This study was conducted to investigate the effects of in vitro fertilization, culture and embryo development according to in vitro maturation rate, protectant composition and equilibrium time after frozen /thawing of bovine immature oocytes. This results obtained in studies on the effect of different cryoprotectants on the viability, maturation and development of in vitro bovine oocytes were as follow: 1.The post-thawing of immature oocytes matured to metaphase II during culture time for 0 to 26 h, and those group (62~3%) were low than control group (76.7%). The optimal maturation time of frozen-thawed immature oocytes was at 24 h. 2.The viability of cryopreserved immature oocytes was not affected by sort of cryoprotectants. The developmental competence of frozen4hawed oocytes was not affected by cryoprotectants. These results indicate that an optimal maturation time of frozen /thawed immature oocytes was at 24h. Furthermore the viability of cryopreserved immature oocytes was not affected by sort of cryoprotectants and developmental competence of frozen /thawed oocytes.
Learning progression is an advantageous way to describe the development of learner understanding about a topic. In the present study, learning progression is introduced to characterize novice teachers' professional knowledge and competence and to help designing teacher professional development programs in the developmental approach. The development and validation phases of learning progression are proposed in the paper. In addition a case study is presented to demonstrate the process of developing a learning progression for teaching-through-inquiry using ICT. The learning progression in novice teacher professional development can be used to assess the level of teacher understanding in specific topic and to effectively support the development of teachers' professional knowledge and competence via professional development programs in the longitudinal view.
Recent research in usage-based Second Language Acquisition has provided new insights into second language (L2) learners' development of formulaic language (Wulff, 2019). The current study examines the use of phrase-frames, which are recurring sequences of words including one or more variable slots (e.g., it is * that), in written and oral production data from Asian learners of English across four proficiency levels (beginner, low-intermediate, high-intermediate, advanced) and native English speakers. The variability, predictability, and discourse functions of the most frequent 4-word phrase-frames from the written essay and spoken dialogue sub-corpora of the International Corpus Network of Asian Learners of English (ICNALE) were analyzed and then compared across groups and modes. The results revealed that while learners' phrase-frames in writing became more variable and unpredictable as proficiency increased, no clear developmental patterns were found in speaking, although all groups used more fixed and predictable phrase-frames than the reference group. Further, no developmental trajectories in the functions of the most frequent phrase-frames were found in both modes. Additionally, lower-level learners and the reference group used more variable phrase-frames in speaking, whereas advanced-level learners showed more variability in writing. This study contributes to a better understanding of the development of L2 phraseological competence.
Kim, Min-Su;Kim, Chan-Lan;Seong, Hwan-Hoo;Kim, Namtae;Kim, Sung Woo
Journal of Embryo Transfer
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v.32
no.3
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pp.65-71
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2017
The elevated temperature and high humidity has been known as main reason for heat stress on animals and cause detrimental effects on productivity of organisms and physiological conditions of normal bioactivities. The aims of this study were to evaluate the relationship between time of heat shock simulation during in vitro maturation and developmental competence of subsequent embryo after in vitro fertilization. Heat shocked cumulus-oocyte complexes (COCs) of Korean native cattle were subjected to normal conditions for 22, 21, 18 and 12 h respectively and transferred to heat stress inducing condition at $40.5^{\circ}C$ in other incubator for 0 (control), 1 and 4 h. After maturation for 22 h, the oocytes were fertilized and cultured in mSOF media for 8 d and examined the developmental capacity of embryos. There were no differences in maturation and cleavage rates between 0, 1 and 4 h heat socked oocytes, but blastocysts formation were lower in the 4 h heat stressed oocytes. The apoptotic cells of developed blastocysts were also increased in at day 8 with 4 h heat shocked oocytes. These results indicate that heat shock on oocytes during maturation could cause negative effects on the developmental competence of embryos.
Vitrification method is widely used in oocyte cryopreservation for IVF but the birth rates are lower than that of the fresh oocyte. One of the known main reasons is structural instability of meiotic spindle and chromosome systems of mature oocyte. To get the best way for keeping competence of matured oocytes, we studied the best conditions for vitrification focused on equilibration times. The mature oocytes were underwent vitrification with current popular method and analyzed the survival rates, microtubule stability and DNA integrity. The survival rates of recovered oocyte are almost same between groups and are more than 93%. The structural configuration of meiotic spindle was well kept in 10 min equilibration group and the stability rate was almost same with that of control. The chromosomal breakdown was observed in all experimental groups, but the chromosomal stability was higher in 10 min equilibration group than the other groups. The 10 min equilibration group showed best condition compared with the other groups. Based on these results, the equilibration time is one of the key factors in successful keeping for competence of mature oocyte. Although, more fine analysis about the effects of physical stress on oocyte during vitrification is needed to define the optimal condition, it is suggested that the optimal equilibration time to get competent oocyte in mouse is 10 min. Information acquired this study may provide insight into intracellular structural events occurring in human oocytes after vitrification and application for cryopreservation of human oocyte.
