The objective of this study was to examine the effect of thymidine treatment during $in$$vitro$ maturation (IVM) of porcine follicular oocytes on blastocyst development. Porcine oocytes were treated with thymidine (10 mM, 20 mM and 30 mM) for 2 or 6 hr in the preiods of IVM I and/or II. The survival rates of the blastocysts in the 6 hr treatment groups of 10 mM and 20 mM during IVM I period were significantly higher than those of control group ($p$<0.05). However, the survival rate of the blastocysts in the 2 hr treatment group of 20 mM during IVM II period was significantly higher than control group ($p$<0.05). Furthermore, the survival rate of the blastocysts in the 6 hr treatment group of 30 mM during IVM II period was significantly lower than control group ($p$<0.05). Consistent with the previous result, blastocyst development of both IVM I and II treatment group was also showed as similar pattern. Total and apoptotic cell numbers of blastocysts derived from thymidine treated porcine oocytes were examined by using Tunel assay. The results showed that there was no significant differences in total cell number of blastocysts between thymidine treated and untreated groups. However, apoptosis-positive cells in the thymidine treated group (6 hr IVM I) were significantly lower than those of other groups ($p$<0.05). Taken together, these results indicate that high quality oocytes were selected by DNA synthesis mechanism according to high concentration thymidine treatment during porcine oocyte maturation. Therefore, we concluded that presumptive selected oocytes by thymidine treatment during maturation periods improved the further embryo development and embryonic quality of IVF embryos by decreasing the incidence of apoptosis in preimplantation porcine embryos.
The objective of this study was to examine the effect of macromolecule in a maturation medium on nuclear maturation, intracellular glutathione (GSH) level of oocytes, and embryonic development after parthenogenetic activation (PA) and somatic cell nuclear transfer (SCNT) in pigs. Immature pig oocytes were cultured in maturation medium that was supplemented with each polyvinyl alcohol (PVA), pig follicular fluid (pFF) or newborn calf serum (NBCS) during the first 22 h and the second 22 h. Oocyte maturation was not influenced by the source of macromolecules during in vitro maturation (IVM). Embryo cleavage and cell number in blastocyst after PA was altered by the source of macromolecule but no difference was observed in blastocyst formation among treatments. Oocytes matured in PVA-PVA medium showed lower rates of oocyte-cell fusion (70.4% vs. 77${\sim}$82%) and embryo cleavage (75% vs. 86${\sim}$90%) after SCNT than those matured in other media but blastocyst formation was not altered (13${\sim}$27%) by different macromolecules. pFF added to IVM medium significantly increased the intracellular GSH level of oocytes compared to PVA and NBCS, particularly when pFF was supplemented during the first 22 h of IVM. Our results demonstrate that source of macromolecule in IVM medium influences developmental competence of oocytes after PA and SCNT, and that pFF supplementation during the early period (first 22 h) of IVM increases intracellular GSH level of oocytes.
Kim, Eun-Kyung;Kim, Eun-Ha;Kim, Eun-Ah;Lee, Kyung-Ah;Shin, Ji-Eun;Kwon, Hwang
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제42권1호
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pp.22-29
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2015
Objective: Sperm must be properly prepared in in vitro fertilization (IVF)-embryo transfer (ET) programs in order to control the fertilization rate and ensure that embryos are of high quality and have appropriate developmental abilities. The objective of this study was to determine the most optimal sperm preparation method for IVF. Methods: Patients less than 40 years of age who participated in a fresh IVF-ET cycle from November 2012 to March 2013 were included in this study. Poor responders with less than three mature oocytes were excluded. Ham's F-10 medium or sperm-washing medium (SWM) was used in combination with the density-gradient centrifugation/swim-up (DGC-SUP) or SUP methods for sperm preparation. A total of 429 fresh IVF-ET cycles were grouped according to the media and methods used for sperm preparation and retrospectively analyzed (DGC-SUP/Ham's F-10, n=82; DGC-SUP/SWM, n=43; SUP/Ham's F-10, n=181; SUP/SWM, n=123). Results: There were no significant differences among these four groups with respect to the mean age of the female partners, duration of infertility, number of previous IVF cycles, and retrieved oocytes. We determined that both the DGC-SUP and SUP methods for sperm preparation from whole semen, using either Ham's F-10 or SWM media, result in comparable clinical outcomes, including fertilization and pregnancy rates. Conclusion: We suggest that both media and both methods for sperm preparation can be used for selecting high-quality sperm for assistive reproductive technology programs.
