The effect of protein kinase C inhibitors, sturosporine and 1-(5-isoquinolinyl sulfonyl)-2-methyl piperazine(H7) on in vitro differentiation of erythroid progenitor cells which were isolated from spleens of mice infected with the anemia-inducing strain of Friend virus were examined. Erythropoietin-mediated differentitation of erythroid progenitor cells, as determined by the incorporation of $^{59}Fe$ into protoporphyrin, was inhibited by staurosporine and H7 in a concentration -dependent manner. Scatchard analysis of the $^3H-phorbol-12$, 13-dibutyrate binding to erythroid progenitor cells revealed that at the high affinity sites the dissociation constant was 22nM and the maximum number of $^3H-phorbol-12$, 13-dibutyrate binding to erythroid progenitor cells revealed that at the high affinity sites the dissociation constant was 22nM and the maximum number of $^3H-phorbol-12$, 13-dibutyrate binding sites per cell was approximately $3.7\times10^5$. Cytosonic protein kinase C was isolated from erthroid progenitor cells and then purified by sequential column chromatogrphy. Two isoforms of protein kinase C were found. Photoaffinity labeling of the purified protein kinase C samples with $^3H-phorbol-12$12-myristate 13-acetate followed by analysis of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and autofluorography showed radiolabeled 82-KDa pepticles. Rediolabeling of the 82-KDa peptides with $^3H-phorbol-12$myristate 13-acete was almost completely blocked by excess unlabeled phorbol 12-myristate 13-acetate was almost 12-muristate 13-acetate-promoted phosphorylation with the puyrified protein kinase C samples showed that the phosphorylation of 82-KDa peptides was increased as the concentration of phorbol 12-myristate 13-acetate was increased from $10^{-8}M{\;}to{\;}10^{-4}$M. In light of the findings that erythroid progenitor cells possessed an abundance of protein kinase C and that stauroporine and H7 inhibited erythroid differentiation, it seemed likely that protein kinase C would play a role in the erythroid progenitor cell development.
A theory of the helix/coil transition for $\alpha$ helical dimer such as $\alpha$ tropomycin and paramycin is developed. The treatment differs from those formulated previously for oligopeptide dimer which is explained by the matrix method using Zimm-Bragg parameter: In the present treatement, it is explained by the zipper model which can account for the dangling H-bond. We calculate the fractional helicity in $\alpha$ helical dimer as a function of helix initiation $constant(\sigma)$, helix stability constant(${\xi}$) and hydrophobic interaction parameter(w). For $\alpha$ tropomycin, the helix stability profile is also calculated. The transitions of this oligomer due to the change of temperature and the concentration of oligopeptide involve simultaneous dissociation of the dimer. The transitions of dimers which have cross-linked S-S bonds or have long chains don't occur, because they keep always helical structures. The transitons due to the concentration of the oligopeptides are steeper than those due to the chain length or temperature.
The solubilities of n-propyl bromide in nitrobenzene and in 1,2,4-trichlorobenzene have been measured at 19, 25 and $40^{\circ}C$ in the presence and absence of gallium bromide. When gallium bromide does not exist in the system, the solubility of n-propyl bromide in nitrobenzene is greater than in 1,2,4-trichlorobenzene, indicating a stronger interaction of n-propyl bromide with nitrobenzene than with 1,2,4-trichlorobenzene. In the presence of gallium bromide, 1: 1 complex $n-C_3H_7Br\cdotGaBr_3$ is formed in the solution. The instability constant K of the complex was evaluated. $$n-C_3H_7Br\cdotGaBr_3 \rightleftarrows n-C_3H_7Br + \frac{1}{2Ga_2Br_6 }$$The change of enthalpy, free energy and entropy for the dissociation of the complex were also calculated. It seems that the stabilities of the complex, gallium bromide with alkyl bromide, are relatively concerned with the stabilities of the alkyl ion.
The solubilities of n-butyl bromide in nitrobenzene and in 1,2,4-trichlorobenzene have been measured at $19^{\circ},\;25^{\circ},\;and\;40^{\circ}C$ in the presence and absence of gallium bromide. When gallium bromide does not exist in the system, the solubility of n-butyl bromide in nitrobenzene is greater than in 1,2,4-trichlorobenzene, indicating a stronger interaction of n-butyl bromide with nitrobenzene than with 1,2,4-trichlorobenzene. In the presence of gallium bromide, complex of n-butyl bromide with gallium bromide, 1:1 complex, $n-C_4H_9Br{\cdot}GaBr_3$, is formed in the solution. The instability constant K of the complex was evaluated. $n-C_4H_9Br{\cdot}GaBr_3{\rightleftharpoons}n-C_4H_9Br+\frac{1}{2}Ga_2Br_6$ The changes of enthalpy, free energy and entropy for the dissociation of the complex were also calculated.
Bovine angiogenin (bAng) is a potent blood vessel inducing protein purified from cow In ilk. fluorescence spectroscopy has been used to study the interaction of bAng with actin in 50 mM Tris-HCl pH 7.5, and 1 mM $CaCl_2$ at $25^{\circ}C$. Actin contains four tryptophans but bAng contains no tryptophans. A 50% decrease in intrinsic fluorescence accompanied formation of the bAng/actin complex. By contrast, the interaction of RNase A, a homologous protein to bAng, with actin results in about 10% quenching of the fluorescence. Fluorescence titration experiments were performed by adding increasing concentrations of bAng (0~1.0 ${\mu}M$) to a constant concentration of actin (0.1 ${\mu}M$), and the dissociation constant $K_d$ for the bAng/actin complex and the stoichiometry n were measured as $20{\pm}1$ nM and $1.0{\pm}0.1$ respectively. These results suggest that the interaction between bAng with actin is specific and that quenching of actin fluorescence has occurred in the bAng/actin complex. The bAng binding sites of actin are discussed in the results of this study, and we propose that Trp-80 in the small domain of bovine actin is responsible for the bAng/actin binding.
