분자량이 상이한 세 종류의 키토산의 항균활성을 E. coli O157 : H7, S. aureus 및 C. albicans 균주를 이용하여 측정, 분석하였다. E. coli O157 : H7와 S. aureus에 대해서는 분자량 10,000인 키토산이 가장 강한 항균활성을 보였으며 C. albicans에 대해서는 6량체의 키토산 올리고당이 가장 강한 활성을 나타내었다. 키토산 첨가농도는 E. coil O157 : H7와 S. aureus의 경우 0.1 mg/mL의 농도에서, C. albicans의 경우는 chitohexaose 1 mg/mL의 농도에서 항균활성이 가장 높았다. 모든 키토산 처리구에서 미생물 사멸 속도는 키토산 처리 1시간 이내에서 가장 높게 나타났으며 그 이후로는 점차 낮은 속도를 보였다. 사멸되었거나 파손된 미생물 세포로부터 유래되는 단백질, 핵산물질 및 $Ca^{2+}$ 량은 키토산 처리 시간 이내에 가장 많았으며 ${\beta}-galactosidase$ 활성도 같은 시간대에서 가장 빠른 속도로 중대되는 것으로 나타났다. S. aureus에 대한 세포막 손상 정도를 측정하여 본 결과 전체 미생물균체중 약 10%에 상당하는 균수가 막손상을 가져 왔다. 따라서, 키토산은 고유의 양이온성 성질을 이용하여 미생물의 세포벽과 세포막에 결합하여 그 결과로 세포 내 물질의 세포 외로의 유출내지는 세포막 대사의 저해 등의 효과를 나타냄으로써 항균활성을 나타내는 것으로 추측되었다.
Automated turbidometer, Bioscreen(Labsystem)을 이용하여 tryptic soy broth에 에탄올(3%, 5%. 7%(v/v)) 및 유기산( 초산, 구연산 .젖산, 피로피온산 및 주석만(W/V))을 단독으로 첨가하거나, 혼합하여 Staphylococcus aureus, Salmonella typimurium, Escherichia coil O157 : H7, Listeria monocytogenes의 증식 곡선의 면적(AREA)과, 최대성장율(MGR), MGT(minimum generation time), DT(detection time)를 조사하였다. 모든 균주는 7% 에탄올에서 24 시간 동안 전혀 증식하지 못했으나 0.1% 유기산에서는 미생물의 종류와 유기산의 종류에 따라 다양한 양상을 보였다. S. aureus의 경우 프로피온산이 뚜렷한 증식 저해 효과를 나타내었으며, S. typhimurium의 경우 초산이 비교적 높은 효과를 보였다 L. monocytogenes에 대해서는 프로피온산, 주석산 및 젖산이 뚜렷한 증식 저해 효과를 보인 반면, E. coil O157 : H7의 경우에는 초산과 프로피온산이 효과가 있었다. 1%· 에탄올과 0.01% 유기산을 병용했을 때 S. typhimurium은 AREA에서 2% 에탄올 및 0.05% 초산의 증식 저해율과 비슷한 효과를 보였으며, L. monocytogenes는 AREA에서 0.05%프로피온산 및 MGR, MGT, DT에서 2% 에탄올과 비슷한 저해율을 보였다. S. aureus은 0.01% 프로피온산을 단독으로 사용했을 때가 오히려 0.01% 프로온피산과 1% 에탄올을 동시에 처리한 경우보다도 월등히 증식 저해 효과를 나타내었으며, E. coil O157 : H7은 1% 에탄올과 0.01% 유기산을 동시에 사용해도 AREA를 제외하고는 증식 저해를 받지 않았다.
The objects of the present study were to establish the method of purification, subunit dissociation of verotoxin-2 (VT2) produced by Escherichia coli O157:H7, and to investigate the characteristics of purified verotoxin-2 such as molecular weight and composition of amino acid. The results were summerized as follows; Verotoxin-2 was extracted by addition of polymyxin B sulfate into bacterial cell lysate prepared from Escherichia coli O157:H7(KSC109). As an initial step, the bacterial cell lysate was precipitated with 30% saturated ammonium sulfate. The precipitated crude toxin was then subjected to anion-exchange, chromatofocusing and cation-exchange chromatography. Using this scheme, we obtained highly purified toxin with a specific activity of $1.1{\times}10^9$$CD_{50}/mg$. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) for purified VT2 showed two protein bands. The upper band, approximately 32 Kd, was supposed as A subunit and the lower band, approximately 7.7 Kd, was supposed as B subunit. When the toxin was separated in the subunit-dissociating solution, two peaks emerged with retention times of 15 and 28 min by HPLC. These peaks represented A subunit and B subunit, respectively. The amino acid composition of purified VT2 were made up in order of glutamic acid, histamine, asparaginic acid, histidine, lysine, alanine and leucine etc. The largest amount among the amino acid composing VT2 was methionine.
This study was per-formed to screen lactic acid bacteria poultry for the probiotic use. Among the previously obtained acid tolerant, 139 strains, 111 strains were selected with MRS medium containing 0.3% oxgall. 34 strains of 111 was re-selected by Gram-staining and acid producing ability. These strains was identified by MIDI Sherlock Microbial Identification System. Among the identified 34 strains Lactobacillus fermenum YL-3 was selected for the final pro-biotic use because of the good growth and high survival rate at pH 2.0. 60%, 50% and 40% cells of Lactobacillus fermentum YL-3 survived at pH 3.0, 2.5 and 2.0, respectively. More than $10^{7}$ / CFU/ml survived when exposed with the number of $10^{8}$ CFU/ml at pH 2.0 after 12 hr. L.fermenum YL-3 maintained growth in MRS broth containing 0.3, 0.5, 1.0 and 2.0% oxgall for 24 hr. L.fermenum YL-3 showed an inhibitory effect against pathogenic strains of Sal. enteritidis and E. coli O157:H7. In mixed culture with L.fermenum YL-3 Sal. enteritidis lost ability com-pletely in 15 hrs and E. coil O157:H7 in 16 hrs.
