Um, In-Woong;Ku, Jeong-Kui;Lee, Bu Kyu;Yun, Pil-Young;Lee, Jeong Keun;Nam, Jeong-Hun
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제45권3호
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pp.123-128
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2019
Demineralized dentin matrix (DDM) has been used as a recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) carrier in many clinical trials. To optimize the clinical safety and efficacy of rhBMP-2 with DDM, efforts have been made to improve the delivery of rhBMP-2 by 1) lowering the administered dose, 2) localizing the protein, and 3) prolonging its retention time at the action site as well as the bone forming capacity of the carrier itself. The release profile of rhBMP-2 that is associated with endogenous BMP in dentin has been postulated according to the type of incorporation, which is attributed to the loosened interfibrillar space and nanoporous dentinal tubule pores. Physically adsorbed and modified, physically entrapped rhBMP-2 is sequentially released from the DDM surface during the early stage of implantation. As DDM degradation progresses, the loosened interfibrillar space and enlarged dentinal tubules release the entrapped rhBMP-2. Finally, the endogenous BMP in dentin is released with osteoclastic dentin resorption. According to the postulated release profile, DDM can therefore be used in a controlled manner as a sequential delivery scaffold for rhBMP-2, thus sustaining the rhBMP-2 concentration for a prolonged period due to localization. In addition, we attempted to determine how to lower the rhBMP-2 concentration to 0.2 mg/mL, which is lower than the approved 1.5 mg/mL.
Background: Rapamycin is an effective anti-angiogenic drug. However, the mode of its action remains unclear. Therefore, in this study, we aimed to elucidate the antitumor mechanism of rapamycin, hypothetically via apoptotic promotion, using MCF-7 breast cancer cells. Materials and Methods: MCF-7 cells were plated at a density of $1{\times}10^5$ cells/well in 6-well plates. After 24h, cells were treated with a series of concentrations of rapamycin while only adding DMEM medium with PEG for the control regiment and grown at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ and 95% air for 72h. Trypan blue was used to determine the cell viability and proliferation. Untreated and rapamycin-treated MCF-7 cells were also examined for morphological changes with an inverted-phase contrast microscope. Alteration in cell morphology was ascertained, along with a stage in the cell cycle and proliferation. In addition, cytotoxicity testing was performed using normal mouse breast mammary pads. Results: Our results clearly showed that rapamycin exhibited inhibitory activity on MCF-7 cell lines. The $IC_{50}$ value of rapamycin on the MCF-7 cells was determined as $0.4{\mu}g/ml$ (p<0.05). Direct observation by inverted microscopy demonstrated that the MCF-7 cells treated with rapamycin showed characteristic features of apoptosis including cell shrinkage, vascularization and autophagy. Cells underwent early apoptosis up to 24% after 72h. Analysis of the cell cycle showed an increase in the G0G1 phase cell population and a corresponding decrease in the S and G2M phase populations, from 81.5% to 91.3% and 17.3% to 7.9%, respectively. Conclusions: This study demonstrated that rapamycin may potentially act as an anti-cancer agent via the inhibition of growth with some morphological changes of the MCF-7 cancer cells, arrest cell cycle progression at G0/G1 phase and induction of apoptosis in late stage of apoptosis. Further studies are needed to further characterize the mode of action of rapamycin as an anti-cancer agent.
목적: 국내 치위생학을 전공하는 학생들의 방사선 안전행위 수준 확인을 위해 방사선 안전관리 지식, 태도, 행위 수준을 분석하여 교육학적 근거를 도출하고자 하였다. 대상 및 방법: 한국대학교육협의회 대학정보공시센터(대학알리미)에 등록된 전국 83개교 치위생(학)과에 재학중인 3,4학년을 대상으로 하였으며 연구도구는 설문지이다. 설문조사는 대학별 각 20부(총 1,660부)를 방문, 우편, e-mail의 방법으로 배포하여 수거된 응답지 중 신뢰도를 확보하고 있는 총 723부를 SPSS/WIN 15.0를 사용하여 빈도, 백분율, 평균과 표준편차, Pearson's correlation으로 분석하였다. 결과: 방사선 안전관리에 대한 치위생(학)과의 지식, 태도, 행위는 모두 상관관계가 있는 것으로 나타났다. 즉, 방사선 안전관리에 대한 행위수준을 높이기 위해서는 지식, 태도 수준을 높일 수 있는 교육이 적용되어야 한다. 또한 개인의 행위에 가장 상관성이 높은 변수는 물리적 환경에 대한 변수로, 이는 물리적 환경이 갖추어져 있지 않으면 방사선 안전행위 수준을 높이는데 한계가 있음을 의미한다. 따라서 치위생(학)과의 방사선 안전행위 수준을 높이기 위해 물리적 환경을 보완해야 하며 개인의 방사선 안전관리 태도 수준 또한 물리적 환경에 대한 태도 변수와 가장 상관성이 높으므로 방사선 안전관리에 대한 개인의 태도 수준을 높이기 위해 물리적 환경에 대한 변수를 보완해야 한다. 결론: 방사선 안전관리에 대한 태도보다 지식이 상대적으로 낮고, 행위 수준이 가장 낮으므로 안전 행위에 대한 강화된 교육정책이 도입되어야 할 것이며 국내의 경우 치위생(학)과를 졸업한 치위생사들이 치과병원에서 전국민의 구강 방사선 촬영 시 방사선 피폭을 감소시킬 수 있는 주체이므로 현재의 교육 시스템에서 방사선 안전관리 행위 수준을 향상시킬 교육적 개입이 필요하다.
