Lee, Myungook;Ahn, Jong Il;Lee, Ah Ran;Ko, Dong Woo;Yang, Woo Sub;Lee, Gene;Ahn, Ji Yeon;Lim, Jeong Mook
Molecules and Cells
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제40권8호
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pp.558-566
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2017
Regular monitoring on experimental animal management found the fluctuation of ART outcome, which showed a necessity to explore whether superovulation treatment is responsible for such unexpected outcome. This study was subsequently conducted to examine whether superovulation treatment can preserve ultrastructural integrity and developmental competence of oocytes following oocyte activation and embryo culture. A randomized study using mouse model was designed and in vitro development (experiment 1), ultrastructural morphology (experiment 2) and functional integrity of the oocytes (experiment 3) retrieved after PMSG/hCG injection (superovulation group) or not (natural ovulation; control group) were evaluated. In experiment 1, more oocytes were retrieved following superovulation than following natural ovulation, but natural ovulation yielded higher (p < 0.0563) maturation rate than superovulation. The capacity of mature oocytes to form pronucleus and to develop into blastocysts in vitro was similar. In experiment 2, a notable (p < 0.0186) increase in mitochondrial deformity, characterized by the formation of vacuolated mitochondria, was detected in the superovulation group. Multivesicular body formation was also increased, whereas early endosome formation was significantly decreased. No obvious changes in other microorganelles, however, were detected, which included the formation and distribution of mitochondria, cortical granules, microvilli, and smooth and rough endoplasmic reticulum. In experiment 3, significant decreases in mitochondrial activity, ATP production and dextran uptake were detected in the superovulation group. In conclusion, superovulation treatment may change both maturational status and functional and ultrastuctural integrity of oocytes. Superovulation effect on preimplantation development can be discussed.
Kim, Eun-Jung;Kim, Hyung Joon;Baik, Seong Wan;Kim, Kyung-Hoon;Ryu, Sie Jeong;Kim, Cheul-Hong;Shin, Sang-Wook
Journal of Dental Anesthesia and Pain Medicine
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제18권6호
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pp.349-359
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2018
Background: Propofol is an intravenous anesthetic which has antioxidant effects due to its similarity in molecular structure to ${\alpha}$-tocopherol. It has been reported that ${\alpha}$-tocopherol increases osteoclast fusion and bone resorption. Here, we investigated the effects of propofol on signaling pathways of osteoclastogenic gene expression, as well as osteoclastogenesis and bone resorption using bone marrow-derived macrophages (BMMs). Methods: BMMs were cultured with macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) alone or M-CSF plus receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) in the presence of propofol ($0-50{\mu}M$) for 4 days. Mature osteoclasts were stained for tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) and the numbers of TRAP-positive multinucleated osteoclasts were counted. To examine the resorption activities of osteoclasts, a bone resorption assay was performed. To identify the mechanism of action of propofol on the formation of multinucleated osteoclasts, we focused on dendritic cell-specific transmembrane protein (DC-STAMP), a protein essential for pre-osteoclastic cell fusion. Results: Propofol increased the formation of TRAP-positive multinucleated osteoclasts. In addition, the bone resorption assay revealed that propofol increased the bone resorption area on dentin discs. The mRNA expression of DC-STAMP was upregulated most strongly in the presence of both RANKL and propofol. However, SB203580, a p38 inhibitor, significantly suppressed the propofol/RANKL-induced increase in mRNA expression of DC-STAMP. Conclusion: We have demonstrated that propofol enhances osteoclast differentiation and maturation, and subsequently increases bone resorption. Additionally, we identified the regulatory pathway underlying osteoclast cell-cell fusion, which was enhanced by propofol through p38-mediated DC-STAMP expression.