Objectives: The purpose of this study was to apply the Hazard Analysis Critical Control Point (HACCP) system to the production of seasoned laver products. The hazard analysis examined microbial evaluations and developed a HACCP management plan through the heating process. Methods: In this study we chose three companies and performed the analysis thrice. During this study, general bacteria along with other food poisoning bacteria such as Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Bacillus cereus, E.coil, O157:H7, Vibrio parahaemolyticus, were studied at varying temperatures from 100 to $300^{\circ}C$. Results: The presence of general bacteria was detected in raw laver in the samples analyzed from all the three companies, and the number ranged from $10^5-10^7$. Bacillus cereus was detected in samples from only two of the three companies analyzed. However, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, E.coil, O157:H7, and Vibrio parahaemolyticus were all negative. General bacteria was reduced to $10^5$ after being subjected to temperatures of $100-250^{\circ}C$, but heating to over $270^{\circ}C$ reduced the number to below $10^3$, and the other microbes such as Bacillus cereus were not detected. Conclusions: In conclusion, the heating process ($270-280^{\circ}C$) along with RPM of 100-1200 were identified as CCP to reduce biological hazards.
The objective of this study was to evaluate three verocytotoxin-producing Escherichia coli (VTEC) detection kits to detect the presence of VT genes: Doupath Verocytotoxin (GLISA) developed by MERCK, ProsPect Shiga Toxin E. coil (STEC) Microplate Assay (ELISA) developed by Remel, and a polymerase chain reaction method. Our laboratory verified artificially inoculated samples. All three methods could detect very low numbers of VTEC, but VT-PCR had the best sensitivity for VTEC detection. From April through September 2005, 257 ground-beefs from supermakets and traditional markets were examined for the presence of VTEC by polymerase chain reaction immediately after purchase and total viable counts (TVC) were determined. VTEC was isolated from 30 of 257 ground-beefs. A variety of serogroups was found, including 10 stains belonging to the virulence type EHEC, but major serogroups such as O157, O26 and O111 were nor found.
본 연구는 유산균을 함유한 녹즙제품의 HACCP(Hazard Analysis Critical Control Point)시스템에 의한 제조공정도 작성과 공정별 원료 농산물과 제조 시설에 대한 일반 세균수와 병원성 미생물을 평가하기 위한 목적으로 수행하였다. 공정별 원료농산물의 원재료보관공정 단계의 4가지 시료에서 일반세균이 검출되었으며, 용수(water)는 8.67~14.67 CFU/$m{\ell}$ 검출되었다. 하지만 자외선살균공정 이후, 모든 시료는 법적기준치인 $10^5\;CFU/m{\ell}$이하로 검출되었다. 식중독균인 E. coil, E. coli O157:H7, B. cereus, L. monocytogenes, Salmonella spp, Staph. aureus 실험결과, 보관공정에서 E.coli는 자외선 살균 전단계 공정까지 검출되었으며, B. cereus는 1차세척까지 일부 검출되었다. 모든 세균 및 진균류는 주원료에서 많이 검출되고 있어 주원료의 초기 균수를 최소화하는 선행관리방법을 수립할 필요가 있으며, 세균수와 황색포도상구균 등의 교차 오염방지를 위한 제조설비 등의 효과적인 세척 소독방법을 수립할 필요가 있다고 사료된다. 상기 결과을 바탕으로 유산균을 함유한 녹즙류의 일반세균 및 식중독균을 감소 또는 제거할 수 있는 중요한 공정으로 UV살균공정이 CCP로 관리되어야 한다. 따라서 자외선살균공정의 관리기준 및 이탈시 조치방법, 검증방법, 교육 훈련과 기록관리 등 철저한 HACCP 계획이 필요하다고 사료된다.
신선편이식품 소재인 유기농산물의 미생물 분포와 품질을 평가하기 위해서 풋고추, 상추, 토마토, 사과, 배, 쌀 등의 농산물을 47개 지역에서 관행농 농산물과 동시에 현장에서 시료를 수집하였다. 일반 세균수로는 유기농 고추가 평균 4.07 log CFU/g, 관행농 고추는 3.71 log CFU/g 검출되었고 상추는 유기농, 관행농에서 6.76-6.90 log CFU/g로 분석되었다. 토마토와 사과는 2종류 시료에서 각각 2.08-2.92 log CFU/g, 0.70-0.82 log CFU/g로 검출되었다. 쌀도 유기농과 관행농 시료에서 2.92-2.98 log CFU/g 범위의 세균분포를 보여주었으나 유기농 배에서는 4.48 log CFU/g, 관행농 배는 2.84 log CFU/g의 분포도를 보여 주었다. 분석시료에 따라 미생물의 분포에 많은 차이를 보여 주었으며 유기농과 관행농산물의 미생물분포는 거의 차이가 없었다. 병원성 세균인 Cl. perfringens, E. coli O157:H7, L. monocytogenes, Salmonella, S. aureus은 전혀 검출되지 않았다. 그러나 유기농산물 2개(4%)와 관행농산물 3개(6%)에서 E. coil가 1.7 log CFU/g으로 검출되었고 B. cereus는 유기농 6개(13%)가 1.97 log CFU/g수준으로, 관행농 11개(23%)에서 1.04 log CFU/g 수준으로 검출되었다. 그러므로 유기농산물과 관행농산물에서의 일반세균과 병원성 세균의 오염정도는 차이가 거의 없고 이들 병원성 미생물의 오염수준도 비교적 낮아 안전한 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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