본 연구자들은 Cumin(Cuminum cymium L.) seed로부터 정제한 $2-hydroxyethyl-{\beta}-undecenate$의 항치주염 활성을 사람의 백혈구를 이용하여 염증 매개물질 $LTB_4$ 및 PGs의 생성 효소인 5-lipoxygenase와 cyclooxygenase, 및 조직파괴 효소인 collagenase와 elastase의 저해 효과를 규명하여 다음과 같은 결론을 얻었다. HPS의 항치주염 활성을 사람의 백혈구를 이용하여 염증 매개물질 $LTB_4$ 및 PGs의 생성 효소인 5-lipoxygenase와 cyclooxygenase 및 조직파괴효소인 collagenase와 elastase의 저해효과를 규명한 결과, HPS은 $5\;{\times}\;10^{-2}\;M$ 첨가 시 97%의 PMNL로부터 $LTB_4$ 생합성이 저해되었으며 이때 $IC_{50}$ 값은 $2\;{\times}\;10^{-4}\;M$ 이었다. 균질화된 사람의 PMNL 5-lipoxygenase 및 시판 정제 5-lipoxygenase 활성에 대한 HPS의 저해 효과는 $5\;{\times}\;10^{-2}\;M$첨가 시 92%의 효소 활성이 저해되었다. 또한 효소 활성에 대한 $IC_{50}$ 값은 $2.5\;{\times}\;10^{-4}\;M$이었으며, 정제 5-lipoxygenase에 대한 $IC_{50}$ 값은 $2.3\;{\times}\;10^{-4}\;M$이었다. 또한 백혈구 COX 활성에 대한 $IC_{50}$ 값은 $5.1\;{\times}\;10^{-4}\;M$이었고, 정제 COX에 대한 $IC_{50}$ 값은 $2.3\;{\times}\;10^{-4}\;M$이었으며, 백혈구 collagenase 활성에 대한 $IC_{50}$ 값은 $2\;{\times}\;10^{-3}\;M$이었고 정제 collagenase에 대한 $IC_{50}$ 값은 $5\;{\times}\;10^{-2}\;M$이었다. 백혈구 elastase의 경우 $5\;{\times}\;10^{-2}\;M$ 첨가 시 66%의 활성이 저해된 반면 정제 elastase의 경우 $5\;{\times}\;10^{-2}\;M$ 첨가 시 25%의 효소 활성이 저해되었다. 또한 백혈구 elastase 활성에 대한 $IC_{50}$ 값은 $7.5\;{\times}\;10^{-3}\;M$이었다. 인체 치은세포에 대한 독성 시험 결과 $5\;{\times}\;10^{-2}\;M$의 HPS 첨가시 세포의 활성은 배양 2일째 47.83%로 나타났으며, $1\;{\times}\;10^{-2}\;M$의 HPS 첨가시에도 68.53%로 나타나 비교적 세포독성이 강한 것으로 나타났다.
분비백혈구단백분해효소억제제 (SLPI)는 염증 부위에서 중성구 엘라스타제에 의한 손상 작용에 대해 조직을 보호하는 역할을 한다. SLPI의 새로운 기능에 대한 연구들은 단백질분해효소억제제 역할보다는 선천적 면역반응 작용에 주로 관여 할 것임을 보고하였다. 따라서 본 연구는 섬유모세포 세포주(NIH3T3)에서 박테리아성지질다당류(LPS)자극에 의한 SLPI의 기능을 확인하기 위하여 LPS처리에 따른 여러 성장 인자들과 비교하여 SLPI의 발현을 알아보았다. 역전사효소 중합반응(RT-PCR)과 면역학적 단백질 검출법 (Western blot)은 LPS 처리 후 SLPI와 몇몇 성장 인자들(VEGF, bFGF, PDGF)의 mRNA와 단백질의 검출을 위해 수행하였다. NIH3T3 세포주를 mL당 100ng의 LPS에 각각 30, 60, 90분, 24, 48시간 동안 노출시켰다. RT-PCR 결과 SLPI와 VEGF mRNA는 LPS처리와는 상관없이 강한 발현 양상을 보였다. bFGF mRNA는 대조군과 같이 약하게 발현하였고, PDGF mRNA는 LPS 노출 시간에 따라 점진적으로 증가하는 양상을 나타냈다. 그러나 세포질 용해액과 세포 배양액에서 SLPI단백질의 수준은 LPS처리에 의해 증가하였다. 또한 광학 현미경 관찰과 전자 현미경 관찰은 LPS가 NIH3T3세포주의 형태학적인 변화를 유발시킴을 증명하였다. 따라서 LPS는 NIH3T3세포에서 SLPI의 발현 증가를 조절하며, 분비된 SLPI는 세포분열과 이동을 자극할 것이라는 결론을 얻었다. SLPI가 세포분열과 세포이동에 어떻게 관여하는지는 아직까지 규명되지 않은 실정이므로-추후에 SLPI단백질이나 유전자 도입을 통하여 세포 이동에 관련된 실험이 진행되어야 할 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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