Jessica Emanuella Rocha Paz;Priscila Oliveira Costa;Albert Alexandre Costa Souza;Ingrid Macedo de Oliveira;Lucas Fernandes Falcao;Carlos Alberto Monteiro Falcao;Maria Angela Area Leao Ferraz;Lucielma Salmito Soares Pinto
Restorative Dentistry and Endodontics
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제46권4호
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pp.48.1-48.10
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2021
Objectives: This study aimed to evaluate the effects on bone repair of different concentrations of mineral trioxide aggregate (MTA) added to AH Plus. Materials and Methods: Bone tissue reactions were evaluated in 30 rats (Rattus norvegicus) after 7 and 30 days. In the AH + MTA10, AH + MTA20, and AH + MTA30 groups, defects in the tibiae were filled with AH Plus with MTA in proportions of 10%, 20% and 30%, respectively; in the MTA-FILL group, MTA Fillapex was used; and in the control group, no sealer was used. The samples were histologically analyzed to assess bone union and maturation. The Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were performed for multiple pairwise comparisons (p ≤ 0.05). Results: At the 7-day time point, AH + MTA10 was superior to MTA-FILL with respect to bone union, and AH + MTA20 was superior to MTA-FILL with respect to bone maturity (p < 0.05). At the 30-day time point, both the AH + MTA10 and AH + MTA20 experimental sealers were superior not only to MTA-FILL, but also to AH + MTA30 with respect to both parameters (p < 0.05). The results of the AH + MTA10 and AH + MTA20 groups were superior to those of the control group for both parameters and experimental time points (p < 0.05). Conclusions: The results suggest the potential benefit of using a combination of these materials in situations requiring bone repair.
Purpose: Deproteinized bovine bone or synthetic hydroxyapatite are 2 prevalent bone grafting materials used in the clinical treatment of peri-implant bone defects. However, the differences in bone formation among these materials remain unclear. This study evaluated osteogenesis kinetics in peri-implant defects using 2 types of deproteinized bovine bone (Bio-Oss® and Bio-Oss/Collagen®) and 2 types of synthetic hydroxyapatite (Apaceram-AX® and Refit®). We considered factors including newly generated bone volume; bone, osteoid, and material occupancy; and bone-to-implant contact. Methods: A beagle model with a mandibular defect was created by extracting the bilateral mandibular third and fourth premolars. Simultaneously, an implant was inserted into the defect, and the space between the implant and the surrounding bone walls was filled with Bio-Oss, Bio-Oss/Collagen, Apaceram-AX, Refit, or autologous bone. Micro-computed tomography and histological analyses were conducted at 3 and 6 months postoperatively (Refit and autologous bone were not included at the 6-month time point due to their rapid absorption). Results: All materials demonstrated excellent biocompatibility and osteoconductivity. At 3 months, Bio-Oss and Apaceram-AX exhibited significantly greater volumes of formation than the other materials, with Bio-Oss having a marginally higher amount. However, this outcome was reversed at 6 months, with no significant difference between the 2 materials at either time point. Apaceram-AX displayed notably slower bioresorption and the largest quantity of residual material at both time points. In contrast, Refit had significantly greater bioresorption, with complete resorption and rapid maturation involving cortical bone formation at the crest at 3 months, Refit demonstrated the highest mineralized tissue and osteoid occupancy after 3 months, albeit without statistical significance. Conclusions: Overall, the materials demonstrated varying post-implantation behaviors in vivo. Thus, in a clinical setting, both the properties of these materials and the specific conditions of the defects needing reinforcement should be considered to identify the most suitable material.