Antimuscarinic agent like antispasmodic actions of licorice alkaloidal fraction, obtained from the Glycyrrhiza glabra L., was compared with that of atropine quantitatively. For this purpose, the author calculated the kinetic constants and $ED_{50}$ for acetylcholine antagonism by these drugs on rat ileum and guinea-fig ileum longitudinal muscle according to Paton's theoretical equations describing the combination of an antagonist drug with its receptors. The results are as follows. 1. On rat ileum. a) Licorice alkaloidal fraction $K_1$ (association rate constant)=$4.078{\times}10^2\;(s^{-1}\;gm^{-1}\;ml)$$K_2$ (dissociation rate constant)=$6.986{\times}10^{-4}\;(s^{-1})$$ED_{50}(K_2/K_1)=1.772{\times}10^{-6}(gm/ml)$ b) Atropine $K_1=5.136{\times}10^6$, $K_2=7.714{\times}10^{-4}$, $ED_{50}=1.408{\times}10^{-10}$ 2. On guinea-pig ileum longitudinal muscle a) Licorice alkaloidal fraction $K_1=1.30{\times}10^2$, $K_2=1.25{\times}10^{-3}$$ED_{50}=9.58{\times}10^{-6}$ b) Atropine $K_1=5.75{\times}10^6$, $K_2=1.54{\times}10^{-3}$$ED_{50}=2.68{\times}10^{-10}$ Above results present that 1 r of licorice alkaloidal fraction has equal fotency of acetylcholine antagonism with $8.5{\times}10^{-5}r$ of atropine on rat ileum, $2.8{\times}10^{-5}r$ on guinea-pig ileum longitudinal muscle. This facts suggest that the site and numbers of licorice alkaloid receptors of guinea-pig ileum are different from that of rat ileum. Besides, it also gives a suggestion that licorice alkaloidal fraction may be a partial antagonist on guinea-pig ileum in this experimental conditions.
The kinetic and equilibrium characteristics of copper extraction by salicylaldoxime in chloroform and benzene were investigated. Equilibrium constants such as dissociation constant, distribution coefficient of salicylaldoxime and stability constant, distribution coefficient and molar extinction coefficient of oxime-Cu chelate were determined from absorbance. Extracted species of Cu-chelate were found to be ${\bar{CuR_2}}$. Overall initial extraction rate of copper by salicylaldoxime in chloroform was expressed by the following equation : $R=k[Cu^{2+}]{\bar{[HR]}}^{0.5}/[H^+]^{0.4}$.
Min Soo Cho;Hyoung Ryun Park;Soon Ki Rhee;Kye Soo Lee;Bon Su Lee
Journal of the Korean Chemical Society
/
v.35
no.3
/
pp.196-203
/
1991
The $pK_a$ values of benzoic acid and meta, para-halogen substituted benzoic acids in MeOH-$H_2O$ mixtures (0∼80% of MeOH) have been determined at 25$^{\circ}$C using a conductometric method on the basis of the Fuoss-Kraus equation, and further verified using modified conductometric method of Gelb. The dependence of $pK_a$ on halogen substituents has been discussed in terms of substituent-constant (${\sigma}$), which is devided into electron-withdrawing inductive contribution (${\sigma}_1$) and electron-donating ${\pi}$-resonance one (${\sigma}_R$). The linear-dependence of ${\sigma}_1$'s on $D^{-1}$ with positive slope and that of ${\sigma}_R$'s on $D^{-1}$ with negative slope have been interpreted on the basis of field effect and through-space interaction of ${\pi}$-lone pair of halogen substituent and ionization center via ${\pi}$-system of benzene ring.
The solubilities of i-propyl bromide in nitrobenzene have been measured at 10$^{\circ}$, 19$^{\circ}$ and 25$^{\circ}C$ in the presence and absence of gallium bromide. In the presence of gallium bromide, 1 : 1 complex, i-C$_3$H$_7Br{\cdot}GaBr_3$ is formed in the solution. The instability constant K of the complex formation was evaluated from the following equilibrium equation: i-C$_3$H$_7Br{\cdot}GaBr_3$${\rightleftharpoons}$ i-C$_3$H$_7$Br + $\frac{1}{2}$$Ga_2Br_6$. The change of enthalpy, free energy and entropy for the dissociation of the complex were also calculated. From these result, it seems that the stabilities of the complex formation, gallium bromide with alkyl bromide, are directly related with those of the carbonium ions of alkyl bromide.
Tyrosinase is a widespread enzyme with great promising capabilities. The Lineweaver-Burk plots of the catecholase reactions showed that the kinetics of mushroom tyrosinase (MT), activated by $Co^{2+}$ and $Zn^{2+}$ at different pHs (6, 7, 8 and 9) obeyed the non-essential activation mode. The binding of metal ions to the enzyme increases the maximum velocity of the enzyme due to an increase in the enzyme catalytic constant ($k_{cat}$). From the kinetic analysis, dissociation constants of the activator from the enzyme-metal ion complex ($K_a$) were obtained as $5{\times}10^4M^{-1}$ and $8.33{\times}10^3M^{-1}$ for $Co^{2+}$ and $Zn^{2+}$ at pH 9 and 6 respectively. The structural analysis of MT through circular dichroism (CD) and intensive fluorescence spectra revealed that the conformational stability of the enzyme in these pHs reaches its maximum value in the presence of each of the two metal ions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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