Ryu, Eun Kyung;Hur, Yong Soo;Ann, Ji Young;Maeng, Ja Young;Park, Miji;Park, Jeong Hyun;Yoon, Jung;Yoon, San Hyun;Hur, Chang Young;Lee, Won Don;Lim, Jin Ho
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.39
no.4
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pp.153-160
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2012
Objective: The aim of this study was to compare vitrification optimization of mouse embryos using electron microscopy (EM) grid, cryotop, and thin plastic strip (TPS) containers by evaluating developmental competence and apoptosis rates. Methods: Mouse embryos were obtained from superovulated mice. Mouse cleavage-stage, expanded, hatching-stage, and hatched-stage embryos were cryopreserved in EM grid, cryotop, and TPS containers by vitrification in 15% ethylene glycol, 15% dimethylsulfoxide, 10 ${\mu}g/mL$ Ficoll, and 0.65 M sucrose, and 20% serum substitute supplement (SSS) with basal medium, respectively. For the three groups in which the embryos were thawed in the EM grid, cryotop, and TPS containers, the thawing solution consisted of 0.25 M sucrose, 0.125 M sucrose, and 20% SSS with basal medium, respectively. Rates of survival, re-expansion, reaching the hatched stage, and apoptosis after thawing were compared among the three groups. Results: Developmental competence after thawing of vitrified expanded and hatching-stage blastocysts using cryotop and TPS methods were significantly higher than survival using the EM grid (p<0.05). Also, apoptosis positive nuclei rates after thawing of vitrified expanded blastocysts using cryotop and TPS were significantly lower than when using the EM grid (p<0.05). Conclusion: The TPS vitrification method has the advantages of achieving a high developmental ability and effective preservation.
Jo, Jun Woo;Jee, Byung Chul;Suh, Chang Suk;Kim, Seok Hyun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.40
no.4
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pp.148-154
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2013
Objective: To compare the mouse oocyte vitrification outcomes of the CryoLogic vitrification method (CVM) and the conventional open method using a Cryotop. Two CVM methods (original CVM and modified CVM) were tested. Methods: Mature oocytes obtained from female BDF-1 mice were vitrified by two-step exposure to equilibrium and vitrification solutions. Three vitrification protocols were tested on three groups: the CVM-kit, modified CVM, and Cryotop groups. After exposure to the two solutions, the oocytes were vitrified. After warming, the oocytes were fertilized in vitro, and the embryo development was assessed. Blastomeres positive for caspase were counted using an in situ assay kit. The spindle morphology and chromosome configurations of warmed vitrified oocytes were also assessed. Results: The modified CVM and Cryotop groups showed similar developmental capacities, and similar proportions of cells with intact spindles and chromosome configurations. The modified CVM protocol was superior to the original CVM protocol for developmental competence and intact spindle preservation. However, the CVM group showed a relatively higher number of apoptotic cells in blastocysts. Conclusion: Closed vitrification using the modified CVM protocol may be used as an alternative to the conventional open method, but strategies to decrease apoptosis in the blastomere need to be investigated.
Park, Kyu-Mi;Kim, Kyu-Jun;Jin, Minghui;Han, Yongquan;So, Kyoung-Ha;Hyun, Sang-Hwan
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.32
no.12
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pp.1844-1853
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2019
Objective: We investigated how pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) affects embryonic development during pre-in vitro maturation (pre-IVM) using porcine oocytes isolated from small follicles. Methods: We divided the follicles into the experimental groups by size (SF, small follicles; MF, medium follicles) and treated with and without PACAP and cultured for 18 hours (PreSF[-]PACAP; without PACAP, Pre-SF[+]PACAP; with PACAP) before undergoing IVM. The gene expression related to extracellular matrix formation (amphiregulin, epiregulin, and hyaluronan synthase 2 [HAS2]) and apoptosis (Bcl-2-associated X [BAX], B-cell lymphoma 2, and cysteine-aspartic acid protease 3) was investigated after maturation. The impact on developmental competence was assessed by the cleavage and blastocyst rate and total cell number of blastocysts in embryos generated from parthenogenesis (PA) and in vitro fertilization (IVF). Results: Cleavage rates in the Pre-SF(+)PACAP after PA were significantly higher than SF and Pre-SF(-)PACAP (p<0.05). The cleavage rates between MF and Pre- SF(+)PACAP groups yielded no notable differences after IVF. Pre-SF(+)PACAP displayed the higher rate of blastocyst formation and greater total cell number than SF and Pre-SF(-)PACAP (p<0.05). Cumulus cells showed significant upregulation of HAS2 mRNA in the Pre-SF(+)PACAP compared to the SF (p<0.05). In comparison to other groups, the Pre-SF(+)PACAP group displayed a downregulation in mRNA expression of BAX in matured oocytes (p<0.05). Conclusion: The PACAP treatment during pre-IVM improved the developmental potential of porcine oocytes derived from SF by regulating cumulus expansion and apoptosis of oocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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