using canonical analysis was Ln 1.06 CFU (power, 15.40 W; NaCl dosage, 1.95 g/L, pH, 5.94 and time, 4.67 min). To confirm this optimum condition, the obtained number of the residual E. coli after three additional experiments were Ln 1.05, 1.10 and Ln 1.12. These values were within range of 0.62 (95% PI low)~1.50 (95% PI high), which indicated that conforming the reproducibility of the model.
Kim, Hye-Nam;Lee, Jung-Nam;Kim, Gi-Eun;Ha-Lee, Young-Mie;Kim, Chan-Wha;Sohn, Jeong-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권6호
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pp.826-831
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1999
${\beta}-Glucan$, one of the major cell wall components of Saccharomyces cerevisiae, is known to enhance the immune function, especially by activating macrophages. Accordingly, in an effort to develop a safe and efficient immune stimulatory agent, we prepared crude ${\beta}-glucan$ (glucan-p1) and partially purified ${\beta}-glucan$ that was free of mannoproteins (glucan-p2), and evaluated their effect on both the macrophage function and resistance to E. coli-induced peritonitis. To investigate the function of the macrophages, phagocytosis, $TNF-{\alpha}$ secretion, oxygen burst, and the expression of cytokine genes such as $IFN-{\gamma}$ and IL-12 were analyzed. Glucan-p2 markedly stimulated the macrophages with all these parameters. Glucan-p1, however, did not stimulate phagocytosis, yet it induced $TNF-{\alpha}$ secretion, oxygen burst, and the expression of $IFN-{\gamma}$ and IL-12, although less efficiently than glucan-p2. Finally, to test the in vivo protective effect of {\beta}-glucan against infection, the survival of mice from E. coli-induced peritonitis was investigated. After 24 h of the peritoneal challenge of E. coli, all of the mice treated with glucan-p2 survived whereas none survived in the control group. Glucan-p1 showed only a marginal effect in protecting the mice. These results suggest that mannoprotein-free gluean-p2, but not gluean-p1, can serve as an effective immune-stimulating agent.
Escherichia coli의 생장을 저해하는 중금속(Cu, Cd, Cr, Hg, Zn) 영향을 정량적으로 조사하였고, 중금속 독성에 대한 적응과정에서의 독성변화를 노출시간대별로 평가하였다. 중금속에 의한 E. coli의 생장저해 작용은 중금속의 종류에 따라 다른 동향을 보였고, 생장을 완전 저해하는 중금속의 농도는 각각 Cu 3.5mM, Zn 2.5mM, Cd 1.5mM, Cr 1.2mM, Hg 0.12mM 이었다. $EC_{50}$을 기준으로 한 E. coli의 중금속에 대한 내성은 Cu > Zn > Cr > Cd > Hg 순이다. 노출 시간에 따른 $EC_{50}$의 변화를 plotting하여 그 기울기에 따라 피시험체의 독성물질에 대한 적응성 평가가 가능함을 보였다. 기울기 값이 작은 경우에는 피검사체가 독성물질에 대한 적응성이 약하고, 기울기 값이 크면 클수록 피시험체가 독성물질에 대한 적응성이 우수하다는 것을 의미한다. E. coli의 독성물질인 중금속에 대한 적응성은 Zn > Cd > Cu >> Cr > Hg 순 이었다.
The generation of secretory IgA antibodies (Abs) for specific immune protection of mucosal surfaces depends on stimulation of the mucosal immune system, but this is not effectively achieved by parenteral or even oral administration of most soluble antigens. Thus, to produce a possible vaccine antigen against urinary tract infections, the uropathogenic E. coli (UPEC) adhesin was genetically coupled to the heat-labile Escherichia coli enterotoxin A2B (ltxa2b) gene and cloned into a pMAL-p2E expression vector. The chimeric construction of pMALfimH/ltxa2b was then transformed into E. coli K-12 TB1 and its nucleotide sequence was verified. The chimeric protein was then purified by applying the affinity chromatography. The purified chimeric protein was confirmed by SDS-PAGE and westem blotting using antibodies to the maltose binding protein (MBP) or the heat labile E. coli subunit B (LTXB), plus the N-terminal amino acid sequence was analyzedd. The orderly-assembled chimeric protein was confirmed by a modified $G_{M1}$-ganglioside ELISA using antibodies to adhesin. The results indicate that the purified chimeric protein was an Adhesin/LTXA2B protein containing UPEC adhesin and the $G_{M1}$-ganglioside binding activity of LTXB. thisstudy also demonstrate that peroral administration of this chimeric immunogen in mice elicited high level of secretory IgA (sIgA) and serum IgG Abs to the UPEC adhesin. The results suggest that the genetically linked LTXA2B acts as a useful mucosal adjuvant, and that adhesin/LTXA2A chimeric protein might be a potential antigen for oral immunization against UPEC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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