Background: The structure and function of bone tissue is maintained through a constant remodeling process, which is maintained by the balance between osteoblasts and osteoclasts. The failure of bone remodeling can lead to pathological conditions of bone structure and function. Remifentanil is currently used as a narcotic analgesic agent in general anesthesia and sedation. However, the effect of remifentanil on osteoclasts has not been studied. Therefore, we investigated the effect of remifentanil on pre-osteoclast (pre-OCs) differentiation and the mechanism of osteoclast differentiation in the absence of specific stimulus. Methods: Pre-OCs were obtained by culturing bone marrow-derived macrophages (BMMs) in osteoclastogenic medium for 2 days and then treated with various concentration of remifentanil. The mRNA expression of NFATc1 and c-fos was examined by using real-time PCR. We also examined the effect of remifentanil on the osteoclast-specific genes TRAP, cathepsin K, calcitonin receptor, and DC-STAMP. Finally, we examined the influence of remifentanil on the migration of pre-OCs by using the Boyden chamber assay. Results: Remifentanil increased pre-OC differentiation and osteoclast size, but did not affect the mRNA expression of NFATc1 and c-fos or significantly affect the expression of TRAP, cathepsin K, calcitonin receptor, and DC-STAMP. However, remifentanil increased the migration of pre-OCs. Conclusions: This study suggested that remifentanil promotes the differentiation of pre-OCs and induces maturation, such as increasing osteoclast size. In addition, the increase in osteoclast size was mediated by the enhancement of pre-OC migration and cell fusion.
태아형성 시기에 투여된 불소가 법랑모세포의 법랑질형성과정에 미치는 효과를 알아보고자 생후 11일 된 흰쥐의 하악 절치를 대상으로 대조군과 두 그룹의 실험군으로 나누어 실험하였다. 전자현미경을 이용한 형태학적 분석결과, 흰쥐태아 치아기의 조직학적 구성은 전분비대, 분비대 및 성숙대로 관찰되었으며 특히 성숙대에서는 법랑질에서 물과 유기물질을 선택적으로 제거하는 평탄끝 법랑모세포(smooth-ended ameloblast)와 무기이온을 추가로 공급하는 주름끝 법랑모세포(ruffle-ended ameloblast)가 관찰되었다. 이러한 조직학적 구성은 흰쥐태아에서도 성체에서 관찰되는 구조들과 동일한 것으로 확인되었다. 한편, 법랑모세포의 전환주기를 알아보기 위한 형광물질(calcein)을 이용한 검사결과, 전환주기가 대조군에 비하여 실험군에서 평균 1회가 감소되었는데 불소농도가 증가할수록 평탄끝 법랑모세포의 두께는 감소하는 양상을 나타내었다. 또한 대조군에 비해 실험군에서 시상총길이에 대한 주름끝 법랑모세포의 두께 비율보다 평탄끝 법랑모세포의 두께 비율이 증가함을 볼 수 있었다. 그리고 치아의 총길이에 있어서 100 ppm 불소투여군은 대조군과 유사하였으나 200 ppm 불소투여군에서는 다소 짧아지는 경향을 나타내었다. 그리고 실험군의 평탄끝 법랑모세포의 두께와 주름끝 법랑모세포의 두께가 절단연으로 갈수록 좁아지는 경향을 띄었고 성숙대의 길이도 절단연으로 갈수록 짧아지는 양상을 나타내었다. 따라서 대조군에 비해 실험군에서 불소투여 농도가 높아짐에 따라 전환주기가 감소되고 이것은 치아의 총길이도 감소하게 되어, 결국 치아성장을 저해함을 확인하였다.
Background: Reactive oxygen species play critical roles in homeostasis and cell signaling. Dexmedetomidine, a specific agonist of the ${\alpha}2$-adrenoceptor, has been commonly used for sedation, and it has been reported to have a protective effect against oxidative stress. In this study, we investigated whether dexmedetomidine has a protective effect against $H_2O_2$-induced oxidative stress and the mechanism of $H_2O_2$-induced cell death in normal human fetal osteoblast (hFOB) cells. Methods: Cells were divided into three groups: control group-cells were incubated in normoxia without dexmedetomidine, hydrogen peroxide ($H_2O_2$) group-cells were exposed to $H_2O_2$ ($200{\mu}M$) for 2 h, and Dex/$H_2O_2$ group-cells were pretreated with dexmedetomidine ($5{\mu}M$) for 2 h then exposed to $H_2O_2$ ($200{\mu}M$) for 2 h. Cell viability and apoptosis were evaluated. Osteoblast maturation was determined by assaying bone nodular mineralization. Expression levels of bone-related proteins were determined by western blot. Results: Cell viability was significantly decreased in the $H_2O_2$ group compared with the control group, and this effect was improved by dexmedetomidine. The Hoechst 33342 and Annexin-V FITC/PI staining revealed that dexmedetomidine effectively decreased $H_2O_2$-induced hFOB cell apoptosis. Dexmedetomidine enhanced the mineralization of hFOB cells when compared to the $H_2O_2$ group. In western blot analysis, bone-related protein was increased in the Dex/$H_2O_2$ group. Conclusions: We demonstrated the potential therapeutic value of dexmedetomidine in $H_2O_2$-induced oxidative stress by inhibiting apoptosis and enhancing osteoblast activity. Additionally, the current investigation could be evidence to support the antioxidant potential of dexmedetomidine in vitro.