모성 및 부성 genome의 기능을 알아보기 위하여 미세조작기법과 Sendai virus를 이용한 핵융합 기술을 이용하여 2개의 자성전핵만으로 구성된 2배체의 gynogenetic 수정란을 그리고 2개의 웅성전핵만으로 구성된 2배체의 androgenetic 수정란을 인위적으로 작출하였다. 이들의 작출효율은 biparental 수정란에서는 56%, gynogenetic 수정란에서는 50% 그리고 androgenetic 수정란에서는 56% 이었다. 이들을 체외에서 배양한 결과 gynogenetic 및 androgenetic 수정란은 2-세포기 이후에는 biparental 및 intact 수정란에 비하여 그 발달능이 매우 저조하였으나 이들 중 25% 이상이 포배까지 발달한 수 있음을 확인하였다. Gynogenetic 및 androgenetic 수정란을 동기화된 수란생쥐의 난관내에 이식하였던 바, androgenetic 수정란은 전혀 착상 되지 않았으나, gynogenetic 수정란에서는 착상이 확인되었다. 핵이식기법으로 인위조작된 2배체의 biparental 수정란으로부터 28마리의 생쥐 신생자를 생산하였다.
The objective of this study was to understand the major changes of craniofacial dimensions and spatial growth pattern during the late embryonic and fetal period of human fetures. This study was performed with the selective materials of normal fetuses received from the Registry of Congenital Malformation of Seoul National University Hospital. The specimens consisted of nineteen embryos and sixty-six fetuses. The photomicrographs from mid-segittal sections of embryos were used for angular measurement, and the lateral cephalograms taken with soft X-ray were also measured in liners and angular aspects. All of the anatomical landmarks for the tracing of the photomicrographs and cephalograms were referred to the previous reports on literature. The sequential changes of prenatal craniofacial dimensions and agles were analysed statistically and discussed on the focus about the developmental growth directions of human ore-facial structure arised from heterogeneous origins. The results are as follows, 1) Cranial base angle was almost formed at about 6 weeks old embryos with the average angle of $127.4{\pm}6.33^{\circ}$ (n=3) and it was almost constant onwards. 2) The linear increase rates of anterior cranial base length and anterior facial height exceeded those of the posterior cranial base length and posterior facial height, and the maxilla grows more rapidly on the horizontal dimension than the vertical dmension during the fetal period. 3) The angular relationship between the anterior cranial base and palatal plane decreasedslightly during the fetal period, disclosing $11^{\circ}$ at 12th week gestation and $5^{\circ}$ at 41th weeks gestation. 4) Genial angle was maintained almost constantly at about $130^{\circ}$ during the fetal period from 12 weeks to 41 weeks of gestation.
파밤나방(Spodoptera exigua (H bner)) 유충의 형태적 유전지표를 규명하기 위해 유충의 체색과 줄무늬 변이에 관하여 분석하였다. 유충 체색은 먹이 종류에 따라 다양했다. 유충 줄무늬는 배선과 측선의 존재에 따라 3종류의 형질 개체로 나뉘었다. 3줄무늬(배선과 측선 모두존재), 1줄무늬(배선만존재), 0줄(배선과 측선 모두 없음). 이들 형질이 유전적 영향에 있는지를 조사하기 위해 3줄과 1줄집단으로 집단선발한 결과 각 선발 형질의 비율이 증가했다. 3줄과 1줄집단을 상호교배하였을 때 3줄 형질이 우성을 보였다. 줄무늬 형질에 있어서 협의의 유전력(h$^2$)은 $0.50\pm$0.42로 산출되었다. 0줄집단에서 암컷수가 수컷수에 비해 약2배 많았다. 환경적 요인을 조사하기 위해 동일 집단을 3종류의 먹이에서 사육했을때 인공사료와 상치로 키운 집단간에는 유충줄무늬에는 유의성있는 차이는 없지만 파로 사육된 집단에서는 3줄개체의 비율이 낮아져 차이를 보였다. 이들 유충의 줄무늬는 유충과 용의 발육속도 및 내한성과 연관성을 보였으나 살충제 감수성과는 무관함을 나타냈다.
Journal of the Korean Academy of Child and Adolescent Psychiatry
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제29권3호
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pp.144-148
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2018
Objectives: Previous studies have reported that internet addiction (IA) is associated with attention-deficit/hyperactivity disorder (ADHD) consistently. However, in terms of gender, there are controversial findings. We aimed to investigate the relation between IA and self-acknowledged ADHD traits among female college students in Japan. Methods: The study questionnaire consisted of questions about demographics, Adult ADHD Self-Report Scale-V1.1 Part A (ADHD screener) and Young's Internet Addiction Test (IAT). When four or more items are more frequent than the cut-off on ADHD screener, the subject was categorized into students with a positive ADHD screen. We defined students with total IAT score of 70 and higher as IA. Results: A total number of respondents was 369 (mean age: $19.0{\pm}0.7years$). Seventy-seven subjects were screened positive on ADHD screener (20.9%). Students with a positive ADHD screen scored significantly higher on the IAT ($54.2{\pm}14.2$ vs. $42.5{\pm}11.3$). The rates of IA in students with and without a positive ADHD screen were 18.2% and 1.0%, respectively. Conclusion: Results of this study demonstrated the relation between IA and self-evaluated ADHD traits among female college students in Japan. Appropriate education for students on how to use the internet properly will be necessary to prevent IA.