Kim, Eun-Jung;Choi, In-Seok;Yoon, Ji-Young;Park, Bong-Soo;Yoon, Ji-Uk;Kim, Cheul-Hong
Journal of Dental Anesthesia and Pain Medicine
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제16권1호
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pp.39-47
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2016
Background: Oxidative stress occurs during the aging process and other conditions such as bone fracture, bone diseases, and osteoporosis, but the role of oxidative stress in bone remodeling is unknown. Propofol exerts antioxidant effects, but the mechanisms of propofol preconditioning on oxidative stress have not been fully explained. Therefore, the aim of this study was to evaluate the protective effects of propofol against $H_2O_2$-induced oxidative stress on a human fetal osteoblast (hFOB) cell line via activation of autophagy. Methods: Cells were randomly divided into the following groups: control cells were incubated in normoxia (5% $CO_2$, 21% $O_2$, and 74% $N_2$) without propofol. Hydrogen peroxide ($H_2O_2$) group cells were exposed to $H_2O_2\;(200{\mu}M)$ for 2 h, propofol preconditioning (PPC)/$H_2O_2$ group cells were pretreated with propofol then exposed to $H_2O_2$, 3-methyladenine (3-MA)/PPC/$H_2O_2$ cells were pretreated with 3-MA (1 mM) and propofol, then were exposed to $H_2O_2$. Cell viability and apoptosis were evaluated. Osteoblast maturation was determined by assaying bone nodular mineralization. Expression levels of bone related proteins were determined by western blot. Results: Cell viability and bone nodular mineralization were decreased significantly by $H_2O_2$, and this effect was rescued by propofol preconditioning. Propofol preconditioning effectively decreased $H_2O_2$-induced hFOB cell apoptosis. However, pretreatment with 3-MA inhibited the protective effect of propofol. In western blot analysis, propofol preconditioning increased protein levels of collagen type I, BMP-2, osterix, and TGF-${\beta}1$. Conclusions: This study suggests that propofol preconditioning has a protective effect on $H_2O_2$-induced hFOB cell death, which is mediated by autophagy activation.