Objective: This study was carried out to compare the clinical outcome of elective single cleavage-embryo transfer (eSCET) to that of elective single blastocyst-embryo transfer (eSBET) in human IVF-ET. Methods: This study was a retrospective study which analyzed for 614 women who visited the Daegu Maria Clinic from August 2008 to December 2009. All were under 37 years old and had more than 8 mm of endometrial thickness on the day of hCG administration and at least one good quality embryo on day 3. The eSCETs were performed on day 3 (n=450) and the eSBETs were conducted on day 5 (n=164). Results: The numbers of retrieved oocytes, fertilized oocytes, and day 3 good quality embryos were significantly lower in the eSCET group (12.1${\pm}$6.0, 8.2${\pm}$4.6, and 4.2${\pm}$3.1, respectively) compared to the eSBET group (16.7${\pm}$7.2, 12.1${\pm}$5.0, and 8.5${\pm}$4.5, respectively; p<0.001). However, the clinical pregnancy, implantation, on-going pregnancy, and live birth rates of the eSCET group (46.7, 46.9, 40.0, and 36.7%, respectively) were not statistically different from those of the eSBET group (51.2, 51.8, 45.1, and 43.9%, respectively; p=0.318, 0.278, 0.254, and 0.103, respectively). Conclusion: These results suggested that elective single embryo transfer should be performed regardless of the developmental stage to women less than 37 years old who had more than 8 mm of endometrial thickness on the hCG administration day and at least one good quality embryo on day 3 in order to reduce the twin pregnancy rate without reducing the whole pregnancy rate.
Our goal was to examine the effects of early denudation on the enucleation efficiency and developmental competence of embryos following somatic cell nuclear transfer (SCNT) and parthenogenetic activation (PA). Oocytes were denuded following 30 h of in vitro maturation (IVM) and then cultured with (D+) or without (D-) their detached cumulus cells for additional $10{\sim}14$ h. Control oocytes were denuded after $40{\sim}44$ h of IVM. The size of the perivitelline space was larger at 40 h of IVM ($11.7{\sim}11.8{\mu}m$) than at 30 h ($8.9{\mu}m;$ p<0.01). The distances between the metaphase II (M II) plates and the polar bodies (PBs) were shorter in D+ ($19.4{\mu}m$) and D- oocytes ($18.9{\mu}m$) than in control oocytes ($25.5{\mu}m;$ p<0.01). Enucleation rates following blind aspiration at 40 h of IVM were higher (p<0.01) in D+ (92%) and D- oocytes (93%) compared to controls (82%). Early denudation did not affect oocyte maturation or the in vitro development of SCNT and PA embryos. When SCNT embryos from D+ oocytes were transferred to four gilts, pregnancy was established in two pigs, and one of them farrowed three live piglets. In conclusion, early denudation of oocytes at 30 h of IVM could improve the enucleation efficiency by maintaining the M II plate and the PB within close proximity and support the in vivo development of SCNT embryos to term.
These experiments were investigate the effects of bacterial infection of uterus and vagina during bovine embryo transferring on the development of embryo. We examined the distribution of reproductive disordered cow by akind of disease, identified the bacteria isolated from the vagina of those cows and bacterial infectin of media and its treatment with several kinds of antibiotics at that. The results obtained were summarized as follows ; 1. The total 592 reproductive disordered cows were caused by ovarian dysfunction(43.4%), ovary-uterus complication(24.5%), endometrities(17.7%), and repeat breeder(12.0%). 2. The main bacteria among 11 kinds of bacteria(113 colonies) was E. coli(38 colonies, 33.6%). Likewise, E. coli was propotioned to 23 and 22.7% among bacteria from vagina of endometritis and repeat breeder, respectively. 3. The sensitivities of viginal bacteria to pencillin and streptomycin were 6.2 and 4.4% respectively, but those to gentamycin and chloramphenicol were 22.1 and 16.8%, respectively. The similar sensitivities were found in the embryo recovery media. 4. The rates of bacterial infection of recovery medim and that of abnormal development of embryo were 75 and 80%, respectively. 5. The antibiotic sensitivity assay of ova recovery media showed gentamicin and chloramphenicol gave better results than streptomycin and penicillin. 6. The developmental rate of 1-cell stage mice embryos was 34.0% in bacterial infected culture media, but was 40.0, 58.0, 40.0 or 30.0% with the treatment of kanamycin, gentamycin, chloramphenicol, streptomycin, or penicillin, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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