본 연구는 성장중인 부정교합 환자의 진단이나 치료계획의 수립, 치료방법 및 시기, 예후등을 결정하는데 중요한 판단의 지침이 되는 치아성숙도와 경추 및 수완부 골 성숙도의 연령별 성숙정도와 이들 상호간의 연관성을 규명하여 개인의 보다 정확하고 효율적인 성장정도를 평가하기 위해 조선대학교 치과대학 부속치과병원 교정과에 내원한 환자중, 동일한 날짜에 촬영된 측모두부방사선규격사진과 수완부방사선사진 및 파노라마사진이 모두 있으며, 성장발육에 영향을 미칠 수 있는 구개파열 및 구순열등의 선천적 기형이 없는 1055명 (남자 458명, 여자 597명)을 연구대상으로 하여 상, 하악의 견치, 제1소구치, 제2소구치, 제2대구치의 치아성숙도와 경추 (CVMI)및 수완부 (SMI)의 골성숙도를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 남녀모두에서 치아성숙도와 경추 및 수완부 골성숙도 사이에 통계적으로 유의한 상관관계가 있었다 (P<0.001). 2. 남녀모두에서 수완부 골성숙도와 경추의 골성숙도 사이에 0.91-0.93의 높은 상관관계를 보였다. 3. 남녀모두에서 수완부 골성숙도와 상,하악의 견치, 제1소구치, 제2소구치 성숙도 사이에 0.8이상의 높은 상관관계를 보였다. 4. 경추의 골성숙도는 상악견치의 성숙도와 0.8의 높은 상관관켸를 보였다. 5. 남녀모두에서 연령별 경추 및 수완부의 골성숙단계와 치아성숙단계를 구하였다. 이상을 종합해볼 때, 경추 및 수완부 골성숙도와 치아성숙도는 개인의 사춘기 성장정도를 평가하여 부정교합 환자의 진단 및 치료계획을 수립하는데 유용한 정보를 제공할 수 있을 것으로 생각된다.면 서울시 환자가 전체 내원 환자의 $70\%$이상 차지하는 것으로 조사되었으며 서울시 내원환자중 연세대학교 치과병원을 중심으로 반경 3-6km의 거주자가 $32.3\%$로 가장 높게 나타났고 반경 9Km이내에서 전체의 $69\%$를 차지하였다. 4. 수평피개보다는 수직피개가 치근흡수에 미치는 영향이 컸으며 개방교합의 경향이 커질수록 치근흡수의 빈도가 높았다. 5. 개개 치아에서 나타나는 부정교합의 특징에 대해서는 반대교합과 개방교합을 함께 나타내는 치아에서 치근흡수의 빈도가 가장 높았다.를 보이지 않았는데 이는 다른 연구 결과와 유사한 결과이다.고 사료된다. 6. 치료전에는 차이가 없던 남,여군 사이에 치료후에 차이가 나타나는 것은 치료 효과에 관계없이 남여에 따른 성장양상의 차이가 그대로 표현된 것으로 사료된다. 연구는 거대 편도를 가진 기능성 III급 부정 교합자의 구개 편도 절제술 전후의 인두강, 설골, 두부 위치의 변화 양상에 대해 알아보기 위해 단국 대학교 부속 치과 병원 교정과에 내원한 남녀 환자 42명을 대상으로 연구하여 다음과 같은 결론을 얻었다. $55.19\%$로 첨가량이 증가하면서 두 항목 모두 크게 감소하는 결과를 보였다. 색도를 분석한 결과 L값, a값, b값 모두 표고버섯 분말 함량이 증가하면서 감소하였고, 모든 처리구에서 기존 무첨가구와 극히 현저한 차이를 보이는 것으로 나타났다. 시료별 관능검사 결과에서 색 (color), 먹을때의 느낌 (chewiness)과 단맛(sweetness)의 경우 무첨가구와
Purpose: Craniosynostosis (CS), one of the most common congenital craniofacial deformities, is the premature closure of cranial sutures. NELL-1 is a novel molecule overexpressed during premature cranial suture closure in human CS. From a functional perspective, NELL-1 has been reported to accelerate chondrocyte maturation and modulate calvarial osteoblast differentiation and apoptosis pathways. The mechanism through which NELL-1 induces these phenomena, however, remains unclear. The purpose of this study is to identify the NELL-1 binding protein(s) through which the biologic mechanism of NELL-1 can be further investigated. Materials and Methods: Far-Western and Immunoprecipitation (IP) assays were performed, independently and in sequence, followed by mass spectrometry to identify the NELL-1 binding proteins. Reverse IP was used to verify and confirm candidate binding protein. Results: The only confirmative protein from current experimentation was vimentin. Vimentin is the major structural component of the intermediate filaments. Conclusion: The present study identified and confirmed vimentin as a NELL-1 binding protein, which opened up a new window to mechanistically facilitate studies on this CS-associated molecule.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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